التحليل البكتريولوجي. تشخيص الأمراض المعدية

دراسات البكتريولوجية طريقة patmateriala لعزل وتحديد المتفطرات يضم 3 طرق: bacterioscopic والثقافية والبيولوجية / R.V.Tkzova، 1983؛ II Rumachik، 1987،1993؛ AS دونتشينكو ، 1989 ؛ YY قاسيشا ، 1990 ؛ AH Naimanov، 1993؛ ل. ف. خودون ، 1997. وقت البحث البكتريولوجي  يجب ألا يتجاوز 3 أشهر.

وبالنظر إلى أن السل التغييرات العيانية في الأعضاء والأنسجة من السل البقري هو العامل المسبب لأنواع الأبقار، واستكشاف ثقافة لا مادية لا معنى له. إذا تم تسليم المواد إلى المختبر للبحث وتوليد التفتيش التابعة للجنة ووضع البيان. يتم جعل المواد غير ضارة.

Bacterioscopic (المجهر) التحقيق من المواد في إعداد كل الجسم (أو هيئة القطع مع التغييرات السل المشبوهة) والعقدة الليمفاوية تسليمها للدراسة 2 التشهير وتجفيفها في الهواء، ومصباح تثبيت روح اللهب، وتلطيخ Tsil- نيلسن وعرض ملطخة المهبلي تحت المجهر، وما لا يقل عن 50 حقلا نظر في كل شوط. ومن الضروري إعداد لا يقل عن 20 مسحات من المواد جثة واحدة. وعلاوة على ذلك، يتم إعداد مسحات للأيضا كانت مطلية بها على المغذيات المواد الطين المتوسطة المجهر.

تلوين تشويه تسيل نيلسن هو الانتخابات لتحديد المتفطرات: على خلفية زرقاء من الأقمشة الملونة أو دخيلة المتفطرات البكتيريا ينظر إليها على أنها الأحمر والوردي أو روبي العصي الحمراء. فمن الأفضل لعرض مسحات تحت المجهر الرصاص مجهر مجهر بزيادة قدرها 1.5 (فوهة) × 7 (بصري) × 90 أو 100 (العدسة).

يتم استخدام الأسلوب كإشارة، عن وجود أو عدم وجود عصيات في المسحات الإطلاق أي تأثير على مجرى مزيد من البحث وحتى تشويه الرأي الإيجابي له أي دلالة قانونية (غير الطيور). يجب التحقيق في المواد كذلك.

ويعتبر إنشاء مختبر تشخيص السل في الطيور إذا كانت المادة الاختبار من ثقافة معزولة من الأنواع الفطرية من الطيور (من الببغاوات - نوع الإنسان أو الطيور)، وحصل نتيجة إيجابية  اختبارات بيولوجية والكشف عن المتفطرات في مسحات من المواد المرضية مع الفحص المجهري  (الفقرة 7.3.2 من الدليل).

ومن الضروري أن تولي اهتماما أيضا إلى حقيقة أن إعداد التشهير وتثبيت وجهة نظر وقتا طويلا جدا، ووجد فيها المتفطرات نادرا ما ينجح، وحتى في مسحات من المواد الطين المصنفة. ولذلك، من أجل توفير الوقت والموارد المادية في الدراسة من الحيوانات التي كان أي تغيير عند الذبح، فإنه من المستحسن لتقييد عرض الطبخ وتلطخ الوحيد للخروج على المغذيات المواد الطين المصنفة المتوسطة. هذا لن يؤدي إلى ضرر في تشخيص مرض السل ، لأن دراسة المواد تستمر أكثر من ذلك.

بالإضافة إلى الميكروسكوب الضوئي التقليدي ، يمكن استخدام المجهر الضوئي. يتم تحضير مسحات بطريقة مماثلة وثابتة وملطخة بمزيج من fluorochromes. يتم فحص السكتات الدماغية الملونة تحت المجهر الفلوري. تعتبر الطريقة أكثر حساسية ، ولكنها أقل تحديدًا ، وبالتالي فهي ليست مناسبة جدًا ، خاصة في ظروف المختبرات العملية.

إن العزلة الثقافية للمتفطرات على وسائل الإعلام المغذية هي إحدى الروابط الهامة في التشخيص المختبري لمرض السل في المرحلة الحالية. ومع ذلك، وسائل الإعلام المغذيات، ما قد زرع المواد (5-10 أنابيب وفقا للتعليمات) في الأسابيع الأولى 2-3 لديهم الجزئي أو الكامل الداعمة للنمو، وعادة ما يرجع إلى انتهاك العقم في المواد البذر. ورفض المحاصيل في الوقت ذاته عندما المظهر الأكثر احتمالا للنمو الأولي من المتفطرات غير نمطية (ناهيك عن مظاهر الأولي للنمو المتفطرة السلية، مما يدل على النمو حتى في وقت لاحق). في مثل هذه الحالات ، يتم استبعاد طريقة الزراعة لعزل المتفطرات على الوسائط الغذائية بطريقة آلية. هذا هو أحد الأسباب الرئيسية للحصول على نتائج سلبية  مع دراسة بكتريولوجية للمادة. ونتيجة لذلك، دون الحصول على نمو مستعمرة من المتفطرات على وسائل الإعلام المغذيات بعد زرع المواد، ونجا حيوانات المختبر لمدة 3 أشهر، ينبغي أن يكون الرد المعتاد من المختبرات: "لا يتم تخصيص جراثيم السل" أو "مواد الامتحان السلبية لمرض السل." وبناء على نتائج البحوث في أسباب السلين استجابة البقري غير مثبت، وهذا يؤدي إلى مزيد من ذبح غير مبرر من كمية كبيرة من رد فعل على السلين الحيوانات في أماكن العمل خالية من السل البقري، والذي يسبب خسائر اقتصادية كبيرة ينتهك التداول والاستنساخ من القطيع.

وبالنظر إلى ما سبق ، ينبغي إعطاء الأولوية لطريقة الزراعة لعزل المتفطرات من المواد الموجودة على وسائط المغذيات ، باعتبارها الحلقة الأضعف في التشخيص الجرثومي لمرض السل في المختبرات البيطرية بالمقاطعة.

تعتمد النتائج الإيجابية لطريقة الزراعة لعزل المتفطرات بشكل رئيسي على عاملين: زيادة في موثوقية البكتريا الفطرية من المادة ومراعاة الظروف المعقمة عند العمل في الصندوق.

وتعتمد الزيادة في موثوقية البذرة الفطرية من المواد المأخوذة للتحقيق ، أولاً وقبل كل شيء ، على اختيارها النوعي والعلاج المسبق وزيادة عدد أنابيب الاختبار للوسط الذي يزرع فيه المحصول.

الشروط الرئيسية ، والامتثال عندها عندما زرع المواد الغذائية على وسائل الإعلام يضمن نمو مستعمرات من المتفطرات:

أ) مواد مختارة للفحص البكتريولوجي من الحيوانات النافقة، وكان أي تغيير عند الذبح، منفصلة عن بعضها الذبيحة والمصنف 10-20 أنابيب كل المتوسطة العينة (المواد من كل حيوان) على النحو التالي:

العقد الليمفاوية من الرأس (submaxillary ، zaglugochnye) ؛

الغدد الليمفاوية القصبي و المنصف.

الغدد الليمفاوية المساريقية (المساريقية) ؛

العقد الليمفاوية الأخرى (في وجود مناطق مريبة) ؛

الأجهزة (أيضا إذا لزم الأمر).

نتيجة لذلك ، نزرع المواد من حيوان واحد إلى 30-50 أنبوب متوسط. هذا يحقق زيادة في الموثوقية من المتفطرات بذر 3-5 مرات، وبدون تقسيم العينات (عن طريق تعليمات) بذر المواد ينصح جميع الأنابيب 5-10 البيئة من اثنين من رؤساء مزرعة واحدة.

ب) مباشرة في المواد قطع المحاصيل باكتريولوجي مع القطع المكسورة من هيكل الصرفي من العقدة الليمفاوية أو الجسم (تضخم، نقطة وختم النطاقات نزيف، وما إلى ذلك). ومن الضروري قطع جميع المناطق المتغيرة. إذا كانت المادة بالحجم تتضح كثيرًا في هاون واحد ، فيمكن تقسيمها إلى قسمين.

