الطرق البكتريولوجية

التشخيص البكتريولوجي.

1. تناول المواد. تعتمد طبيعة المادة على الموقع الأولي أو الثانوي للممرض الجرثومي. إذا تم استخدام المادة للبراز ، والذي يحدث عادة ، يتم أخذها قبل أو بعد استراحة لمدة 24 ساعة في العلاج بالمضادات الحيوية. مادة اتخاذ أفضل أنبوب المستقيم، ومسحة مع ورقة العقيمة أو العقيمة حفاضات الرق، جهاز خاص لأخذ عينات البراز (على أي حال، وتجنب الاتصال مع مطهر). إذا كانت المادة هي الدم ، خذ 10.0 مل من الدم من الوريد من أضعاف الكوع.

2. نقل المواد هو عامل طبي في "الزجاج والمعادن" لمدة لا تتجاوز ثلاث ساعات بعد سورها أو حافظة مع الوثائق المرفقة.

3. يمكن تقسيم وسائل الإعلام المغذية المستخدمة للبحث البكتريولوجي إلى ثلاث مجموعات:

A. إثراء خلق بيئة الظروف الملائمة لتكاثر تفضيلية تطورت الممرض وتقوم إما على مبدأ توافر في بيئة تفعيل عامل نمو الميكروب، أو على مبدأ قمع نمو المرافق مضادات الميكروبية. المجموعة الأولى يتوافق مع البيئة رابوبورت الثانية - selenitovaya، المغنيسيوم، مولر، البنسلين وغيرها؛.

باء - وسائط التشخيص التفريقي - وسائط مغذية كثيفة تحتوي على كربوهيدرات مختلفة - اللاكتوز والمؤشر. البكتيريا القولونية متحللة اللاكتوز (اللاكتوز)، تنمو المستعمرات الملونة، اعتمادا على نوع البيئة - في قرمزي أحمر وردي (إندو المتوسطة Ploskireva) أو الأزرق الداكن (ليفين الأربعاء) لون. تتحلل الكلبسيلة الالتهاب الرئوي اللاكتوز في المتوسط ​​مع مؤشر bromothymol المستعمرات أصفر أزرق وتشكل، في حين أن المستعمرات شكلت المستعمرات laktozootritsatelnyh biovars اللون المتوسط. السالمونيلا والشيجلا على إندو آجار، ليفين Ploskireva أيضا لا تتحلل اللاكتوز وإنتاج المستعمرات عديم اللون.

جيم بيئات تراكم الثقافة النقية. في كثير من الأحيان استخدام بيئة Olkenitsky (أجار ثلاثة السكر). وهو يتألف من العمود، ويشمل جزء مدبب اللاكتوز والجلوكوز والسكروز، الكواشف مؤشر لتحديد كبريتيد الهيدروجين واليورياز. يتم البذر بواسطة وخز في عمود وجلطة على سطح الجزء المشطوف. مع نمو الميكروبات تتحلل الجلوكوز أفضل في العمود، اللاكتوز - بشكل مائل، مما أدى تفاضلي تغيير لون البيئة. في تكوين غاز - فقاعات والثغرات التي تشكلت في البيئة على إنتاج كبريتيد الهيدروجين - لوحظ في اسوداد خلال الحقن، مع إنتاج اليورياز - التغيرات البيئية اللون إلى اللون البرتقالي.

4. تحديد الثقافات المعزولة يستند إلى التعريف:

عام لعائلة سمة - غرام - العصي؛

of وجود كبسولات (ل Klebsiella) ؛

Ш ألوان المستعمرات على وسائط الطبق ؛

التنقل (السالمونيلا والإيشيريشيا متحركة ، والشيغيلة ، والكليبسيلا غير المنقولة) ؛

Ш الخصائص البيوكيميائية.

Ш هيكل مستضد ؛

Ш الحساسية للأدوية المضادة للبكتيريا.

Ш الحساسية لالبكتيريا.

5. يتم تحديد بنية الأنتيجين من قبل الزمرة المصلية المثبتة مسبقا، وغالبا مع الأمصال كثف monoretseptornymi، تليها ضرب مصلي أيضا مع الأمصال كثف.

6. التشخيص السيرولوجي: يبدأ باستلام الأمصال من المرضى. يكتشفون الأجسام المضادة في تفاعل التراص ، التراص الدموي ، تراص اللاتكس أو RSK. ويستند التشخيص على كشف الأجسام المضادة في زيادة عيار التشخيص في عيار الأضداد أو في ديناميات المرض. (5)

ووفقا للمؤلف (6) أصبحت الآن ذات أهمية متزايدة بين الالتهابات المعوية الحادة المكتسبة الأمراض التي تسببها الجراثيم، التي تؤدي دورا في التسبب في الالتهابات المعوية الحادة في البشر التي أنشئت مؤخرا نسبيا. من بينها أنها تحتل مكانة هامة عن هذا المرض بسبب الانتشار الواسع لها، واستمرار الاتجاه التصاعدي للقسط كبير من المراضة والأضرار الاجتماعية والاقتصادية التي لحقت بهم. ووفقا لمنظمة الصحة العالمية، في العديد من البلدان الأجنبية، عن هذا المرض هو شكل خاص بأسباب الأمراض الأكثر شيوعا في هيكل أوراسكوم للانشاء واعتمادا على المنطقة التي تشكل ما بين 3 و 73٪ من الالتهابات المعوية الحادة. بمبادرة من دراسة منظمة الصحة العالمية الناجمة عن هذا المرض قد أدرج في برنامج مكافحة أمراض الإسهال وطني في حوالي 100 بلدا في جميع أنحاء العالم. متوسط ​​الإصابة عن هذا المرض في البلدان الغربية التي لديها نظم الرصد الحيوي الخاصة بها هي 50 في - 100-100000 الناس .. في البلدان التي لا يتوفر فيها الرصد المستهدف ، تكون إحصائيات الإصابة مختلفة عدة مرات عن الصورة الفعلية.

يتم توزيع كامبيلوباكتر على نطاق واسع في البيئة ، بين الحيوانات والطيور. وهي جزء من كل من الخلايا الدقيقة المتناهية الصغر والأصلية. بين العطيفة هناك كممثلين للميكروبات الطبيعية والمسببة للأمراض للحيوانات والجنس البشري يسبب أمراض المجال التناسلي وأمراض الإسهال.

