كيف نحسب الكريات البيض. قم بتنزيل كتاب "الدراسات المخبرية السريرية" (2.84Mb)

يعد عد كريات الدم البيضاء في حجرة غورياف واحدة من طرق تحديد مقدارها في دم المريض. يعتمد عدد الكريات البيض على العديد من العوامل ، والتي تشمل معدل التكوين ، إفراز نخاع العظم ، التدمير. جميع هذه العمليات تتأثر بشكل مباشر بالعوامل الفسيولوجية. لذلك ، يمكن إجراء تغيير مستمر في عدد الكريات البيض في الشخص السليم. وهذا واضح بشكل خاص إذا قارنا نتائج تحليلات الصباح والمساء.

طريقة عد الكريات البيض في الغرفة Goryaev

تتكون طريقة الاختبار هذه من الخطوات التالية:

1. يمتلئ الأنبوب بحمض الأسيتيك مع صبغة ثيازيني من أجل 0.4 مل. باستخدام ماصة الشعرية ، واتخاذ 20 ميكرولتر من الدم الطازج وضربه في نفس الأنبوب. يتم خلط الخليط الناتج تمامًا.
2. يتم مسح لوحة زجاجية رقيقة في الغرفة بعناية ، وبعد ذلك يتم تشكيل البقع قزحي الألوان.
3. بعد ذلك ، خذي قطرة من المحلول الناتج من الدم مع حمض الأسيتيك وأحضره إلى حافة اللوحة.
4. عندما تكون الغرفة ممتلئة ، لا يتم إزعاجها لمدة دقيقة ، بحيث تبدأ خلايا الدم البيضاء في الاستقرار.
5. مع زيادة طفيفة في عدد الكريات البيض.

للحصول على نتائج صحيحة ، استخدم صيغة خاصة لحساب عدد الكريات البيض في 1 ميكرولتر من الدم. المعيار هو 4 إلى 9 لمدة 10 لترات.

إذا تم الحصول على نتيجة تتجاوز هذه العلامة ، يتم تشخيص المريض مع زيادة عدد الكريات البيضاء. إذا كان هناك انخفاض - نقص الكريات البيض. لكن هذا من الناحية النظرية ، في الواقع ، تحتاج إلى النظر إلى مؤشرات أخرى لتحديد المرض.

تستخدم ثلاث صيغ لحساب الكريات البيض:

• ل 64 الساحات الفارغة

N = m x 4000 x 20 / (64 x 16) = m x 78.13 ≈ m x 78

• ل 169 الساحات الفارغة

N = m x 4000 x 20 / (169 x 16) ≈ m x 29.6

• ل 100 مربعات فارغة

N = m x 4000 x 20 / (100 x 16) ≈ m x 50.

كاميرا Goryaev هي عبارة عن جهاز يمكنه حساب عدد خلايا الدم البيضاء بدقة عالية ، بالإضافة إلى جسيمات أخرى مشابهة. تشتمل على زجاج سميك خاص مع غرفة مستطيلة الشكل. هناك شبكة ميكروسكوبية وزجاج بصري رقيق.

تم تطوير هذا الجهاز من قبل الأستاذ الشهير نيكولاي Konstantinovich Goryaev ، الذي عمل في جامعة قازان. أعطت شبكته الخاصة النتائج الأكثر دقة من كاميرات العلماء المشهورين الآخرين.

أما بالنسبة إلى صيانة الكاميرا ، فهناك أيضًا بعض الفروق الدقيقة. في فترات الراحة من العمل ، يجب أن تكون كاميرا Goryaev في منطقة جافة. عند اكتمال العمل ، يجب معالجته. لهذا الغرض ، يتم غمر الجهاز في الكحول الإيثيلي (70 ٪) لمدة نصف ساعة. خيار آخر للتنظيف هو حل الفورمالين (4 ٪) لمدة ساعة واحدة. المرحلة النهائية هي تنظيف غرفة غايايف بماء مقطر ومسحها بقطعة قماش ناعمة.