ج) التقيد الصارم بالطريقة المستخدمة في العمل دون خرق طريقة معالجة وبذر المادة.

د) عند تجانس المادة ، خاصة الغدد الليمفاوية ، من الضروري استخدام الرمل العقيم أو الزجاج المعقم المفروم. الحد الأقصى لطحن المواد (حتى الاتساق دسم) لاستخراج أفضل من المتفطرات من مواد الاختبار

د) إضافة المالحة للمادة متجانسة في هاون في المبلغ اللازم لبذر مادة الطين على وسائل الإعلام المغذيات والأحيائي (في المتوسط ​​إلى 0.5 سم 3 في أنبوب واحد 1 و -2 CM3 للعدوى تحت الجلد خنزير غينيا واحد). يمكن حساب هذا المبلغ من المالحة مقدما.

ه) استعراض محصول المواد في 3 و 5 و 7 و 10 و 15 يوما ثم مرة واحدة في الأسبوع.

ز) أي الكائنات الحية الدقيقة التي تزرع في مستعمرة المتوسطة (الغشاء المخاطي نموذجي أو شاذة، العديم الميلانين أو الصباغ، أو جافة نوعا ما، الخ) يجب أن تمر خلال المجهر الانتخابات الملون وفقا لتسيل-نلسن.

يجب الانتباه إلى درجة غسل المادة من الحمض (أو القلوي) المستخدم في معالجة المادة من التلوث بواسطة البكتيريا الدخيلة. ستظل الكميات المتبقية من الحمض موجودة دائمًا في المادة المعلقة من المادة المزروعة ، ولكن يجب أن تكون صغيرة جدًا. مؤشر على ذلك هو استعادة اللون الأولي للوسط في اليوم الثاني والرابع بعد غرس المادة. إذا لم يتم استعادة لون الوسيط ، فهذا يدل على زيادة كمية الحمض المتبقي. يكتسب لون الوسيط لونًا أزرقًا متفاوتًا الكثافة. وتباطأ ارتفاع (المفترضة) المتفطرات في هذه الحالة، أو أنها لن تفعل، خاصة أن العامل المسبب للمرض السل في نظام زراعة أكثر تطلبا. كمية المتبقية من الأفعال الحمضية على الميكوبكتريا إلى حد ما.

لختم الأنابيب بعد ويمكن استخدام المواد بذر القطن وأنبوب القطن الشاش تليها شغل لهم مع البارافين، المطاط والمطاط غير الممثلة قطع مع الأخدود منحرف، القشرية والمعادن قابس (إغلاق).

الثقافة عندما أنواع معينة من الملحقات مخصصة من المتفطرات معروف للكثيرين (حوالي 300) من اختبارات مختلفة: الثقافة والمورفولوجية والبيولوجية، والكيمياء الحيوية، مصلية، وتحديد المقاومة للأدوية، الخ ومع ذلك ، في الممارسة البيطرية ، يتم تطبيق الحد الأدنى (انظر الدليل). للمختبرات كافية تعريف ثقافة معزولة التالية الأنواع المتفطرات: الأبقار والبشري والطيور، على النحو الذي يحدده الأحيائي، والمتفطرات شاذة - تقسيمها إلى مجموعات وفقا لرونيون (1959): I - fotohromogennye (تشكيل الصباغ عند التعرض للضوء)، II - skotohromogennye (تشكيل الصباغ المتفطرات تنمو بسرعة وkislousto - بغض النظر عن التعرض للضوء - وفي الظلام والنور)، III - nehromogennye (وليس تشكيل الصباغ) وإلا ما يطلق عليه العديم الميلانين (هنا على النحو المشار إليه الممرض من أنواع الطيور والسل)، والرابع Alikhan'yan آخرون الفطور الرمامة.

ويكفي أن من الفعالية والجدوى الاقتصادية لدراسة خصائص مخطط ثقافة مكثف المختارة التي يتم التركيز على توقيت حدوث نمو مستعمرة الأولية، وتصبغ الخصائص الثقافية المورفولوجية وتلويني، عندما الملون وفقا لتسيل-نلسن. هام بشكل خاص هو اختبار تشكيل الحبل في الابتدائي أو حتى في الثقافة الفرعية مع نتائج الاختبار الأحيائي. لإعداد مسحات من المستعمرات في نفس الوقت فإنه من المستحسن القيام بها من المستعمرات ومن بقايا الطين والمكثفات، أي من الجزء السائل في الجزء السفلي من أنبوب الاختبار.

وبالإضافة إلى ذلك، يكون العاملين في المختبرات الفرصة للقيام ليس فقط من ذبح السيطرة على رد فعل على السلين الحيوانات وأخذ عينات من المواد في أغراض البحوث، ولكن أيضا لتحديد للفحص البكتريولوجي في الحياة الحيوانية (الشعب الهوائية أو مخاط الأنف، الحليب، البراز، البول، السائل والدم وهلم جرا. د.)، وتغذية عينة والمياه والكائنات البيئية لتخصيص المتفطرات وبالتالي تسبب بشكل غير مباشر إثبات استجابة الماشية إلى السلين. في زرع المواد والعينات إضافية من البيئة من الكائنات باستخدام أساليب معروفة من التركيز الفطرية: الترسيب، والتعويم، والترسيب، والتعويم وغيرها.

انخفاض مخطط التمايز بين الفطريات باستخدام التحليل الأحيائي

الطريقة البكتريولوجية  يشمل bacterioscopy المواد من المريض، والعزلة ثقافة نقية والتعرف على العوامل المسببة للأمراض مع تحديد حساسية للمضادات الحيوية وأدوية العلاج الكيميائي.

اختيار المواد للأسلوب التحقيق bacterioscopic يعتمد على المسببات المفترض من المرض، ومرحلة المرض بسبب المرضية والخصائص البيولوجية من مسببات المرض وعوامل أخرى.
1. في الأمراض المعدية وانطلاقا مع تجرثم الدم (حمى التيفوئيد، والصرف الصحي تعميم أشكال السالمونيلا)؛ في الإنتان أي المسببات، لا يسبب فقط قيحي البكتيريا مكورة، كولاي، ولكن أيضا أكثر ندرة أنه الممرضات (السراتية Salinaria، nonfermenting البكتيريا والبكتيريا اللاهوائية، L-شكل العقدية (طريقة Sukneva) والكائنات الدقيقة الأخرى)، واللجوء في هذه الحالات للمحاصيل على وسائط مغذية خاصة. وينبغي التأكيد على أن نجاح الطيف الترددي تخصيص ومسببات الأمراض من الدم وغيرها من الأسرار البيولوجية المريض يعتمد على سعة الاطلاع، والفضول، وعمال المثابرة مختبر البكتريولوجي.
2. السائل النخاعي (التهاب السحايا القيحي، والتهاب السحايا السلي خلال زراعة لفترات طويلة (أكثر من شهر) لاختيار على البكتيريا المسببة للسل خاصة وسائل الإعلام المغذيات.
3. البلغم ( الالتهاب الرئوي الحاد  والتهاب الرغامى و القصبات والسل والسعال الديكي، والطاعون، والأشكال النادرة حمى التيفوئيد  (Pnevmotif)، الفيلقيات، داء المفطورات التنفسي والكلاميديا).
4. المخاط، الصديد من اللوزتين (stafilokkovye والعقدية التهاب في الحلق).

5. البلاك والمخاط من اللوزتينوحنجرة والإفرازات الأنفية من الملتحمة والأعضاء التناسلية (الدفتريا).
6. القشط من الغشاء المخاطي للأنف (الجذام).
7. إبراء الذمة من الأنف والبلعوم (sinuitis، نتن الأنف، rinoskleroma).

8. ذمة السائل، وقطع من المصابين nekrozirovannye الأنسجة العضلية (التهابات اللاهوائية)؛ الجروح المنفصلة (التسمم ، إذا لزم الأمر ، الكزاز).
9. منقط من العقد الليمفاوية الموسع (السل، وداء المقوسات).
10 المحتوى من الساق السوداء ومنقط المتقيحة العقد (الطاعون، حمى الأرانب، انتان الدم قيحي المنشأ، والجمرة الخبيثة).