داء العطائف مشكلة خطيرة على الخدمات البيطرية، وهذا المرض يسبب خسائر اقتصادية كبيرة للماشية. في الوقت الحاضر ، يستخدم التطعيم للوقاية منه في المناطق المحرومة. بدأت الدراسة الناجمة عن هذا المرض في الاتحاد الروسي بعد تأخير طويل، وهو أمر يرتبط مع عدد من الأسباب: أولا، صعوبة وتكلفة عالية من ميزات التشخيص المختبري المرتبطة زراعة العطيفة، ومجموعة متنوعة من المظاهر السريرية للمرض ومجموعة متنوعة من الطرق وعوامل انتقال مسببات الأمراض.

في هذا المرض نقطة kampilobakterioznaya منتشر في جميع أنحاء العالم، ومعدل اكتشاف مقارنة مع السالمونيلا في روسيا في المختبرات العملية تقريبا لا تشخيصها. لذلك، سجلت في عام 2002، 461 في حالة العدوى في جميع أنحاء روسيا، فإن معدل لكل 100 ألف. وكان السكان 0.32. وعلى سبيل المقارنة، خلال الفترة الزمنية نفسها، فإن حالات السالمونيلا 49 480 و 34.27 على التوالي. وفقا للأدب، وحتى يوليو 2002 في الحالات المنطقة عن هذا المرض ليبيتسك المرض تم تسجيلها. ومع ذلك، كان هناك خلفية، مما يدل على الحاجة إلى رصد الميكروبيولوجي من مسببات المرض: استقرار نسبة عالية من الالتهابات المعوية الحادة، ونسبة كبيرة من OCI مجهول السبب، ومستويات عالية من التنمية الدواجن في الميدان، وتوافر منتجات الدواجن (انتقال العامل عن هذا المرض الرئيسي) لمجموعات سكانية مختلفة .

من خلال إدخال التشخيص الجرثومية الناجمة عن هذا المرض في مختبر مستشفى الأمراض المعدية السريرية لأول مرة في عام 2002، الكشف عن والإبلاغ عن حالات الناجمة عن هذا المرض في المنطقة ليبيتسك.

في الفترة 2002-2005 تم فحص 11607 مريض من الجنسين الذين تتراوح أعمارهم بين 1 شهر إلى 77 سنة، والذين نقلوا الى المستشفى في مستشفى الأمراض المعدية في ليبيتسك مع أعراض الالتهابات المعوية الحادة.

في الدراسات الجارية استخدام سلالات العطيفة معزولة عن المرضى فحص (الجدول 2)، وكذلك سلالات تحكم C.jejuni ATCC 11322 (أقراص إنتاج Microtrol بيكتون ديكنسون، الولايات المتحدة الأمريكية).

وكانت مادة للدراسة البراز الأم من المرضى، على الأقل - محتويات المستقيم، مع حلقة المستقيم. في حالة عدم التسليم في الوقت المناسب من المواد للدراسة في المختبر، تم وضعه في وسيلة النقل إنتاج كاري وبلير الشركة NITSF سانت - بطرسبورغ.

باعتبارها وسيلة تستخدم الأولي إنتاج البذر المتوسطة kampilobakagar الداخلي للمركز الدولة العلمية التطبيقية الأحياء الدقيقة Obolensk متحمل للهواء مضيفا الإضافات: الحديد II كبريتات الصوديوم والبيروفات.

لعزل طريقة العطيفة مرشحات النووية المستخدمة وجود عدد من مزايا هامة على الطلاء على وسط غذائي انتقائي. استخدام فلتر مع قطر المسام 0.46 و 0.55 ميكرون إنتاج المعهد المشترك للأبحاث النووية، دوبنا. فشل لجعل عوامل انتقائية المتوسطة (المضادات الحيوية) ساهم في تقصير العطيفة العزلة إلى 24 ساعة من الحضانة (54.2٪ من سلالات)، وإمكانية الكشف عن أنواع العطيفة مختلفة. نمو الممرض في ثقافة نقية، الذي يبسط إلى حد كبير النتائج ثقافة المحاسبة.

يتم تحضين المحاصيل عند درجة حرارة وتحت microaerophilic الظروف 42،0S kapnofilnyh في أنظمة خاصة لحضانة Genbox شركة الحيوي Merieux (فرنسا) باستخدام مجموعة توليد الغاز "Kampilogaz" التي تنتجها الشركة الدولية للنيكل سانت - بطرسبورغ، لخلق جو مصطنع المنضب في الأوكسجين والمخصب ثاني أكسيد الكربون. تركيب الغلاف الجوي الاصطناعي ولدت حزمة "Kampilogaz" في حجم الوعاء 2.5-3 س O2 - حوالي 5-7٪، حوالي 8-10٪ من CO2 .. وكانت مدة الحضانة 48 ساعة، مع المحاصيل عرض اختياري بعد 24 ساعة.

تحديد الابتدائي اختبار المستعمرات المشبوهة لkampilobakterioznye باستخدام عدة تراص اللاتكس Sampylobacter طقم اختبار شركة OXOID (UK). وتستند هذه التقنية على تفاعل السطح اختبار جزيئات اللاتكس توعية مع الأجسام المضادة أرنب kampilobakterioznymi على السطح مستضدات الخلايا المحددة يشتبه kampilobakterioznye.

لتحديد الأنواع العطيفة باستخدام أنظمة التشخيص الحديثة (شرائط) المعهد مصطنع شركة الحيوي Merieux (فرنسا)، والسماح لمرة واحدة وعقد مجموعة من الأنزيمية واستيعاب التجارب والاختبارات للحساسية للمضادات الحيوية.

تم إجراء المحاسبة وتفسير النتائج بصريا بعد 24 ساعة من الحضانة عند 35-37 0C، مقارنتها مع الجدول تحديد الهوية.

سواء في روسيا أو في الخارج، حتى الآن لا يوجد وثيقة معيارية تحدد بوضوح إجراءات تحديد والمحاسبة للحساسية نتائج العطيفة إلى العقاقير المضادة للميكروبات. الجمعية الفرنسية لعلم الأحياء الدقيقة (SFM) والجمعية البريطانية للعلاج مضادات الميكروبات (BSAC) تقديم توصيات مؤقتة فقط، مشيرا إلى تعقيد العلاقة بين MIC وقطر منطقة تثبيط النمو، وNCCLS أيضا لا يعطي توصيات بالضبط.