هناك حالات عندما تكون في معدلات منخفضة في جسم المريض كل شيء في النظام. هذا يشير إلى أن الجسم الرئيسي ل leukocytes هو في الأنسجة. في مثل هؤلاء الناس ، يكون الاستعداد لأمراض مختلفة منخفضًا جدًا ، لذا نادراً ما يمرضون. هذا هو الوراثة بشكل رئيسي.

نقص الكريات البيض وكريات الدم البيضاء

لنفترض أن المريض لديه تشخيص الكريات البيض ، ويمكن أيضا أن تستخدم الكاميرا Goryaeva. وهي مقسمة إلى العضوية والوظيفية.

الانحرافات الوظيفية تشمل:

• الأمراض التي تحمل المسببات المرضية الفيروسية أو البكتيرية (الالتهابات المعوية والتهاب الكبد A وغيرها) ؛
• رد فعل لبعض الأدوية ؛
• مع حمولة ثقيلة على العضلات ، والإجهاد ، والنظام الغذائي.
• مع تخزين غير لائق للدم.

لأسباب عضوية ، يمكننا تضمين:

• panmieloftiz.
• سرطان الدم.
• مرض هودجكين
• حمى روماتيزمية
• تشعيع الأيونات
• ندرة المحببات.

كثرة الكريات البيضاء ، يستجيب الجسم عندما يتأثر بالعوامل الداخلية والخارجية. من الناحية العملية ، تتميز الأشكال الفسيولوجية وكذلك الأمراض المرضية.

كاميرات الحساب  - أجهزة عد الدم والبول وعوامل السائل النخاعي ، وكذلك الكائنات الدقيقة. مقترح من K. s. الاب. فيزيولوجي Malasse (L. Ch. Malassez) في عام 1874

مع. تمثل شريحة سميكة مع الاكتئاب ، في أسفلها يتم نقش شبكة العد ؛ يوضع زجاج غطاء محزز على السطح. الارتفاع المستمر لل c. يتم ضمان ذلك عن طريق الاحتكاك الكثيف للزجاج المسطح والزجاج حتى تكوين حلقات نيوتن متقشرة الألوان (عصابات التداخل).

العناصر الهيكلية لجميع أنواع الشبكات هي مربعات كبيرة وصغيرة. شبكات مختلفة الأنواع - توم ، بوركر ، معمدة ، Türk ، نويباور ، Goryaev ، Fuchs - Rosenthal ، الخ - تتميز بمجموعات مختلفة من المربعات الكبيرة والصغيرة.

كميات معروفة - على ارتفاع للغرفة، ومنطقة الشبكة والانقسام، واتخذت للتخفيف من تحليلها الدم - يسمح لحساب كمية من العناصر التي شكلت في فترة معينة (1 ماي) في الدم (أو غيرها من وسائط).

هناك مفتوحة ومغلقة K. مع. في الغرفة المغلقة ، يفرك زجاج الغطاء بعد الملء ، ويمكن لفقاعات الهواء إدخاله. مثل K. مع. (توم زايس مع شبكة من توم ، دونغر مع شبكة خاصة) غير مريح في العمل ولا يتم استخدامها.

تمتلئ الغرف المفتوحة (الشكل 1) بعد أن يفرك الزجاج leadding. لديهم شبكات اثنين على شريحة واحدة. يتم تحديد اللوحات ذات الشبكات المنحوتة بواسطة الأخاديد من بعضها البعض ، وكذلك من بقية الشريحة. وجود الأخاديد يجعل من الممكن تنظيم ملء الغرف. بعض الغرف مجهزة بمشابك معدنية تثبت زجاج الغطاء.