الدراسات البكتريولوجية  مع وجه الخصوص التهابات خطيرة  (الطاعون، حمى الأرانب، الحمى المتموجة، والكوليرا (الذي يدرس فقط البراز (!)) يتم تنفيذها في نظام المختبرات الخاصة، واستبعاد إمكانية الإصابة الذاتي لموظفيها في العمل مع الثقافات البكتيرية وانتشار مسببات الأمراض وراء هذه المختبرات.

الاختبارات المصلية. نفذت في العيادة بعد ذلك بقليل طريقة البكتريولوجيةاقترحه ر. كوخ. في عام 1896، اكتشف F. فيدال أن المصل من المرضى الذين يعانون من حمى التيفوئيد قبل نهاية 1st أسبوع من المرض يكتسب القدرة على التصقت عصا التيفوئيد - العامل المسبب للحمى التيفوئيد ( رد فعل ايجابي  فيدال). في الأمراض المعدية متعدد المكروبات بعد فتح فيدال لجأت أيضا إلى تحديد راصة عيار المصل المخصص للمادة المرضية من العديد من الأنواع البكتيرية (رد فعل autovidalya) والسيطرة على ديناميتها، وهذا يتوقف على مرحلة المرض. أعلى التتر من الملزن إلى واحد من أنواع البكتيريا المعزولة يشهد لصالح المزيد من تورطه المسبب للمرض في تطور هذا المرض.

بالفعل في البداية تطبيق رد فعل فيدال  في العيادة، لوحظ أن أكثر أشكال حادة، على سبيل المثال، حمى التيفوئيد يمكن المضي قدما في غياب راصة الدم (رد فعل فيدال السلبي) الذي يشير إلى القيمة التشخيصية النسبية الأسلوب كما في حمى التيفوئيد وغيرها من الأمراض المعدية. في وقت لاحق ، تم استبدالها بأكثر من الطرق المصلية الحساسة. لكن أولوية اكتشاف فيدال ستبقى إلى الأبد.

في الوقت الراهن، للتشخيص المصلى  الالتهابات البكتيرية باستخدام تقنيات أكثر حساسية عند الممتص منها مستضد البكتيرية على سطح خلايا الدم الحمراء (diagnostikumy1 الكريات الحمر). مباشر (فا) والتراص غير مباشر (ريغا): وهكذا، تم وضع الاختبارات المصلية جديدة كليا. وهي تستخدم على نطاق واسع لأغراض التشخيص المصلي لكثير من الأمراض البكتيرية والفيروسية وغيرها المعدية (التيفوئيد، السالمونيلا، داء الشيغيلات والحمى المتموجة، حمى الأرانب، وما إلى ذلك). فإنه يحتفظ القيمة التشخيصية لها من رد فعل هطول الأمطار في بعض الأمراض (التسمم الغذائي والجمرة الخبيثة - اسكولي رد فعل على التشخيص لها في الحيوانات). لتشخيص مصلي خصوصا على نطاق واسع المستخدمة حاليا تكملة تثبيت (RSK)، اقترح في عام 1901 من قبل الباحثين الفرنسي بورديه وجينغو (الزهري والسيلان والحمى المالطية وداء المقوسات والسل والجذام والرعام). RSK من أهمية قصوى ل serodiagnosis الالتهابات الفيروسية  (الإنفلونزا، السارس أخرى، والهربس، والتهاب الدماغ والتهاب الغدة النكفية، الببغائية وآخرون)، فضلا عن العديد من rickettsioses.

طرق باكسترولوجية  - مجموعة من الأساليب والتقنيات التي تستخدم لكشف وعزل الممرضة أو الانتهازية البكتيريا المسببة للأمراض  من المرضى أو الناقلين أو من كائنات البيئة الخارجية.

وتحسنت تقنيات الجرثومية وإثراء في سياق التطور التاريخي لعلم الأحياء المجهرية وفروعها الفردية. شخصية التقنيات البكتريولوجية يتم تحديدها من خلال الغرض من الدراسة ، وظروف الموئل من الميكروبات في الكائن التحقيق ، وخصائصها البيولوجية ، فضلا عن التسبب في المرض الذي يجري الفحص البكتريولوجي. على سبيل المثال ، في الأمراض المصاحبة لجرثومة الدم ، أفضل طريقة للكشف عن العامل الممرض هي زرع دم المريض. في وجود الآفات المحلية وضوحا (الدفتريا ، والدوسنتاريا ، والسيلان ، وما إلى ذلك) ، وزرع من إفرازات أو إفرازات من الجهاز الذي يتم تحديد موقع البكتريا. مهما كانت المهام التي يواجهها الباحث ، فهي تتم بشكل أساسي باستخدام نفس التقنيات البكتريولوجية المستخدمة في تسلسل معين لعزل وتحديد الكائنات الحية الدقيقة.

تعتمد عزلة البكتيريا من المادة قيد البحث إلى حد كبير على صحة جمعها. إن طبيعة ومنهجية أخذ وإرسال المواد لمختلف الأمراض المعدية ليست هي نفسها ، ولكن هناك أحكام عامة، والتي يجب أن تؤخذ بعين الاعتبار بغض النظر عن موضوع الدراسة وخصائص المادة.

1. يتم جمع المواد المحققة ، إن أمكن ، في ظروف معقمة في أطباق معقمة ، مسترشدة بأهداف وغايات هذه الدراسة. على سبيل المثال ، في دراسة اللاهوائيات ، تؤخذ المادة من الطبقات العميقة من الأنسجة ، في تشخيص الخناق ، فمن الضروري التأكد من أن المسحة لديها لطاخة من اللوزتين ، وليس لمسة سطحية لهم.

2 - عند أخذ المادة الدراسية ، ينبغي وضع وثيقة مناسبة ، ينبغي فيها الإشارة إلى تاريخ الجمع ، وطبيعة المادة ، ومصدرها والغرض الدقيق منها.

3. يجب أن يتم تسليم المادة التي تم التحقيق فيها بسرعة إلى المختبر. يؤدي تخزين المواد على المدى الطويل إلى موت البكتيريا ويقلل من احتمال اكتشافها. 4. عند الضرورة ، قبل الشحن إلى المختبر ، يتم تخزين المواد المراد فحصها في مكان بارد.

5. تخضع المواد البحثية المقدمة للمختبر لأسرع البحوث.

Bacterioscopy (bacterioscopy) للمواد المدروسة - واحدة من التقنيات البكتريولوجية الأكثر شيوعًا. في الممارسة المخبرية ، يتم استخدام الفحص المجهري للأدوية المحلية والثابتة. في الحالة الأولى ، يتم تحضير المستحضرات من المواد الطازجة غير المعالجة ، والتي يتم تطبيقها على شريحة نظيفة ، مغطاة بغطاء زجاجي و microscopized. يجب أن تكون الشرائح للاستعدادات واضحة ونظيفة وخالية من الشحوم ، بسماكة 1 - 1.2 مم. يتم معالجة وتنظيف النظارات بطرق مختلفة. واحد منهم موضح أدناه. أولا ، يتم غليان النظارات في محلول 1 ٪ من الصودا ، ثم تغسل بالماء وحمض الهيدروكلوريك وأخيراً مرة أخرى بالماء. يتم تخزين النظارات في كحول بنسبة 95 ٪ في جرة مع سدادة زجاجية أرضية أو محو الجافة في حاويات مختومة. خلال الفحص المجهري الاستعدادات الأم أعدت من الثقافات البكتيرية نقية، يمكن تحديدها في البكتيريا، سلسلة من الهياكل الشكلية حسب الخصائص النسيجية وذلك باستخدام وصمة عار الحيوية، على سبيل المثال، فإن وجود تخفيف كبسولة تلطيخ الأزرق الميثيلين. يتم أيضا إجراء الفحص المجهري للبكتيريا داخل الجراثيم في المستحضرات - انخفاض شنقا  (سم).

المزيد من تنظير البكتيريا من الأدوية الثابتة على نطاق واسع. يتم وضع قطرة من الماء المعقم على زجاج نظيف وشحمي ، يتم فيه صب المادة المراد فحصها في حلقة بكتيرية مكررة ومبردة.