1. العدوى Kampilobakterioznaya هي واحدة من الأماكن الرائدة في هيكل AEI في المنطقة ليبيتسك. كان معدل الإصابة لكل 100،000 من السكان 1.46 في عام 2002 و3.34 في عام 2003. تحدث أعلى معدلات الإصابة عند الرضع - 147.6 لكل 100 ألف من السكان والأطفال 1-2 سنوات - 43.05 لكل 100 ألف من السكان. هناك تشابه نشر هذا علم تصنيف الأمراض مع مناطق أخرى من الاتحاد الروسي.

2. العطيفة سلالات معزولة في ليبيتسك لديهم مستوى عال من الحساسية لمعظم المضادات الحيوية اختبارها إلا السيفالوسبورين 1ST جيل (سيفالكسين، سيفازولين).

3. استخدام متحدة رد فعل koagglyutinatsii كما يشير طريقة الفحص السريع والبكتريولوجي العطيفة زراعة تحسن كبير في كفاءة التشخيص الميكروبيولوجي الناجمة عن هذا المرض. (6)

وفقا للبحوث التي أجرتها مجموعة من المؤلفين (4،5) وجدت أن مستوى حدوث OCI حتى يومنا هذا لا يزال مرتفعا جدا وليس لديه ميل إلى الانخفاض! ومع ذلك، عندما قام عدد من أخي (العصبوي فليكسنر 2A ehsherihioza 0157، klostridioz) من شدة المرض وعدد من المضاعفات تزداد في السنوات الأخيرة، وغالبا ما يزيد من سوء أحوال الطقس. لسوء الحظ ، تأخر تشخيص OCI في كثير من الحالات ، وعدد الأخطاء التشخيصية ، وفقًا لعيادتنا ، خلال العشرين عامًا الماضية هو 12.2-14.7٪ وما زال مستقرًا.

السبب الرئيسي لأخطاء التشخيص هو رغبة الأطباء في إجراء عمليات تشخيص الأمراض ، استناداً إلى التفسير المسبب للأمراض. ومع ذلك ، يجب الأخذ في الاعتبار أن المستوى الحالي للدراسات البكتريولوجية والفيروسية والمصلية ليس مشجعا.

وفقا للبيانات الرسمية ، في المختبرات المؤهلة للأمراض المعدية ، ضعف عزل الزراعة الوحيدة للبكتريا الممرضة بشكل مشروط من براز المرضى لأول مرة 3 أيام من المرض ممكن في المتوسط ​​في 50 ٪ ، مرة واحدة في 30 ٪ من الحالات.

عندما يجب الدراسات المصلية أن تأخذ في الاعتبار أن الزيادة في التتر الأجسام المضادة في الدم من المريض لا يتوقف فقط على نوع من مسببات المرض، ولكن إلى حد أكبر على التفاعل الكائن الحي وكثيرا ما أعربت قليلا أو لا مكان.

ومع ذلك ، فإن سرير المريض يتطلب التشخيص المبكر لـ OCI ، باستثناء أمراض جراحية أو علاجية أو غيرها من الأمراض الجسدية التي لها أعراض مشابهة. في نفس الوقت ، التفسير المسبب للمرض من OCI ليس ضروريًا ، لأن العلاج المضاد للجراثيم (مضاد للجراثيم) مع عدد هائل من هذه الأمراض (باستثناء داء الشيغيلات) لا يتم إجراؤه أو أنه ذو طبيعة مساعدة.

يتم تحديد التفسير المسبب للمرض بشكل رئيسي من خلال الحاجة إلى تدابير مضادة للوباء ويتم تنفيذها في ثلاث حالات:

Ш مع الاشتباه في الكوليرا.

Ш خلال انفجارات المجموعة من ОКИ ؛

Ш مع عدوى المستشفيات.

في هذه الحالات ، من الضروري إجراء دراسات وبائية وبكولوجية ومصلية متعمقة. لسوء الحظ ، من أجل التشخيص المستعجل لأبحاث أوراسكوم إنسيبرال (OCI) ، فإن القليل من الأبحاث المفيدة (التنظير السيني ، تنظير القولون ، التنظير الإشعاعي) هي معلومات زهيدة.

يجب أن يكون التشخيص المبكر للوسواس القهرية متلازماً من أجل تحديد أعراض التسمم ومتلازمات الجفاف. فقط يمكن توفير ذلك فقط: تقليل عدد الأخطاء التشخيصية والقيام في الوقت المناسب وبالكفاية بتنفيذ علاج إمراضي عاجل. على مدى السنوات العشرين الماضية ، لم ينخفض ​​معدل الوفيات في أوراسكوم للإنشاء. هناك عدة أسباب لهذا:

v عدد كبير من الأخطاء التشخيصية (12.2-14.7٪) ؛

v التغيرات في التركيبة الاجتماعية للمرضى (من بين المتوفين 60٪ يعانون من إدمان الكحول المزمن ، أكثر من ثلث الشخص غير محمي اجتماعيًا) ؛

v تغيير في الشيجلا سيروفار المنتشرة (Flexner 2a) ؛

v Pathomorphosis of OCI - زيادة في عدد الحالات مع تلف الأمعاء الغليظة وتطور التهاب الصفاق. في عيادتنا ، الفتك للعدوى السامة التي تنتقل عن طريق الغذاء والسلمونيلا هي 0.1 ٪ ، وبالنسبة للشيجيل - 1.4 ٪.

للحد من الفتك من الالتهابات المعوية الحادة ، فمن الضروري:

v الاستشفاء المبكر في المستشفيات المعدية من المرضى الحاد والمعتدل ، وكذلك الأشخاص غير المستقرون اجتماعياً مع أي شدة للمرض ؛

v العلاج المناسب للإماهة ؛

v العلاج عقلاني عقلاني من داء الشيغيلات مع استخدام السيفالوسبورينات الجيل الثاني والثالث والفلوروكينولونات ، وخاصة في مرض شديد.

الكشف المبكر عن المضاعفات: الصدمة السمية المعدية (ITSH) ،

v DIC-syndrome ، الفشل الكلوي الحاد (ARF) ، والالتهاب الرئوي ، وما إلى ذلك ؛

v تحديد ومعالجة مناسبة للأمراض المصاحبة ؛

v عند المرضى الذين يعانون من حالات حادة (ITH ، متلازمة DVS ، متلازمة الضائقة التنفسية ، اعتلال الدماغ ، التهاب المفاصل ، ديناميكا الدم غير المستقرة) تحدث في الوقت المناسب ، يتم نقل المرضى إلى وحدة العناية المركزة.

وهكذا، OCI - polyetiology مجموعة كبيرة من الأمراض، والمتلازمات التي تحدث مع آفات الجهاز الهضمي، التسمم والجفاف متفاوتة الخطورة.