فتح K. مع. وصفها SP ألفيروف لأول مرة في عام 1883 ، ثم في عام 1905 بوركر (ك. بوركير). غرف العد المفتوح المعروفة هي Klyucharev ، Gausser و Levy ، Gelber ، Glaubermann. يتم استخدام غرف العد Goryaev و Fuchs-Rosenthal على نطاق واسع في اتحاد الجمهوريات الاشتراكية السوفياتية. غرفة Goriaev مع شبكة Goryaev (الشكل 2) لديها حجم 0.9 ميكرولتر ، مساحة الشبكة 9 ملم 2. تتكون الشبكة من 225 مربع كبير ؛ منها 100 فارغة ، 25 مقسمة إلى 16 مربعاً صغيراً ، 100 مفصولة بواسطة شرائط.

عد فوكس غرفة - روزنتال مشبك فوكس - (الشكل 3) روزنتال لديها حجم 3.2 L، منطقة شبكة من 16 مم 2، وتتكون من مربعات كبيرة 256 (لا تعتبر الساحات فصل العصابات).

طريقة العمل

قبل العمل ، الشريحة K. ويتم غسل غطاء غطاء الأرض تحت صنبور مياه الصنبور ومسحها جافًا. ثم يتم فرك زجاج الغطاء بشكل مكثف على الغرفة (حتى ظهور حلقات نيوتن متقشرة الألوان ، فقط في ظل هذه الحالة يكون حجم الكربون ثابتًا).

محتويات الأنابيب قبل ملء غرفة أثار مرارا وتكرارا، يتم سحب ثم تنصهر نهاية قضيب الزجاج من أنبوب عن طريق إمالة ذلك، ويتم تطبيق قطرة من الدم على الشريحة بالقرب من حواف ساترة. إذا لم تكن قطرة دم واحدة كافية لملء مجرى الدم بالكامل ، أضف قطرة. إذا تم أخذ الدم إلى الخلاط ، فإن أول قطرات من شعيرات الخلاط يتم تحريرها ، و K. s. ملء مع قطرة من أمبولة الخلاط. تتم إزالة بقايا السائل من الشريحة بمسحة شاش. يبدأ العد في 3 دقائق. بعد ملء الغرفة (وهي الفترة التي لا يوجد هبوط خلايا الدم) تحت المجهر في التكبير المنخفض (عدسة X 8 X العدسة 10 أو X 15)، وحقل مظلم نظر (المحجبات مع الحجاب الحاجز أو مع مكثف خفضت قليلا). الحسابات هي الخلايا التي تقع داخل مربع (الشكل 4). تعتبر الخلايا التي يتم عبورها على جوانب المربعات كما يلي: إذا كان أكثر من نصف الخلية داخل المربع ، فيُعتبر ذلك ، إذا كان في الخارج - لا يُنظر فيه. يتم حساب الخلايا المتقاطعة بالخطوط بالضبط في الوسط على خطين مربعيين ، يمين وعلويين ، ولا تعتمد على الخطين الآخرين. عند استخدام المناسبة توزيع ف خندق كريات الدم الحمراء، كريات الدم البيضاء، الصفائح الدموية، الحمضات، الخلايا القاعدية والخلايا الشبكية يمكن عدها في الكاميرا Goryaev.

تحسب كريات الدم الحمراء في 80 مربعاً صغيراً ، أي في 5 مربعات كبيرة مرتبة قطرياً. يتم الحساب وفقا للصيغة:

X = a * 4000 * 200/80 ،

وحيث - عدد خلايا الدم الحمراء عدها في 80 مربعات صغيرة 80 - عدد معدود من مربعات صغيرة 200 - درجة تخفيف الدم، 4000 - مضاعف لاستقبال خلايا الدم الحمراء في 1 مل من الدم (حجم مربع صغير 1/4000 لتر). عمليًا ، يتم مضاعفة عدد كريات الدم الحمراء الموجودة في 5 مربعات كبيرة بمقدار 10000.