يتم نشر قطرة من المواد على الزجاج في طبقة رقيقة موحدة. يتم تدمير ما تبقى من المواد في الحلقة عن طريق التكليس. يتم تطبيق مادة الاختبار الكثيفة (البلغم ، القيح ، إلخ) على شريحة وتغطيتها بزجاج ثانٍ بحيث تظل النهايات مجانية. الضغط على الزجاج إلى بعضها البعض ، سحق المواد ودفع النظارات بعيدا ، في حين تلقي اثنين من مسحات موحدة (الشكل 1). يتم تطبيق الدم والأجسام السائلة الأخرى على طول الخط الأوسط من الزجاج أقرب إلى أحد الأطراف. يوضع الزجاج أفقياً ، ويمسك به من أضلاعه. يتم جلب الزجاج المطحون (أو الغطاء) إلى قطرة بزاوية 45 درجة. بعد انتشار الهبوط ، يتم تحريكه على طول شريحة (الشكل 2). يجب أن تكون اللطخة الناتجة أضيق من الشريحة ، موحدة في الكثافة ، مع حواف متساوية.

من الأجهزة أو المستعمرات البكتيرية وغيرها من الأشياء ، يتم إعداد الاستعدادات-البصمات أيضا. يتم وضع قطعة من الأعضاء ، مثبتة بالملقط ، على سطح القطع على الشريحة على الخط الأوسط ، ويتم وضع بصمات المستعمرات البكتيرية على زلة الغطاء.

تجفف الاستعدادات المعدة في درجة حرارة الغرفة أو في منظم الحرارة. المخدرات غير الثابتة معدية ، لذلك عند التعامل معها يجب مراعاة القواعد التحذيرية بعناية ، لا تلمس السطح الزجاجي بيديك. يتم إعداد المستحضر المجفف على سطح الزجاج. عندما يتم إصلاح الدواء ، يتم تطهيره في وقت واحد. في الممارسة البكتريولوجية ، فإن الطريقة الأكثر شيوعًا للتثبيت هي المشتعلة ، مع تثبيت الحرارة في لهب الموقد. للقيام بذلك ، لطخت الدواء ثلاث مرات من خلال اللهب. يجب أن يستمر عمل الشعلة لمدة 2-3 ثانية في المتوسط. التثبيت المطول مع الحرارة يقلل من جودة الدواء ، ويتم غسلها الاستعدادات التي لم تنته خلال العلاج اللاحق وإخفاء خطر العدوى. في دراسة بنية بعض أجزاء من البكتيريا ومسحات الدم، وتستخدم بصمات الجثث وتحديد السائل المستخدمة في ممارسة النسيجية (ميثيل الكحول، الكحول الإيثيلي، spirtformol خليط نيكيفوروف، والسوائل Carnoy وغيرها.). بعد ذلك ، تكون المستحضرات ملطخة (انظر الشكل. تلوين الكائنات الدقيقة) ودرس باستخدام المجهر.

يستخدم بكتريوسكوبي على نطاق واسع للتشخيص الجرثومي للسل ، السيلان ، التيفوئيد المتكرر وغيرها الأمراض المعدية.

تعتبر زراعة وإعادة زراعة الثقافات البكتيرية أحد العناصر الرئيسية للتقنيات البكتريولوجية. أسلوب نقل البكتيريا إلى آغار المنحدر يتلخص في التالي. أنابيب الثقافة أو غيرها من البذور والمتوسطة uninoculated اتخذت في الذراع الأيسر بحيث الأنبوب مع ثقافة أقرب إلى العمل، وزرعت مع البيئة - بعيدا عنه. يجب أن تكون أسطح أجار مواجهة لأعلى. في اليد اليمنى ، تأخذ حلقة بكتيرية وتكلسها في شعلة الموقد ، مروراً باللهب وجزء من مقبض حامل الحلقة (انظر الشكل. حلقة جرثومية). يتم التأكد من أن حلقة المكلسة لا تلمس أي شيء. بعد ذلك ، يتم استيعاب المقابس القطنية للأنابيب تحت الأصبع الصغير من اليد اليمنى ، وإزالتها والاحتفاظ بها حتى أثناء البذر لا تلمس أي شيء. حرق حواف أنابيب الاختبار المفتوحة في شعلة الموقد ، يتم إدخال حلقة معقمة في أنبوب اختبار مع الثقافة. تم لمس الحلقة إلى منطقة أجار غير مرخص ، وإذا لم تذوب ، فهذا يعني أن السلك يتم تبريده بشكل كاف. إذا كان الأغار يذوب ، ثم يتم تبريد الحلقة ، دون إزالتها من أنبوب الاختبار. يتم لمس الحلقات المبردة على سطح نمو البكتيريا ، ويتم أخذ حركة انزلاق خفيفة على حلقة الثقافة ونقلها بسرعة إلى أنبوب غير مطهو. عند النقل ، لا تلمس حواف وجدران كل من الأنبوبين بحلقة. يتم تخفيض حلقة الثقافة في مياه التكثيف والبذور عن طريق طحن المواد على سطح أجار (الشكل 3). بإخراج حلقة ، فإنها تحرق حواف أنابيب الاختبار وتغلق القابس فوق اللهب. يتم تعقيم الحلقة عن طريق التكليس في لهب الموقد ووضعها في حامل ثلاثي القوائم. إن أسلوب البذر على المواد الغذائية السائلة هو في الأساس نفس الأسلوب عند البذر على الوسائط الصلبة. عند العمل مع وسائل الإعلام السائلة بحاجة للتأكد من أن يسكب السائل خارج الأنبوب ولا الرطب حواف والقطن المقابس ذلك لا ينبغي أبدا أن تظل وسائل الإعلام والثقافة الغذائية في وضع أفقي.

في بعض الحالات (لزراعة اللاهوائية، وتحديد خصائص بروتين) طعنة تلقيح في المناطق الداخلية من وسط غذائي - أجار أو عمود الجيلاتين، الذي حلقة إبرة البكتيرية أو خاصة لبيرس زرعت مستنبت إلى أسفل. في هذه الحالة ، يمكن أن تبقى الأنبوب رأسا على عقب (الشكل 4). بعد البذر ، يتم حرق حواف أنبوب الاختبار وفي الوقت نفسه يتم إغلاق القابس فوق اللهب. يتم تحميص الإبرة ووضعها في حامل ثلاثي القوائم.

ويمكن أيضا أن يتم زرع المواد السائلة على وسائل الإعلام المغذية مع ماصة باستور (انظر ص. ماصة باستير). في ملقط ماصة معقمة كسر قبالة نهاية مغلقة، ويتم ذلك من 2-3 مرات من خلال لهب، وتترك لتبرد وفقا للقواعد المحددة أعلاه، والحصول على كمية صغيرة من المواد البذور التي أدخلت على أنبوب مع المتوسط ​​الطازجة. في بقية ، فإنها تتصرف بنفس الطريقة كما تفعل عند زرع حلقة. يتم وضع ماصة تستخدم في وعاء مع محلول مطهر.

يجب تدوين أنابيب الاختبار بالوسط الذي زرعت فيه البذور على الفور. في النقش تشير إلى تاريخ البذر وطبيعة البذرة. يتم وضع أنابيب الاختبار المصنفة والمعلمة في ترموستات لزراعة البكتيريا.

عزل الثقافات النقية. في الظروف الطبيعية ، لا يتم عزل البكتيريا في الغالبية العظمى من الحالات ، ولكن في شكل خلطات جرثومية. لذلك ، عند فحص كائن ، من الضروري النظر في إمكانية وجود عدة أنواع من الميكروبات. ومع ذلك ، لأغراض البحث والعملية ، فمن الضروري العمل مع نظيفة ثقافة بكتيرية  (انظر) ، أي مع مجموعة تحتوي على بكتيريا من نفس النوع. يمكن تقسيم جميع طرق عزل الثقافات البحتة من الخلطات الميكروبية إلى مجموعتين رئيسيتين: 1) الطرق القائمة على المبدأ الميكانيكي للفصل الميكروبي. 2) البيولوجية. طرق المجموعة الأولى بدورها في التقسيم الفرعي: أ) الطرق القائمة على فصل الخليط إلى خلايا بكتيرية منفصلة على سطح الوسط المغذي ، و ب) طرق عزل الخلايا البكتيرية الفردية في المايكروبلمول تحت سيطرة العين. يمكن تحقيق عزل الثقافة النقية على الوسائط الغذائية الصلبة عن طريق غربلة مادة الاختبار على السطح أو في سماكة الوسط. غالبا ما تستخدم الطريقة الأولى. في كلتا الحالتين ، يتم تحقيق هذا التخفيف من المواد ، بحيث عندما يتم تنقيتها لاحقا على سطح وسط المغذيات الكثيفة البكتيريا الفردية  كانت بعيدة كل البعد عن بعضها البعض في المناطق المعزولة حيث تتكاثر. في هذه الحالة ، يتم تشكيل مستعمرات بكتيرية معزولة عند إعادة الدخول إليها يتم الحصول على ثقافة نقية.