التشخيص OCI تكون المتلازمة بدلا من المسبب للمرض (باستثناء الكوليرا وداء الشيغيلات).

الأخطاء التشخيصية في أوراسكوم للانشاء وأوضح إلى حد كبير من الأعراض السريرية الشائعة العديد من الأمراض الجسدية (التهاب الزائدة الدودية الحاد، حالات بطء حركة الامعاء، واحتشاء عضلة القلب، والحمل خارج الرحم والسكري اللا تعويضية وآخرون).

أساس العلاج هو OCI معالجة الجفاف حلول بلوراني متعدد الأيونات التي نفذت عن طريق الفم أو عن طريق الوريد. يجب أن يتم العلاج من أشكال معقدة من أخي (ITSH، DIC، ARDS و ccNSO الله.) في ظل ظروف وحدات العناية المركزة في كثير من الحالات. (7.8)

عدوى معوية

طريقة البكتريولوجية  يشمل bacterioscopy المواد من المريض، والعزلة ثقافة نقية والتعرف على العوامل المسببة للأمراض مع تحديد حساسية للمضادات الحيوية وأدوية العلاج الكيميائي.

اختيار المواد  للأسلوب التحقيق bacterioscopic يعتمد على المسببات المفترض من المرض، ومرحلة المرض بسبب المرضية والخصائص البيولوجية من مسببات المرض وعوامل أخرى.
1. مع الأمراض المعديةوانطلاقا مع تجرثم الدم (حمى التيفوئيد، والصرف الصحي تعميم أشكال السالمونيلا)؛ في الإنتان أي المسببات، لا يسبب فقط قيحي البكتيريا مكورة، كولاي، ولكن أيضا أكثر ندرة أنه الممرضات (السراتية Salinaria، nonfermenting البكتيريا والبكتيريا اللاهوائية، L-شكل العقدية (طريقة Sukneva) والكائنات الدقيقة الأخرى)، واللجوء في هذه الحالات للمحاصيل على وسائط مغذية خاصة. وينبغي التأكيد على أن نجاح الطيف الترددي تخصيص ومسببات الأمراض من الدم وغيرها من الأسرار البيولوجية المريض يعتمد على سعة الاطلاع، والفضول، وعمال المثابرة مختبر البكتريولوجي.
2. السائل النخاعي (التهاب السحايا القيحي، والتهاب السحايا السلي خلال زراعة لفترات طويلة (أكثر من شهر) لاختيار على البكتيريا المسببة للسل خاصة وسائل الإعلام المغذيات.
3. البلغم (الالتهاب الرئوي الحاد والتهاب الرغامى و القصبات والسل والسعال الديكي، والطاعون، والأشكال النادرة التيفوئيد (pnevmotif)، الفيلقيات، داء المفطورات التنفسي والكلاميديا).
4. المخاط، الصديد من اللوزتين (stafilokkovye والعقدية التهاب في الحلق).

5. البلاك والمخاط من اللوزتينوحنجرة والإفرازات الأنفية من الملتحمة والأعضاء التناسلية (الدفتريا).
6. القشط مع الغشاء المخاطي للأنف (الجذام).
7. إبراء الذمة من الأنف والبلعوم (sinuitis، نتن الأنف، rinoskleroma).

8. ذمة السائل، وقطع من المصابين nekrozirovannye الأنسجة العضلية (التهابات اللاهوائية)؛ الجروح التفريغ (التسمم الغذائي، إذا لزم الأمر، والكزاز).
9. منقط من العقد الليمفاوية الموسع (السل، وداء المقوسات).
10 المحتوى من الساق السوداء ومنقط المتقيحة العقد (الطاعون، حمى الأرانب، انتان الدم قيحي المنشأ، والجمرة الخبيثة).

الدراسات البكتريولوجية  في التهابات خطيرة بصفة خاصة (الطاعون، حمى الأرانب، الحمى المتموجة، والكوليرا (الذي يدرس فقط البراز (!)) يتم تنفيذها في نظام المختبرات الخاصة، واستبعاد إمكانية الإصابة الذاتي لموظفيها في العمل مع الثقافات البكتيرية وانتشار مسببات الأمراض وراء هذه المختبرات.

الاختبارات المصلية. قدم في العيادة في وقت متأخر قليلا من الطريقة البكتريولوجية المقترحة من قبل R. Koch. في عام 1896، اكتشف F. فيدال أن المصل من المرضى الذين يعانون من حمى التيفوئيد قبل نهاية 1st أسبوع من المرض يكتسب القدرة على التصقت عصا التيفوئيد - العامل المسبب للحمى التيفوئيد (رد فعل إيجابي فيدال). في الأمراض المعدية متعدد المكروبات بعد فتح فيدال لجأت أيضا إلى تحديد راصة عيار المصل المخصص للمادة المرضية من العديد من الأنواع البكتيرية (رد فعل autovidalya) والسيطرة على ديناميتها، وهذا يتوقف على مرحلة المرض. أعلى التتر من الملزن إلى واحد من أنواع البكتيريا المعزولة يشهد لصالح المزيد من تورطه المسبب للمرض في تطور هذا المرض.

بالفعل في البداية تطبيق رد فعل فيدال  في العيادة، لوحظ أن أكثر أشكال حادة، على سبيل المثال، حمى التيفوئيد يمكن المضي قدما في غياب راصة الدم (رد فعل فيدال السلبي) الذي يشير إلى القيمة التشخيصية النسبية الأسلوب كما في حمى التيفوئيد وغيرها من الأمراض المعدية. في وقت لاحق تم استبدالها بأكثر من الطرق المصلية الحساسة. لكن أولوية اكتشاف فيدال ستبقى إلى الأبد.