يتم حساب الكريات البيضاء في 1600 مربعات صغيرة (في 100 مربع كبير). يتم الحساب وفقا للصيغة:

X = a * 4000 * 20/1600 ،

وحيث - عدد الكريات البيض عد من الساحات الصغيرة 1600، 1600 - عدد المربعات الصغيرة عد 20 - درجة تخفيف الدم، 4000 - مضاعف للحصول على محتوى الكريات البيض في 1 مل من الدم. تقريبا عدد كريات الدم البيضاء عدها في 1600 مربعات صغيرة تضاعف 50.

تُحسب الصفائح في 400 مربعاً صغيراً (25 مربعاً كبيراً مائياً عبر الشبكة). يمكن أن الكواشف للتخفيف يكون كلوريد الصوديوم متساوي التوتر ، والحلول المختلفة ، والصفيحات التعليب وخلايا الدم الحمراء hemolysing.

يتم عد الصفائح تحت المجهر المعتاد وباستخدام جهاز تباين الطور (انظر الشكل. الفحص المجهري الطوري) لمزيد من الكشف الدقيق عنهم. بعد التخفيف ، يترك أنبوب الاختبار مع الدم لمدة 25-30 دقيقة. لانحلال خلايا الدم الحمراء. ثم ، يتم إعادة خلط محتويات الأنبوب ومليئة بـ K. c ، والتي يتم وضعها لمدة 5 دقائق. في غرفة رطبة (على سبيل المثال ، أطباق بتري مع الصوف الرطب) لترسب الصفائح الدموية. يتم الحساب وفقا للصيغة:

X = a * 4000 * 200/400 ،

وحيث - عدد الصفائح الدموية عد في مربعات صغيرة 400، 200 - درجة تخفيف الدم 400 - عد عدد من المربعات الصغيرة، 4000 - عامل للمحتوى الصفائح الدموية في 1 لتر من الدم. وعمليا ، تضاعف عدد الصفائح الدموية الموجودة في 400 مربع صغير بحلول عام 2000.

يتم حساب عدد الخلايا القاعدية والحمضات في حجرة جوريايف في 1600 مربعاً صغيراً ، بالإضافة إلى الكريات البيض. تضاعف عدد الخلايا القاعدية والحمضات التي يتم حسابها بالفعل بنسبة 50.

تحسب شبكية العين في حجرة جورياف في 80 مربعاً صغيراً ، مثل خلايا الدم الحمراء. يتم ضرب عدد الخلايا الشبكية التي تم عدها بـ 10000.

تحديد العدد الكلي للخلايا في السائل الدماغي الشوكي  (انظر) من الأفضل أن تنتج في غرفة Fuchs-Rosenthal (بسبب العدد الصغير من الكريات البيض في السائل النخاعي). عد على الشبكة بأكملها (256 مربعاً كبيراً) تحت تكبير صغير للمجهر (العدسة X 15 ، العدسة x 8).

مع عدد كبير جدًا من الخلايا ، من الممكن حساب نصف الشبكة (مع مضاعفة لاحقة للنتيجة بمقدار 2). يتم الحساب وفقا للصيغة:

X = a * 11 / 3،2 * 10 ،

حيث a هو عدد الخلايا التي تم عدها في 256 مربع ، و 11/10 هو معدل التخفيف ، و 3.2 هو حجم الغرفة في μl. من الناحية العملية ، عند العد في غرفة Fuchs-Rosenthal ، يتم تقسيم عدد الكريات البيض بواسطة 3.

في خلية Goriayev ، تعتبر خلايا السائل النخاعي 3 مرات على الأقل (أيضًا المنطقة بأكملها) ، كل مرة تملأ الغرفة مرة أخرى ، ثم تأخذ المتوسط ​​الحسابي. يتم الحساب وفقا للصيغة:

X = a * 11 / 0.9 * 10 ،

حيث a هو متوسط ​​عدد الخلايا الحسابية على الشبكة بأكملها ، 11/10 هو معدل التخفيف ، و 0.9 هو حجم الغرفة في μl. عمليا يتم ضرب عدد الكريات البيض التي تم عدها في 1.2.