طريقة غربلة فوق سطح وسط كثيف. خذ ثلاثة أطباق بتري (انظر الشكل. كأس بتري) مع متوسطة المغذيات الكثيفة العقيمة. يتم تطبيق قطرة من مادة الاختبار مع حلقة أو ماصة باستير على وسط المغذيات في الطبق الأول ، ومن ثم يتم نشر ملعقة من الزجاج أو البلاتين بعناية على السطح بأكمله (الشكل 5). دون حرق الملوق ، يتم نقل المواد المتبقية عليه على التوالي إلى الكؤوس الثانية والثالثة وتنتشر على سطح وسط المغذيات. يمكنك أيضًا غربال المادة بحلقة. عند تطبيق المادة لا ينصح بإزالة غطاء الكوب بالكامل ، ولكن افتحه قليلاً. بعد الغربلة ، يتم قلب الصفائح مقلوبة وتوضع في ترموستات.

إن طريقة النخل في عمق الوسط لها قيمة محدودة أكثر من السابقة ، ويتم استخدامها فقط إذا كان من الضروري حساب عدد البكتيريا في حجم كبير نسبيا من مادة الاختبار (الماء ، القيح ، الخ). باستخدام هذه الطريقة ، يتم استخدام الجيلاتين والأجار فقط. في حمام مائي في ثلاثة أنابيب ، يتم إذابة الوسيط ثم تبريده إلى ° 45 درجة. في أنبوب الاختبار الأول ، يتم إدخال حجم معين من مادة الاختبار ؛ مع التحريك بعناية في أجار السائل ، يتم نقل نفس الحجم من الأنبوب الأول إلى الثانية ، ومنه نفس الحجم إلى الثلث ، في كل مرة تحريك محتويات الأنبوب بعناية. ثم يتم سكب محتويات كل أنبوب في طبق بتري (الشكل 6). عندما يتجمد آغار الكؤوس ، يتم قلبها رأسًا على عقب ، وتنقش وتوضع في ترموستات.

في كلتا الطريقتين الموصوفتين ، في الكأس الأول ، حيث تم زرع المادة المركزة ، يمكن للخلايا البكتيرية أن تكون قريبة من بعضها البعض ، والتي في الزراعة اللاحقة ، سوف تندمج المستعمرات الفردية وتعطي نموًا مليئًا بالملل. في الأكواب الثانية والثالثة ، التي يكون فيها عدد البكتيريا أقل بكثير ، يتم تكوين مستعمرات منفصلة (الشكل 7). إذا افترضنا أن تركيز البكتيريا في مادة البدء كبير جدا بحيث أنه في الطبقتين الثانية والثالثة سيتكون نمو غازي ، عندئذ يجب تخفيف مادة الاختبار الأولية بالمحلول الملحي أو وسيط مغذ سائل قبل الزراعة. بعد إقامة أطباق الثقافة في الترموستات لفترة معينة ، اعتمادا على نوع البكتيريا ، الشروع في عزل الثقافة النقية. في هذه الحالة ، انتقل من افتراض أن كل مستعمرة معزولة هي ذرية خلية بكتيرية واحدة سقطت على جزء منفصل من وسط المغذيات. يتم تخصيص الثقافة النقية من المستعمرة في دراستها وزرعها على وسط غذائي جديد.

تعتمد الطرق البيولوجية لعزل الثقافات النقية على مراعاة الخصائص المحددة للميكروبات التي تفصلها ، وتميزها عن غيرها التي توجد معها في المادة قيد البحث. كمثال على استخدام الخصائص البيولوجية للبكتيريا لعزل الثقافات النقية ، يمكن الإشارة إلى ما يلي.

1. عزل ثقافة نقية من البكتيريا المتنقلة من خلال طريقة Shukevich. يتم تحصين مادة الاختبار التي يتم إفراز الميكروب المحمول منها في ماء التكثيف الموجود في الأجار المائل. يجب التأكد من أن الحلقة مع المادة لا تلمس سطح الأجار فوق ماء التكثيف. البكتيريا التي لديها القدرة على الحركة ، تنمو ليس فقط في مياه التكثيف ، ولكن أيضا خارجها على سطح الأجار. من قمة النمو ، تزرع وسيلة تغذية جديدة في مياه التكثيف. من خلال القيام بهذا العديد من المعابر ، في النهاية تلقي ثقافة نقية من البكتيريا المتنقلة.

2. عزل ثقافة نقية باستخدام حساسية مختلفة من البكتيريا إلى درجات حرارة عالية ومنخفضة. بعض البكتيريا تشكل جراثيم مقاومة لدرجات الحرارة العالية (80-100 درجة) ؛ يمكن استخدام هذا لعزل الثقافة النقية للبكتيريا المكونة للبوغ ، والتي يتم مزجها ببكتيريا لا تشكل بوغ. للقيام بذلك ، يتم تسخين مادة الاختبار لمدة 10 دقائق عند درجة حرارة t ° 80 أو 2-3 دقائق عند درجة t ° 100 ، ثم يتم وضع البذور على صفائح أجار. بعد الحضانة في ترموستات ، تتشكل مستعمرات بكتريا تكوين بوغ على الألواح.

3. لتسهيل عزل الثقافات البحتة لبعض أنواع البكتيريا ، يمكن للمرء أن يستفيد من حقيقة أنه ينمو في درجات حرارة مختلفة. على سبيل المثال ، لعزل E. coli من الماء ، تتم الزراعة عند درجة t ° 45 ° ؛ عند درجة الحرارة هذه ، تتضاعف الميكروبات المصاحبة ببطء شديد.

يتم تنفيذ عزل ميكروب الطاعارة من المواد الملوثة من خلال النمو عند درجة 20 ° ر و 5 درجات. في الحالة الأخيرة ، يتأخر النمو ، ولكن بدرجة أقل بكثير من البكتيريا المصاحبة.

4. عزلة ثقافات نقية على أساس بيول مختلفة ، خصائص البكتيريا ، تتم على نطاق واسع على ما يسمى بالوسائل المغذية الانتقائية (الاختيارية) (cf. بيئات التشخيص التفريقي).

5. لعزل الثقافات البحتة لبكتيريا معينة (المكورات الرئوية ، عصيات التولاريا ، العصيدة الخبيثة ، الخ) ، يمكن للمرء أن يستخدم طريقة إصابة حيوان حساس للعدوى. على سبيل المثال ، لعزل المكورات الرئوية من البلغم ، يتم إصابة فأر أبيض حساس جدا لهذا الميكروب ومقاوم للبكتيريا الأخرى في البلغم. تتكاثر المكورات الرئوية بسرعة في الفأر ، وتقتل الميكروبات الأخرى. 18-20 ساعة بعد العدوى ، يتم انسداد الفأرة والدم المتخذ من القلب يزرع على وسط المغذيات. بما أن الدم يحتوي على المكورات الرئوية فقط ، على وسط غذائي تنمو ثقافة نقية.

زراعة البكتيريا. وتنقسم جميع البكتيريا في ما يتعلق بدرجات الحرارة إلى 3 مجموعات رئيسية: psychrophilic ، mesophilic و thermophilic.

عادة ما تتضمن مجموعة psychrophilic الكائنات الحية الدقيقة المعزولة من مياه الينابيع الباردة والبحيرات والبحار والمحيطات. درجة الحرارة المثلى بالنسبة لهم هي 20 درجة ، وبالنسبة للبعض ، حتى 5 درجات. درجة الحرارة المثلى من البكتيريا mesophilic ، التي تنتمي إليها معظم البكتيريا المسببة للأمراض ، تقع في 34-37 درجة. وأخيرًا ، فإن النمو الأمثل للبكتيريا المحبة للحرارة أعلى من المستوى الأمثل لمثيلاتها. ينمو بعض ممثلي هذه المجموعة في درجات حرارة عالية ، تصل إلى 65-70 درجة.