في الوقت الراهن، للتشخيص المصلى  الالتهابات البكتيرية باستخدام تقنيات أكثر حساسية عند الممتص منها مستضد البكتيرية على سطح خلايا الدم الحمراء (diagnostikumy1 الكريات الحمر). وهكذا ، تم تطوير استجابة مصلية جديدة بشكل أساسي: الاستجابة المباشرة (RPGA) والتلميخ غير المباشر (RIGA). وهي تستخدم على نطاق واسع لأغراض التشخيص المصلي لكثير من الأمراض البكتيرية والفيروسية وغيرها المعدية (التيفوئيد، السالمونيلا، داء الشيغيلات والحمى المتموجة، حمى الأرانب، وما إلى ذلك). فإنه يحتفظ القيمة التشخيصية لها من رد فعل هطول الأمطار في بعض الأمراض (التسمم الغذائي والجمرة الخبيثة - اسكولي رد فعل على التشخيص لها في الحيوانات). لتشخيص مصلي خصوصا على نطاق واسع المستخدمة حاليا تكملة تثبيت (RSK)، اقترح في عام 1901 من قبل الباحثين الفرنسي بورديه وجينغو (الزهري والسيلان والحمى المالطية وداء المقوسات والسل والجذام والرعام). RSK هي أكبر قيمة لتشخيص مصلي من الالتهابات الفيروسية (الأنفلونزا والسارس الآخرين، والهربس، والتهاب الدماغ والتهاب الغدة النكفية، الببغائية وآخرون)، فضلا عن العديد من rickettsioses.

دراسات البكتريولوجية طريقة patmateriala لعزل وتحديد المتفطرات يضم 3 طرق: bacterioscopic والثقافية والبيولوجية / R.V.Tkzova، 1983؛ II Rumachik، 1987،1993؛ AS دونتشينكو ، 1989 ؛ YY قاسيشا ، 1990 ؛ AH Naimanov، 1993؛ ل. ف. خودون ، 1997. يجب ألا تتجاوز فترة الفحص البكتريولوجي 3 أشهر.

وبالنظر إلى أن السل التغييرات العيانية في الأعضاء والأنسجة من السل البقري هو العامل المسبب لأنواع الأبقار، واستكشاف ثقافة لا مادية لا معنى له. إذا تم تسليم هذه المواد إلى المختبر للتحقيق ، عندئذ يتم إجراء فحص للعمولة ويتم إعداد القانون. يتم جعل المواد غير ضارة.

Bacterioscopic (المجهر) التحقيق من المواد في إعداد كل الجسم (أو هيئة القطع مع التغييرات السل المشبوهة) والعقدة الليمفاوية تسليمها للدراسة 2 التشهير وتجفيفها في الهواء، ومصباح تثبيت روح اللهب، وتلطيخ Tsil- نيلسن ومشاهدة مسحات ملطخة تحت المجهر ، مع ما لا يقل عن 50 حقولا من الرؤية في كل لطخة. من الضروري إعداد ما لا يقل عن 20 مسحة مطبوعة من المادة من جثة واحدة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم تحضير مسحات المجهر أيضًا من المواد المعلقة على الوسائط الغذائية.

تلوين تشويه تسيل نيلسن هو الانتخابات لتحديد المتفطرات: على خلفية زرقاء من الأقمشة الملونة أو دخيلة المتفطرات البكتيريا ينظر إليها على أنها الأحمر والوردي أو روبي العصي الحمراء. فمن الأفضل لعرض مسحات تحت المجهر الرصاص مجهر مجهر بزيادة قدرها 1.5 (فوهة) × 7 (بصري) × 90 أو 100 (العدسة).

يتم استخدام الأسلوب كإشارة، عن وجود أو عدم وجود عصيات في المسحات الإطلاق أي تأثير على مجرى مزيد من البحث وحتى تشويه الرأي الإيجابي له أي دلالة قانونية (غير الطيور). يجب التحقيق في المواد كذلك.

ويعتبر إنشاء مختبر تشخيص السل في الطيور إذا من المواد سلط الضوء على ثقافة المتفطرات من أنواع الطيور (من الببغاوات - نوع الإنسان أو الطيور)، واختبارات بيولوجية نتيجة إيجابية، وكذلك الكشف عن المتفطرات في مسحات من المواد الباثولوجية للدراسة مجهرية (7.3. 2. أدلة).

ومن الضروري أن تولي اهتماما أيضا إلى حقيقة أن إعداد التشهير وتثبيت وجهة نظر وقتا طويلا جدا، ووجد فيها المتفطرات نادرا ما ينجح، وحتى في مسحات من المواد الطين المصنفة. ولذلك، من أجل توفير الوقت والموارد المادية في الدراسة من الحيوانات التي كان أي تغيير عند الذبح، فإنه من المستحسن لتقييد عرض الطبخ وتلطخ الوحيد للخروج على المغذيات المواد الطين المصنفة المتوسطة. وهذا لن يؤدي إلى تلف في تشخيص السل، وذلك لأن الأبحاث المادي يستمر على.

وبصرف النظر عن المجهر الضوئي التقليدي يمكن استخدامها المجهر الفلورسنت. يتم إعداد مسحات بطريقة مماثلة، الثابتة والملون مع خليط من fluorochromes. يتم فحص السكتات الدماغية الملونة تحت المجهر الفلوري. هذه الطريقة أكثر حساسية، ولكن أقل تحديدا، القليل جدا هو مقبول، لا سيما في المختبر العملي.

الثقافات عزل المتفطرات على وسائل الإعلام المغذيات هي واحدة من الروابط الهامة في التشخيص المختبري لمرض السل في المرحلة الحالية. ومع ذلك، وسائل الإعلام المغذيات، ما قد زرع المواد (5-10 أنابيب وفقا للتعليمات) في الأسابيع الأولى 2-3 لديهم الجزئي أو الكامل الداعمة للنمو، وعادة ما يرجع إلى انتهاك العقم في المواد البذر. ورفض المحاصيل في الوقت ذاته عندما المظهر الأكثر احتمالا للنمو الأولي من المتفطرات غير نمطية (ناهيك عن مظاهر الأولي للنمو المتفطرة السلية، مما يدل على النمو حتى في وقت لاحق). في مثل هذه الحالات، وطريقة الثقافة لعزل المتفطرات على وسائل الإعلام المغذيات يقع ميكانيكيا. هذا هو واحد من الأسباب الرئيسية لنتائج سلبية في المواد الدراسية bakterialogicheskom. ونتيجة لذلك، دون الحصول على نمو مستعمرة من المتفطرات على وسائل الإعلام المغذيات بعد زرع المواد، ونجا حيوانات المختبر لمدة 3 أشهر، ينبغي أن يكون الرد المعتاد من المختبرات: "لا يتم تخصيص جراثيم السل" أو "مواد الامتحان السلبية لمرض السل." وبناء على نتائج البحوث في أسباب السلين استجابة البقري غير مثبت، وهذا يؤدي إلى مزيد من ذبح غير مبرر من كمية كبيرة من رد فعل على السلين الحيوانات في أماكن العمل خالية من السل البقري، والذي يسبب خسائر اقتصادية كبيرة ينتهك التداول والاستنساخ من القطيع.