تحديد كمية العناصر التي تشكلت في البول عقد غرف فوكس - روزنتال Goryaeva: عدد كريات الدم الحمراء وكريات الدم البيضاء في المجهر التكبير الأوسط، عد اسطوانة - مع الصغيرة. درجة تخفيف البول يعتمد على طريقة التحقيق (انظر الشكل. بول).

العد في K. مع. ليس دقيقا جدا. الخطأ في هذه الطريقة هو من 10 إلى 20 ٪ ، اعتمادا على عدد العناصر التي تم عدها.

شروط الرعاية والتخزين

من الضروري حماية الكاميرا من التلوث والغبار على الشبكة. بعد العمل ، يتم غسل الكاميرا وزجاج الغطاء تحت ماء الصنبور الجاري بعناية ، ولكن يتم مسحهما بعناية باستخدام قطعة قماش نظيفة (يمكن أن يكون الشاش). ثم ملفوفة في ورقة ووضع في مربع.

المراجع:  دليل الأساليب المخبرية السريرية للبحوث ، أد. E.A. Cost، p. 22 ، م ، 1975.

DN Ishmukhametov

مل. في أنابيب اختبار قارورة ، ماصة

عند تطبيق 0.02 مل من الدم في 0.4 مل من حمض الخليك يتم الحصول عليها من قبل 20 مرة التخفيف من تلك المطلوبة لعد الكريات البيض.

ولحساب العناصر ذات الشكل ، يتم وضع الدم المخفف في غرفة عد يتم فيها ترتيب الخلايا في طبقة واحدة. معرفة حجم الغرفة وتخفيف الدم ، وحساب عدد عناصر موحدة في 1 لتر من الدم.

جهاز الكاميرا والشبكة Goryaeva. غرفة Goryaev (الشكل 37) هي شريحة سميكة ، تقطعها أربعة أخاديد عرضية. تقسم الأخاديد الزجاج إلى صفائح - اثنان جانب ووسط. اللوحة الوسطى هي 0.1 مم تحت الجانبي. وهي مقسمة بواسطة أخدود عرضي إلى جزئين متساويين. على كل نصف لوحة الأوسط ، يتم تطبيق شبكة Goryaev.

ملحق الكاميرا عبارة عن زجاج غطاء أرضي. يجب أن يتم تطبيقه بحيث يغطي كل من الجوانب الجانبية والوسطى. الضغط على الإبهام على حافة الزجاج، حضنه إلى جانب لوحات حتى حلقات قوس قزح (kol- ^ 1 TSA نيوتن).

بما أن الصفائح الجانبية أعلى من الوسط ، فهناك فجوة بينها وبين زلة الغطاء. هذه هي الكاميرا ، في Shchsh

المليئة بالدم المخفف. عمق الغرفة 0.1 ملم.

وضعت شبكة Goryaev في الجزء السفلي من الغرفة مربع. جانبه 3 ملم ، المساحة 9 مم 2. وتنقسم الشبكة إلى 225 مربعًا كبيرًا - 15 بشكل أفقي و 15 عموديًا. ينقسم جزء من المربعات الكبيرة (من اثنين إلى ثلاثة) إلى 16 مربعاً صغيراً. جانب مربع صغير هو 1/20 ملم (الشكل 38).

تقنية العد. يضمن الملء الصحيح لغرفة العد بالدم المخفف دقة عد العناصر. قبل ملء الغرفة ، يتم تقليب محتويات الأنبوب ، وتناوبه بين راحة اليد لمدة دقيقتين. تم تطبيق الدم المخفف على غرفة لوحة ماصة باستير المتوسطة مع بالون أو قضيب الزجاج، ووضعها بالقرب من حواف ساترة. وفقا لقانون الشعيرة ، يتدفق السائل تحت الزجاج ، وملء الغرفة.

بعد ملء الحجرة يجب وضعها على الطاولة لمدة 2-3 دقائق ، حتى تتوقف حركة السائل في ذلك ، ولا تستقر الخلايا بلا حراك على خلفية مربعات الشبكة. عند ملء الغرفة ، يجب ألا يتدفق السائل إلى الأخاديد. لا تحصل على فقاعات الهواء في الغرفة.