لإنشاء ظروف درجة الحرارة المثلى ، يتم استخدام أجهزة خاصة - منظمات الحرارة (انظر الشكل. ترموستات) ، التي تزرع فيها البكتيريا. في ظروف المختبرات الكبيرة استخدام غرف ترموستاتي مجهزة. تعتمد مدة الزراعة على نوع البكتيريا. تزرع معظم البكتيريا في درجات حرارة مثالية لمدة 24 ساعة. بعض الأنواع احتضان أطول بكثير: العامل المسبب لمرض السعال الديكي لمدة 2-4 أيام ، وعصيات السل درنة حتى 2-3 أسابيع. يتم تحديد مدة حضانة ميكروب معين من قبل ديناميات نمو وتكاثر هذه البكتيريا ويعتمد على نوعية وسط المغذيات.

زراعة عميقة للبكتيريا - تهوئة  في علم الأحياء الدقيقة. زراعة اللاهوائيات - اللاهوائية.

العنصر التالي من الأساليب البكتريولوجية هو تحديد الميكروبات التي تزرع في الترموستات (انظر الشكل. تحديد الميكروبات).

يجب أن نلاحظ البيانات التي تم الحصول عليها من دراسة الكائنات الدقيقة في مجلة. يمكن فقط مقارنة جميع علامات البكتيريا التي كشفت في دراسة مورفولوجي ، البيوكيميائية ، المصلية ، وحيث الضرورة والخصائص الحيوية ، بمثابة أساس لتحديد الهوية. يتم تقييم الانحرافات المرصودة عن خاصية نموذجية فيما يتعلق بأهمية الخصائص غير النمطية لتحديد هذا الميكروب. كما تتيح السجلات المفصلة مقارنة الميكروبات المعزولة في ظروف متجانسة أو في نفس المريض. وأخيراً ، يمكن إخضاع المواد التي تم جمعها في الدراسات الحالية للمختبر العملي للمعالجة العلمية والتعميم إذا تم تسجيلها بعناية. ينبغي أن تحتوي مجلة تسجيل الأخشاب على رسوم بيانية لتسجيل أصل المادة قيد الدراسة ، وشروط جمعها ، ومخطط موجز للمظهر ، ونتائج البذار الأولي ، ودراسة مورفولوجية الجراثيم المعزولة ، و النشاط الأنزيمينتائج البحوث المصلية وأخيرًا للإشارة إلى مصير الثقافة (تم تدميرها وغادرها للدراسة ونقلها). يجب عليك أيضًا إدخال عمود لاستجابة البحث.

مريلة.:  Meinell D. and Meinell E. Experimental microbiology، trans. مع اللغة الإنجليزية. ، M. ، 1967 ، bibliograf. دليل التشخيص الميكروبيولوجي للأمراض المعدية ، أد. KI Matveeva، Moscow، 1973؛ Sakharov، PP، Metelkin، AI and Gudkova، EI، Laboratory Animals، Moscow، 1952؛ دليل الأساليب الميكروبيولوجية والفيروسية للبحث ، أد. M.O. Birger، M.، 1973؛ Timakov VD and Goldfarb DM Fundamentals of Experimental Medical Bacteriology، Moscow، 1958؛ Florinsky AV تقنيات جديدة البحوث المختبرية، م ، 1954 ؛ البكتيريا ، أد. بواسطة I. C. Gunsalus a. ر. Sta-nier، v. 1 -5، N.Y.- L.، 1960-1964؛ طرق التعرف على علم الأحياء المجهرية ، أد. بواسطة V. M. Gibbs a. F. A. Skinner، v. i_2، L.- N. Y.، 1966-1968؛ طرق المختبر في علم الأحياء المجهرية ، أد. بواسطة W. F. Harrigan a. M. E. Me Cance، L.- N. Y.، 1966، bibliogr.

التشخيص البكتريولوجي.

1. تناول المواد. طبيعة المواد تعتمد على الميكروب المسبب للمرض توطين الابتدائي أو الثانوي. إذا تم استخدام المادة للبراز ، والذي يحدث عادة ، يتم أخذها قبل أو بعد استراحة لمدة 24 ساعة في العلاج بالمضادات الحيوية. مادة اتخاذ أفضل أنبوب المستقيم، ومسحة مع ورقة العقيمة أو العقيمة حفاضات الرق، جهاز خاص لأخذ عينات البراز (على أي حال، وتجنب الاتصال مع مطهر). إذا كانت المادة في الدم، ثم تأخذ 10.0 مل من الدم من الوريد من الكوع.

2. يتم نقل المواد عامل طبي  في نظام "الزجاج والمعادن" لمدة لا تزيد عن ثلاث ساعات بعد سياجها أو في مادة حافظة مع الوثائق المصاحبة.

3. يمكن تقسيم وسائل الإعلام المغذية المستخدمة للبحث البكتريولوجي إلى ثلاث مجموعات:

A. إثراء خلق بيئة الظروف الملائمة لتكاثر تفضيلية تطورت الممرض وتقوم إما على مبدأ توافر في بيئة تفعيل عامل نمو الميكروب، أو على مبدأ قمع نمو المرافق مضادات الميكروبية. المجموعة الأولى تقابل وسيط Rapoport ، المجموعة الثانية تتوافق مع selenite و magnesium و Muller و penicillin ، وما إلى ذلك ؛

باء - وسائط التشخيص التفريقي - وسائط مغذية كثيفة تحتوي على اختلاف في الكربوهيدرات - اللاكتوز والمؤشر. العصي المعويةمتحللة اللاكتوز (اللاكتوز)، وتنمو كما المستعمرات الملونة، اعتمادا على نوع البيئة - في قرمزي أحمر وردي (إندو المتوسطة Ploskireva) أو الأزرق الداكن (ليفين الأربعاء) لون. الالتهاب الرئوي Klebsiella تتحلل اللاكتوز في وسط مع مؤشر بروموثيمول الأزرق ومستعمرات الشكل أصفر، بينما مستعمرات من اللاجونات البيكولوجية سلبية اللاكتوز تشكل مستعمرات ذات لون متوسط. السالمونيلا والشيجلا على Endomo ، ليفينا ، Ploskireva أيضا لا تتحلل اللاكتوز وأعطاء مستعمرات عديمة اللون.

جيم بيئات تراكم الثقافة النقية. في كثير من الأحيان استخدام بيئة Olkenitsky (أجار ثلاثة السكر). ويتكون من عمود ، جزء مشطوف ويتضمن اللاكتوز والجلوكوز والسكروز ، وهو مؤشر وكواشف لتحديد كبريتيد الهيدروجين و urease. يتم البذر بواسطة وخز في عمود وجلطة على سطح الجزء المشطوف. مع نمو الميكروبات ، يذوب الجلوكوز بشكل أفضل في العمود ، اللاكتوز - على الشطبة ، ونتيجة لذلك يتغير لون الوسط بطرق مختلفة. في تكوين غاز - فقاعات والثغرات التي تشكلت في البيئة على إنتاج كبريتيد الهيدروجين - لوحظ في اسوداد خلال الحقن، مع إنتاج اليورياز - التغيرات البيئية اللون إلى اللون البرتقالي.

4. تحديد الثقافات المعزولة يستند إلى التعريف:

عام لعائلة سمة - غرام - العصي؛

of وجود كبسولات (ل Klebsiella) ؛

Ш ألوان المستعمرات على وسائط الطبق ؛

التنقل (السالمونيلا والإيشيريشيا متحركة ، والشيغيلة ، والكليبسيلا غير المنقولة) ؛

Ш الخصائص البيوكيميائية.

Ш هيكل مستضد ؛

Ш الحساسية للأدوية المضادة للبكتيريا.

Ш الحساسية لالبكتيريا.

5. يتم تحديد بنية مستضد من قبل المؤسسة الأولية للمجموعة المصلية ، في كثير من الأحيان مع الأمعاء الممتزة monoreceptor ، ثم serovar أيضا مع الأمصال كثف.