بالنظر إلى ما سبق، فإنه من الضروري إعطاء الأولوية لعملية الثقافة لاسترداد المتفطرات من المواد الغذائية على وسائل الإعلام، والحلقة الأضعف في التشخيص bakterialogicheskoy السل في المختبرات البيطرية حي.

النتائج الإيجابية لثقافة طريقة توزيع المتفطرات تعتمد أساسا على عاملين: زيادة موثوقية المتفطرات من البذر المادية والامتثال لشروط العقم خلال عملية في الملاكمة.

زيادة البذر موثوقية المتفطرات المتخذة لدراسة المواد يعتمد بالدرجة الأولى على جودة اختياره، للمحاصيل المعالجة وزيادة عدد الأنابيب المتوسطة التي في المصنف.

المتطلبات الرئيسية في زراعة المواد الغذائية على وسائل الإعلام وتضمن نمو مستعمرات من المتفطرات:

أ) مواد مختارة للفحص البكتريولوجي من الحيوانات النافقة، وكان أي تغيير عند الذبح، منفصلة عن بعضها الذبيحة والمصنف 10-20 أنابيب كل المتوسطة العينة (المواد من كل حيوان) على النحو التالي:

العقد الليمفاوية من الرأس (submaxillary ، zaglugochnye) ؛

الغدد الليمفاوية القصبي و المنصف.

الغدد الليمفاوية المساريقية (المساريقي) ؛

العقد الليمفاوية الأخرى (في وجود مناطق مريبة) ؛

الأجهزة (أيضا إذا لزم الأمر).

نتيجة لذلك ، نزرع المواد من حيوان واحد إلى 30-50 أنبوب متوسط. هذا يحقق زيادة في الموثوقية من المتفطرات بذر 3-5 مرات، وبدون تقسيم العينات (عن طريق تعليمات) بذر المواد ينصح جميع الأنابيب 5-10 البيئة من اثنين من رؤساء مزرعة واحدة.

ب) مباشرة في المواد قطع المحاصيل باكتريولوجي مع القطع المكسورة من هيكل الصرفي من العقدة الليمفاوية أو الجسم (تضخم، نقطة وختم النطاقات نزيف، وما إلى ذلك). ومن الضروري قطع جميع المناطق المتغيرة. إذا كانت المادة بالحجم تتضح كثيرًا في هاون واحد ، فيمكن تقسيمها إلى قسمين.

ج) يجب مراعاتها للإجراءات التي اتخذت من دون إزعاج وضع معالجة والبذر المواد.

ز) عندما تجانس المواد، وخاصة الغدد الليمفاوية، فمن الضروري استخدام الرمل المعقم أو melkobitoe زجاجي معقم. المواد فرك القصوى (تصل إلى الاتساق دسم) لاستعادة أفضل من المتفطرات من مواد الاختبار

د) إضافة المالحة للمادة متجانسة في هاون في المبلغ اللازم لبذر مادة الطين على وسائل الإعلام المغذيات والأحيائي (في المتوسط ​​إلى 0.5 سم 3 في أنبوب واحد 1 و -2 CM3 للعدوى تحت الجلد خنزير غينيا واحد). يمكن حساب هذا المبلغ من المالحة مقدما.

ه) استعراض محصول المواد في 3 و 5 و 7 و 10 و 15 يوما ثم مرة واحدة في الأسبوع.

ز) أي الكائنات الحية الدقيقة التي تزرع في مستعمرة المتوسطة (الغشاء المخاطي نموذجي أو شاذة، العديم الميلانين أو الصباغ، أو جافة نوعا ما، الخ) يجب أن تمر خلال المجهر الانتخابات الملون وفقا لتسيل-نلسن.

وينبغي إيلاء الاهتمام لدرجة مواد التنظيف من الحمض (أو القاعدة) تستخدم لمعالجة المواد من التلوث مع البكتيريا الدخيلة. ستظل الكميات المتبقية من الحمض موجودة دائمًا في المادة المعلقة من المادة المزروعة ، ولكن يجب أن تكون صغيرة جدًا. والدليل على هذا هو لاستعادة اللون الأصلي للمتوسط ​​في اليوم التاسع 2-4 بعد البذر المواد. إذا لم يتم استعادة لون الوسيط ، فهذا يدل على زيادة كمية الحمض المتبقي. يكتسب لون الوسيط لونًا أزرقًا متفاوتًا الكثافة. وتباطأ ارتفاع (المفترضة) المتفطرات في هذه الحالة، أو أنها لن تفعل، خاصة أن العامل المسبب للمرض السل في نظام زراعة أكثر تطلبا. كمية المتبقية من الأفعال الحمضية على الميكوبكتريا إلى حد ما.

لختم الأنابيب بعد ويمكن استخدام المواد بذر القطن وأنبوب القطن الشاش تليها شغل لهم مع البارافين، المطاط والمطاط غير الممثلة قطع مع الأخدود منحرف، القشرية والمعادن قابس (إغلاق).

الثقافة عندما أنواع معينة من الملحقات مخصصة من المتفطرات معروف للكثيرين (حوالي 300) من اختبارات مختلفة: الثقافة والمورفولوجية والبيولوجية، والكيمياء الحيوية، مصلية، وتحديد المقاومة للأدوية، الخ ومع ذلك ، في الممارسة البيطرية ، يتم تطبيق الحد الأدنى (انظر الدليل). للمختبرات كافية تعريف ثقافة معزولة التالية الأنواع المتفطرات: الأبقار والبشري والطيور، على النحو الذي يحدده الأحيائي، والمتفطرات شاذة - تقسيمها إلى مجموعات وفقا لرونيون (1959): I - fotohromogennye (تشكيل الصباغ عند التعرض للضوء)، II - skotohromogennye (تشكيل الصباغ المتفطرات تنمو بسرعة وkislousto - بغض النظر عن التعرض للضوء - وفي الظلام والنور)، III - nehromogennye (وليس تشكيل الصباغ) وإلا ما يطلق عليه العديم الميلانين (هنا على النحو المشار إليه الممرض من أنواع الطيور والسل)، والرابع Alikhan'yan آخرون الفطور الرمامة.

ويكفي أن من الفعالية والجدوى الاقتصادية لدراسة خصائص مخطط ثقافة مكثف المختارة التي يتم التركيز على توقيت حدوث نمو مستعمرة الأولية، وتصبغ الخصائص الثقافية المورفولوجية وتلويني، عندما الملون وفقا لتسيل-نلسن. خصوصا اختبار كبير الحبل التعليم في المرحلة الابتدائية، أو حتى في ثقافة فرعية بالتزامن مع نتائج الأحيائي. لإعداد مسحات من المستعمرات في نفس الوقت فإنه من المستحسن القيام بها من المستعمرات ومن بقايا الطين والمكثفات، أي من الجزء السائل في الجزء السفلي من أنبوب الاختبار.