يتم إجراء العد تحت تكبير صغير للمجهر (o.8 ، o.10 أو 15) ، يجب تخفيض المكثف ، وإغلاق الحجاب الحاجز.

يتم إجراء العد من كريات الدم الحمراء في 5 مربعات كبيرة من شبكة Goryaev ، ملفوفة على 16 صغيرة منها وترتيب قطري. الشرط الأخير يرجع إلى حقيقة أن العناصر الموحدة موزعة على الشبكة بشكل غير متساو ويجب أن يتم حسابها على أقسامها المختلفة.

ينتج عد كريات الدم البيضاء في 100 مربع كبير غير متمايز يقع في جميع أنحاء الشبكة في مجموعات من أربعة.

لكي لا نحصي مرتين نفس الخلايا الملقاة على خطوط الحدود ، يجب ملاحظة القواعد التالية: في مربع معين تنتمي الخلايا التي تكون أكبر من نصفها داخله ؛ الخلايا التي يفصل بينها خط الحدود إلى النصف تعتبر فقط على الحدود العلوية واليسرى للمربع ؛ الخلايا التي تكذب أكثر من نصفها خارج ميدان معين لا تعتبر على الإطلاق.

بعد حساب خلايا الدم الحمراء في الحجرة ، وتحديد مقدارها في 1 ميكرولتر من الدم. لذلك تم الحصول عليها عن طريق حساب عدد خلايا الدم الحمراء يتم ضرب 10 000. هذا المعامل التي حصلت عليها العملية الحسابية التالية: 1 شبكة كبيرة مربعة تحتوي على 16 مربع صغير وكبير هو 5-80 صغير (16-5). جانب من مربع صغير

تساوي "/ w mm ، ومساحتها" / و - "/ 20 =" / "o mm2. يبلغ ارتفاع الكاميرا / مم ، وبالتالي يكون حجم الدم فوق المربع الصغير:

1 1 1 400 "L0 4000 مم إذا كان عدد خلايا الدم الحمراء عدها في 5 مربعات كبيرة و 80 صغيرة، A المعينة، وعدد خلايا الدم الحمراء في مربع صغير واحد سوف

يساوي. كما هو مبين ، فإن حجم الدم فوق مربع صغير

وهو يساوي - MM3، وذلك من أجل معرفة عدد خلايا الدم الحمراء في 1 ملم، أي في حجم 4000 مرة أكبر، العدد اللازم من كريات الدم الحمراء الموجودة في مربع واحد صغير ^، ضرب من قبل 4.000 ...

تم تخفيف الدم لعد خلايا الدم الحمراء 200 مرة. لتحديد عدد خلايا الدم الحمراء في الدم الكامل ، يتم ضرب الجزء الناتج بالتخفيف:

يمكن أن يكون هذا التعبير الرياضي قبل 80

وضعت في شكل العوامل:

يتكون العامل الكسري من الكميات الثابتة. إذا حساباتهم هي 10000 والتعبير كله يصبح: -10 و 000. وبذلك يكون عدد خلايا الدم الحمراء في 1 مل من الدم مساو لعدد من خلايا الدم الحمراء عدها في خمسة مربعات شبكة كبيرة Goryaeva مضروبا 10000.

على سبيل المثال: يتم حساب 427 من خلايا الدم الحمراء في 5 مربعات كبيرة من شبكة Goryaev. في 1 مل من الدم سوف يكون مساويا لعدد كريات الدم الحمراء 000 427-10 = 4 270 000، أو 4،27-106.

من أجل تحديد محتوى كريات الدم الحمراء في 1 لتر من الدم، فمن العدد اللازم من كريات الدم الحمراء، وأعرب في الملايين، مضروبا في 10. في مثالنا ، عدد كريات الدم الحمراء في 1 ليتر من الدم هو 4 ،