6. التشخيص السيرولوجي: يبدأ باستلام الأمصال من المرضى. يكتشفون الأجسام المضادة في تفاعل التراص ، التراص الدموي ، تراص اللاتكس أو RSK. ويستند التشخيص على الكشف عن الأجسام المضادة في عيار تشخيصي أو نمو عيار الأجسام المضادة في ديناميات المرض. (5)

وفقا للكاتب (6) ، من بين الالتهابات المعوية الحادة ، أصبحت الأمراض التي تسببها العوامل الممرضة ، التي تم تأسيسها في التسبب في الإصابة بـ OCI في البشر مؤخرًا في الآونة الأخيرة ، ذات أهمية متزايدة. من بينها ، هو مكان هام هو داء عتامة الكامبيلة بسبب انتشاره على نطاق واسع ، وميل مستمر نحو زيادة في حدوثه وأضرار اجتماعية واقتصادية كبيرة تسبب لهم. وفقا لمنظمة الصحة العالمية ، في العديد من البلدان الأجنبية ، يعتبر داء الكاربيلوباكتيريا أكثر الأشكال المرضية شيوعًا في تركيبة الالتهابات المعوية الحادة ، ويعتمد على 3 إلى 73٪ من جميع الالتهابات المعوية الحادة اعتمادًا على المنطقة. بمبادرة من منظمة الصحة العالمية ، أدرجت دراسة عرقلة المخيمات في البرامج الوطنية لمكافحة أمراض الإسهال في حوالي 100 بلد حول العالم. يبلغ متوسط ​​معدل انتشار داء الكاربيلوبكتيريا في الدول الغربية التي تمتلك نظم رصد بيولوجي خاص بها 50-100 لكل 100.000 من السكان. في البلدان التي لا يتوفر فيها الرصد المستهدف ، تكون إحصائيات الإصابة مختلفة عدة مرات عن الصورة الفعلية.

يتم توزيع كامبيلوباكتر على نطاق واسع في البيئة ، بين الحيوانات والطيور. وهي جزء من كل من الخلايا الدقيقة المتناهية الصغر والأصلية. بين campylobacter كممثل الميكروفلورا الطبيعية، والمسببة للأمراض للحيوانات والأنواع البشرية التي تسبب أمراض في مجال التناسل وأمراض الإسهال.

كامبيلوباكسيريس هو مشكلة خطيرة للخدمة البيطرية ، لأن هذا المرض يسبب ضررا اقتصاديا كبيرا للماشية. في الوقت الحاضر ، يستخدم التطعيم للوقاية منه في المناطق المحرومة. بدأت دراسة campylobacteriosis في الاتحاد الروسي مع تأخير كبير ، والذي يرتبط بعدد من الأسباب: أولا وقبل كل شيء مع الصعوبات والتكلفة العالية التشخيص المختبريالمرتبطة خصوصيات زراعة Campylobacter ، وكذلك مع مجموعة متنوعة من المظاهر السريرية  الأمراض وتنوع مسارات وعوامل انتقال مسببات الأمراض.

في الوقت الحالي ، لا يُشخّص عقار "كاميلوباكتيريوسيس" الذي ينتشر في جميع أنحاء العالم ويشبه داء السالمونيلات ، في المختبرات العملية في روسيا. لذلك ، في عام 2002 ، في جميع أنحاء روسيا ، تم تسجيل 461 حالة من هذه العدوى ، وكان الرقم لكل 100 ألف من السكان 0.32. للمقارنة خلال نفس الفترة ، كان معدل الإصابة بالسالمونيلا 49،480 و 34.27 على التوالي. وفقا للأدبيات ، قبل يوليو 2002 ، لم يتم تسجيل أي حالات من الكافيلوباكتيريا في منطقة ليبيتسك. ومع ذلك ، كانت هناك شروط مسبقة تشير إلى الحاجة إلى الرصد الميكروبيولوجية للعامل المسبب لهذا العدوى: بثبات مستوى عال  حدوث حاد الالتهابات المعوية، وهناك نسبة كبيرة من OCI مجهول السبب، ومستوى عال من التنمية في الدواجن في المنطقة، وتوافر منتجات الدواجن (الابتدائي نقل عامل عن هذا المرض) لقطاعات مختلفة من السكان.

من خلال إدخال التشخيص الجرثومية الناجمة عن هذا المرض في مختبر مستشفى الأمراض المعدية السريرية لأول مرة في عام 2002، الكشف عن والإبلاغ عن حالات الناجمة عن هذا المرض في المنطقة ليبيتسك.

في الفترة 2002-2005 تم فحص 11607 مريض من الجنسين الذين تتراوح أعمارهم بين 1 شهر إلى 77 سنة، والذين نقلوا الى المستشفى في مستشفى الأمراض المعدية في ليبيتسك مع أعراض الالتهابات المعوية الحادة.

في الدراسات الجارية استخدام سلالات العطيفة معزولة عن المرضى فحص (الجدول 2)، وكذلك سلالات تحكم C.jejuni ATCC 11322 (أقراص إنتاج Microtrol بيكتون ديكنسون، الولايات المتحدة الأمريكية).

كانت المادة المستخدمة في الدراسة البراز الأصلي للمرضى ، أقل في كثير من الأحيان - محتويات المستقيم ، التي اتخذت مع مساعدة من حلقة المستقيم. في حالة استحالة تسليم المواد في الوقت المناسب إلى المختبر ، تم وضعه في وسيط النقل Cary Blair المصنع من قبل مركز سانت بطرسبورغ العلمي والتقني.

باعتبارها وسيلة تستخدم الأولي إنتاج البذر المتوسطة kampilobakagar الداخلي للمركز الدولة العلمية التطبيقية الأحياء الدقيقة Obolensk متحمل للهواء مضيفا الإضافات: الحديد II كبريتات الصوديوم والبيروفات.

من أجل تخصيص الكامبيلوباكتر ، تم استخدام طريقة المرشحات النووية ، والتي لديها عدد من المزايا المهمة بالمقارنة مع البذر على المواد الغذائية الانتقائية. وقد قام المعهد المشترك للأبحاث النووية في دوبنا بإنتاج مرشحات بقطر مسامي يبلغ 0.46 و 0.55 ميكرون. فشل لجعل عوامل انتقائية المتوسطة (المضادات الحيوية) ساهم في تقصير العطيفة العزلة إلى 24 ساعة من الحضانة (54.2٪ من سلالات)، وإمكانية الكشف عن أنواع العطيفة مختلفة. نمو الممرض في الثقافة النقية ، والتي سهلت إلى حد كبير تسجيل نتائج التلقيح.

يتم تحضين المحاصيل عند درجة حرارة وتحت microaerophilic الظروف 42،0S kapnofilnyh في أنظمة خاصة لحضانة Genbox شركة الحيوي Merieux (فرنسا) باستخدام مجموعة توليد الغاز "Kampilogaz" التي تنتجها الشركة الدولية للنيكل سانت - بطرسبورغ، لخلق جو مصطنع المنضب في الأوكسجين والمخصب ثاني أكسيد الكربون. تركيب الغلاف الجوي الاصطناعي ولدت حزمة "Kampilogaz" في حجم الوعاء 2.5-3 س O2 - حوالي 5-7٪، حوالي 8-10٪ من CO2 .. كانت مدة الحضانة 48 ساعة مع المشاهدة الإلزامية للمحاصيل بعد 24 ساعة.

تحديد الابتدائي اختبار المستعمرات المشبوهة لkampilobakterioznye باستخدام عدة تراص اللاتكس Sampylobacter طقم اختبار شركة OXOID (UK). وتستند هذه التقنية على تفاعل السطح اختبار جزيئات اللاتكس توعية مع الأجسام المضادة أرنب kampilobakterioznymi على السطح مستضدات الخلايا المحددة يشتبه kampilobakterioznye.

لتحديد الأنواع العطيفة باستخدام أنظمة التشخيص الحديثة (شرائط) المعهد مصطنع شركة الحيوي Merieux (فرنسا)، والسماح لمرة واحدة وعقد مجموعة من الأنزيمية واستيعاب التجارب والاختبارات للحساسية للمضادات الحيوية.

تم تسجيل النتائج وتفسيرها بصريا بعد فترة حضانة لمدة 24 ساعة عند 35-37 درجة مئوية ، ومقارنتها بجدول التعريف.