وبالإضافة إلى ذلك، يكون العاملين في المختبرات الفرصة للقيام ليس فقط من ذبح السيطرة على رد فعل على السلين الحيوانات وأخذ عينات من المواد في أغراض البحوث، ولكن أيضا لتحديد للفحص البكتريولوجي في الحياة الحيوانية (الشعب الهوائية أو مخاط الأنف، الحليب، البراز، البول، السائل والدم وهلم جرا. د.)، وتغذية عينة والمياه والكائنات البيئية لتخصيص المتفطرات وبالتالي تسبب بشكل غير مباشر إثبات استجابة الماشية إلى السلين. في زرع المواد والعينات إضافية من البيئة من الكائنات باستخدام أساليب معروفة من التركيز الفطرية: الترسيب، والتعويم، والترسيب، والتعويم وغيرها.

انخفاض مخطط التمايز بين الفطريات باستخدام التحليل الأحيائي

يعد تشخيص الأمراض المعدية من أصعب المشاكل في الطب السريري. طرق مختبر للبحث في عدد من الكيانات السريرية تلعب المفتاح، وفي عدد من الحالات السريرية دورا حاسما ليس فقط في التشخيص ولكن أيضا في تحديد النتيجة النهائية.

تشخيص الأمراض المعدية يكاد ينطوي دائما على استخدام التقنيات المخبرية المعقدة.

وهناك شبكة من المختبرات المستقلة "Sitilab" في عمله لتشخيص الأمراض المعدية باستخدام 3 مجموعات من الأساليب مختبر أبحاث خاص:

1. البكتريولوجية.
2. مصل.
3. تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) للكشف عن DNA أو RNA من العدوى الممرض في المواد التي تم اختبارها.

في بعض المرضى لتشخيص المسببات غير كافية لتنفيذ عملية الفحص البكتريولوجي المعدية للالتهابات، في حالات سريرية أخرى، بيانات حاسمة من الدراسات المصلية، وثالثا، لتوفير معلومات مفيدة لا يمكن إلا أن طريقة PCR. ومع ذلك، في معظم الأحيان في الممارسة السريرية، يجب على الطبيب استخدام البيانات من مختلف وسائل البحوث المختبرية.

الطرق البكتريولوجية للبحوث

في معظم الأحيان إجراء دراسات البكتريولوجية في حالات الأمراض يشتبه بيو التهابات (تصل إلى 40-60٪ في هيكل الأمراض الجراحية) بهدف هيكل دراسة تشخيصية على المسبب، وتحديد الحساسية للمضادات الحيوية. نتائج الاختبارات البكتريولوجية تساعد على تحديد الدواء الأكثر فعالية للعلاج بالمضادات الحيوية، والسلوك في الوقت المناسب من أنشطة للوقاية من عدوى المستشفيات.

المنشطات من الأمراض الالتهابية هي البكتيريا المسببة للأمراض حقيقية، ولكن هي في معظم الأحيان الميكروبات الانتهازية تابعة للميكروبات الطبيعية للإنسان أو تدخل الجسم من الخارج. البكتيريا المسببة للأمراض حقا في معظم الحالات تسهم في تطوير مرض معد في أي شخص صحي. الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض مشروطة تسبب الأمراض بشكل رئيسي في الأشخاص الذين يعانون من ضعف في المناعة.

التحقيق البكتريولوجي للأمراض الناجمة عن مسببات الأمراض الانتهازية، التي تهدف إلى اختيار كل الكائنات الدقيقة الموجودة في المواد المرضية، والتي تميزها عن دراسات مماثلة من الأمراض التي تسببها الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض صحيح عند إجراء البحث من المثير.

للحصول على نتائج كافية من الأبحاث الجرثومية في الأمراض الالتهابية المزمنة مهم بشكل خاص لمراقبة عدد من المتطلبات في القبض على المواد البيولوجية للتحليل، نقل إلى المختبر، ودراسة وتقييم نتائجها.

للتعرف على نوع من الأمراض بيو ملهب الممرض ولتحديد الحساسية للاستخدامات المختبرية البكتريولوجي تقنيات معقدة مضادة للميكروبات. وتشمل هذه:

• الفحص المجهري للتشويه (تنظير البكتريا) من المادة الحيوية المسلمة ؛
• زراعة ثقافة الكائنات الحية الدقيقة (زراعة) ؛
• تحديد البكتيريا.
• تعريف الحساسية لمضادات الميكروبات وتقييم نتائج الدراسة.

في البداية تخضع المادة البيولوجية التي يتم تسليمها للمختبر البكتريولوجي للفحص المجهري.

الفحص المجهري للتشويه (تنظير البكتريا)ويتم ملون غرام أو الأصباغ الأخرى، خارج في البلغم، وتصريف الصديد من الجرح في الأغشية المخاطية (من مسحة عنق الرحم، والحلق والأنف والعينين، وما إلى ذلك). نتائج الفحص المجهري تسمح الحكم ما يقرب من طبيعة البكتيريا، والمحتوى الكمي ونسبة نوعا مختلفا من الكائنات الحية الدقيقة في المواد البيولوجية، ويوفر أيضا معلومات عن الكشف المؤقت جراثيم كبير etiologically في المواد البيولوجية التي يسمح الطبيب لبدء العلاج فورا (التجريبية). في بعض الأحيان ، يستطيع الميكروسكوب اكتشاف الكائنات الدقيقة التي لا تنمو بشكل جيد على الوسائط الغذائية. استنادا إلى التحديد البيانات تتم وسط غذائي المجهر لزراعة الميكروبات الموجودة في مسحة.

زراعة الكائنات الدقيقة.  بذر بيولوجية اختبار لإنتاج سائل الإعلام والثقافة من أجل عزل ثقافات نقية من الكائنات الحية الدقيقة، وتحديد نوع وحساسيتها للمضادات الحيوية. لهذه الأغراض ، يتم استخدام العديد من المواد الغذائية التي تسمح باختيار أكبر عدد من الكائنات الحية الدقيقة. الأمثل هو وسائل الإعلام المغذية التي تحتوي على دم حيوان أو إنسان ، وكذلك مرق السكر ، وهي بيئة لاهوائية. في نفس الوقت ، يتم إجراء عملية البذر من أجل التشخيص التفاضلي والانتقائية (مخصصة لنوع معين من الكائنات الحية الدقيقة). ويتم زرع بها على أطباق بتري معقمة التي مسبقا-سكب وسط غذائي لنمو الكائنات الحية الدقيقة.