لا توجد في روسيا ولا في الخارج حتى الآن وثيقة تنظيمية تنظم بوضوح عملية تحديد وتسجيل نتائج حساسية العطيفة المخدرة للأدوية المضادة للميكروبات. الجمعية الفرنسية لعلم الأحياء الدقيقة (SFM) والجمعية البريطانية للعلاج مضادات الميكروبات (BSAC) تقديم توصيات مؤقتة فقط، مشيرا إلى تعقيد العلاقة بين MIC وقطر منطقة تثبيط النمو، وNCCLS أيضا لا يعطي توصيات بالضبط.

1. العدوى Kampilobacteriosis تحتل واحدة من الأماكن الرائدة في هيكل OCI في منطقة ليبيتسك. وكان معدل الحدوث لكل 100 ألف من السكان 1.46 في عام 2002 و 3.34 في عام 2003. ويلاحظ الحد الأقصى لمعدلات الإصابة في الأطفال في السنة الأولى من العمر - 147.6 لكل 100 ألف من السكان والأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 1-2 سنوات - 43.05 لكل 100 ألف من السكان. هناك تشابه في توزيع هذا علم تصنيف الأمراض مع مناطق أخرى من الاتحاد الروسي.

2. العطيفة سلالات معزولة في ليبيتسك لديهم مستوى عال من الحساسية لمعظم المضادات الحيوية اختبارها إلا السيفالوسبورين 1ST جيل (سيفالكسين، سيفازولين).

3. التطبيق المشترك لتفاعل تكتل التفاعل كطريقة للتعبير عن طريقة الإشارات والثقافة البكتريولوجية لـ Campylobacter يزيد بشكل كبير من فعالية التشخيص الميكروبيولوجي لـ Campylobacteriosis. (6)

وفقا للبحوث التي أجرتها مجموعة من المؤلفين (4،5) وجدت أن مستوى حدوث OCI حتى يومنا هذا لا يزال مرتفعا جدا وليس لديه ميل إلى الانخفاض! ومع ذلك، عندما قام عدد من أخي (العصبوي فليكسنر 2A ehsherihioza 0157، klostridioz) من شدة المرض وعدد من المضاعفات تزداد في السنوات الأخيرة، وغالبا ما يزيد من سوء أحوال الطقس. لسوء الحظ ، تأخر تشخيص OCI في كثير من الحالات ، وعدد الأخطاء التشخيصية ، وفقًا لعيادتنا ، خلال العشرين عامًا الماضية هو 12.2-14.7٪ وما زال مستقرًا.

السبب الرئيسي لأخطاء التشخيص هو رغبة الأطباء في إجراء عمليات تشخيص الأمراض ، استناداً إلى التفسير المسبب للأمراض. ومع ذلك ، يجب الأخذ في الاعتبار أن المستوى الحالي للدراسات البكتريولوجية والفيروسية والمصلية ليس مشجعاً.

وفقا للبيانات الرسمية ، في المختبرات المؤهلة من المستشفيات الأمراض المعدية والتخصيص المزدوج للزراعة الواحدة البكتيريا الانتهازية من براز المرضى لأول مرة 3 أيام من المرض ممكن في المتوسط ​​في 50 ٪ ، واحد - في 30 ٪ من الحالات.

في الدراسات المصلية ، يجب أن يؤخذ في الاعتبار أن نمو عيار الأجسام المضادة في مصل دم المريض لا يعتمد فقط على نوع الممرض ، بل على تفاعل الكائن الحي ، وغالبا ما يكون ضئيلا أو لا.

في نفس الوقت ، يكون التشخيص المبكر لـ OCI ضروريًا في سرير المريض ، باستثناء الأمراض الجراحية والعلاجية وغيرها من الأمراض الجسدية التي لها أعراض مشابهة. في نفس الوقت ، التفسير المسبب للمرض من OCI ليس ضروريًا ، لأن العلاج المضاد للجراثيم (مضاد للجراثيم) مع عدد هائل من هذه الأمراض (باستثناء داء الشيغيلات) لا يتم إجراؤه أو أنه ذو طبيعة مساعدة.

يتم تحديد التفسير المسبب للمرض بشكل رئيسي من خلال الحاجة إلى تدابير مضادة للوباء ويتم تنفيذها في ثلاث حالات:

Ш مع الاشتباه في الكوليرا.

Ш خلال انفجارات المجموعة من ОКИ ؛

Ш مع عدوى المستشفيات.

في هذه الحالات ، من الضروري إجراء دراسات وبائية وبكولوجية ومصلية متعمقة. لسوء الحظ ، من أجل التشخيص المستعجل لأبحاث أوراسكوم إنسيبرال (OCI) ، فإن القليل من الأبحاث المفيدة (التنظير السيني ، تنظير القولون ، التنظير الإشعاعي) هي معلومات زهيدة.

يجب أن يكون التشخيص المبكر للوسواس القهرية متلازماً من أجل تحديد أعراض التسمم ومتلازمات الجفاف. فقط يمكن توفير ذلك فقط: تقليل عدد الأخطاء التشخيصية والقيام في الوقت المناسب وبالكفاية بتنفيذ علاج إمراضي عاجل. على مدى السنوات العشرين الماضية ، لم ينخفض ​​معدل الوفيات في أوراسكوم للإنشاء. هناك عدة أسباب لهذا:

v عدد كبير من الأخطاء التشخيصية (12.2-14.7٪) ؛

v التغيرات في التركيبة الاجتماعية للمرضى (من بين المتوفين 60٪ يعانون من إدمان الكحول المزمن ، أكثر من ثلث الشخص غير محمي اجتماعيًا) ؛

v تغيير في الشيجلا سيروفار المنتشرة (Flexner 2a) ؛

v Pathomorphosis of OCI - زيادة في عدد الحالات مع تلف الأمعاء الغليظة وتطور التهاب الصفاق. في عيادتنا ، الفتك للعدوى السامة التي تنتقل عن طريق الغذاء والسلمونيلا هي 0.1 ٪ ، وبالنسبة للشيجيل - 1.4 ٪.

للحد من الفتك من الالتهابات المعوية الحادة ، فمن الضروري:

v الاستشفاء المبكر في المستشفيات المعدية من المرضى الحاد والمعتدل ، وكذلك الأشخاص غير المستقرون اجتماعياً مع أي شدة للمرض ؛

v العلاج المناسب للإماهة ؛

v العلاج عقلاني عقلاني من داء الشيغيلات مع استخدام السيفالوسبورينات الجيل الثاني والثالث والفلوروكينولونات ، وخاصة في مرض شديد.

الكشف المبكر عن المضاعفات: الصدمة السمية المعدية (ITSH) ،

v DIC-syndrome ، الفشل الكلوي الحاد (ARF) ، والالتهاب الرئوي ، وما إلى ذلك ؛

v تحديد ومعالجة مناسبة للأمراض المصاحبة ؛

يحدث الخامس في المرضى الذين يعانون من ظروف ملحة (ITSH، مدينة دبي للإنترنت، ومتلازمة الضائقة التنفسية، التهاب الدماغ، OPN، الدورة الدموية غير مستقرة) نقل في الوقت المناسب من المرضى في وحدة العناية المركزة.

وبالتالي ، فإن OCI عبارة عن مجموعة كبيرة من الأمراض متعددة الأضداد التي تحدث مع متلازمات الإصابة الجهاز الهضميوالتسمم والجفاف بدرجات متفاوتة من الشدة.

يجب أن يكون تشخيص OCI متلازماً وليس مسببًا للمرض (باستثناء الكوليرا وداء الشيجلات).

تفسر الأخطاء التشخيصية في OCI إلى حد كبير من خلال عمومية الأعراض السريرية مع العديد من الأمراض الجسدية (التهاب الزائدة الدودية الحاد ، انسداد الأمعاء ، احتشاء عضلة القلب ، الحمل خارج الرحم ، اللا تعويضية داء السكري  وغيرها).

أساس العلاج الوسواس القهري هو علاج إعادة التميؤ باستخدام المحاليل البلورية المتضاعفة ، التي تتم عن طريق الفم أو الوريد. يجب أن يتم علاج أشكال معقدة من OCI (ITSH ، متلازمة DVS ، ARDS ، OPNi ، الخ) في كثير من الحالات في ظروف أقسام الإنعاش. (7.8)

عدوى معوية