الفحص المجهري لطخات ملطخة بالغرام

1 - العقدية ؛ 2 - المكورات العنقودية. 3 - ديودوكسارك من فريدلاند. 4 - المكورات الرئوية

وحضنت أطباق بتري مع المحاصيل في الفرن على درجة حرارة معينة، ولعدد من الغاز الكائنات الحية الدقيقة (على سبيل المثال، لخلق ظروف الزراعة اللاهوائية انخفاض الاوكسجين) شروط 18-24 ساعة. ثم التصفح طبق بتري. يتم تحديد التلوث الكمي للمواد الحيوية المسلمة بالميكروبات من عدد وحدات تشكيل المستعمرات (CFU) لكل مل أو 1 مجم من عينة الاختبار. عند عرض أطباق بتري ، يتم الكشف عن بعض سمات تلون البيئة ، التنوير في عملية نمو الثقافة. العديد من مجموعات البكتيريا تشكل أشكال مستعمرة مميزة ، تنبعث منها أصباغ ملونة مستعمرة أو البيئة المحيطة بها. من كل مستعمرة ، إجراء مسحات ، وصبغ الغرام والمجهر. تقييم التوحيد للبكتيريا والشكل والحجم ، وجود الجراثيم أو شوائب أخرى ، كبسولات ، موقع البكتيريا ، نسبة البقع غرام. كل هذه المعلومات بمثابة مكون هام لاختيار وسائل الإعلام واستلام ثقافة نقية من كل الكائنات الحية الدقيقة.

يتم فحص المستعمرات من أجل وسائل الإعلام المغذية الكثيفة والسائلة وشبه السائلة التي تعتبر مثالية لزراعة نوع معين من البكتيريا.

ثقافات نقية معزولة من الكائنات الحية الدقيقة يتعرضون لمزيد من الدراسة في اختبارات التشخيص على أساس الصرفي، الأنزيمية، والخصائص البيولوجية ومولدة من السمات التي تميز أنواع البكتيريا منها أو متغير.

تحديد  هي مجموعة من الأساليب البكتريولوجية لدراسة البكتيريا ، مما يجعل من الممكن تحديد نوع الكائنات الحية الدقيقة. في مختبر "Citilab" يتم تحديد معظم أنواع البكتيريا والفطريات على محلل البكتريولوجية التلقائي باستخدام لوحات تشخيصية للإنتاج الأجنبي. في شكل نتيجة الاختبار في شكل هنا من الكائنات الحية الدقيقة أو جنس، على سبيل المثال، العقدية الرئوية (المكورة الرئوية)، أو Eschrichia القولونية (إي كولاي).

تحديد الحساسية للأدوية المضادة للبكتيريا.  يتم دراسة حساسية الأدوية المضادة للميكروبات في الثقافات النقية المعزولة من الكائنات الحية الدقيقة ذات الأهمية المسبب لهذا المرض. لذلك ، في اتجاه الاختبارات البكتريولوجية ، فإنه مطلوب للإشارة إلى تشخيص المرض في المريض. يساعد تحديد حساسية البكتيريا على طيف المضادات الحيوية الطبيب المعالج على اختيار الدواء المناسب لعلاج المريض.

مختبر "Sitilab" تحديد حساسية معزولة ثقافة نقية من معظم أنواع البكتيريا والفطريات والتي أجريت على محلل البكتريولوجي التلقائي باستخدام لوحات التشخيص الصنع الأجانب مجموعة واسعة من مضادات الجراثيم الحديثة (6-32 الاستعدادات، اعتمادا على الكائنات الحية الدقيقة المختارة) مع تحديد الحد الأدنى للتركيز المثبطة (MIC). على شكل نتائج لتحديد حساسية للأدوية المضادة للبكتيريا ، فإن التسمية R - تشير إلى المقاومة ، I - حساسية معتدلة ، S - حساسية الكائن الدقيق لهذا الدواء.

تقييم نتائج البحوث. تنتمي الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض مشروط للميكروبات الطبيعية للجسم البشري يطرح عددا من الصعوبات في تقييم دورها المسبب للمرض في تطوير الأمراض الالتهابية. يمكن أن تمثل الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض نمطا طبيعيا من السوائل والأنسجة التي تم فحصها أو تلوثها من البيئة. لذلك ، من أجل تقييم نتائج الدراسات البكتيرية بشكل صحيح ، فمن الضروري معرفة تكوين البكتيريا الطبيعية للعينة تحت الدراسة. في الحالات التي يكون فيها مادة بيولوجية تحليلها عادة معقمة، مثل السائل المخي الشوكي، الإفرازات، وكلها معزولة من الكائنات الدقيقة يمكن اعتبار مسببات المرض. في الحالات التي يكون فيها مواد اختبار له البكتيريا الخاصة بها، مثل الإفرازات المهبلية، البراز، البلغم، فمن الضروري أن تأخذ في الاعتبار التغيرات في تكوينها النوعي والكمي، وظهور أنواع غير عادية له من البكتيريا، والكمية تلوث مادة بيولوجية. على سبيل المثال، عند درجة الفحص البكتريولوجي من تجرثم البول (عدد البكتيريا في 1 مل من البول)، وهي متساوية وفوق 10 5 يشير إلى وجود التهاب المسالك البولية. تم العثور على درجة أقل من البكتيريا في الأشخاص الأصحاء وهو نتيجة لتلوث البول مع البكتيريا الطبيعية في المسالك البولية.

ولتحديد الدور المسبب للنباتات الميكروبية الانتهازية ، ساعدت أيضًا الزيادة في عدد وتكرار إطلاق البكتيريا من نوع واحد من المريض خلال فترة المرض.

يجب أن يكون الطبيب على علم بأن نتيجة إيجابية من الأبحاث الجرثومية فيما يتعلق بالمواد البيولوجية التي تم الحصول عليها من غرفة معقمة بشكل طبيعي (الدم والسائل الجنبي، السائل المخي الشوكي والأنسجة أو منقط الجهاز)، ودائما نتيجة مقلقة تتطلب إجراءات فورية لتوفير الرعاية الطبية.

الطرق المصلية للبحوث

في قلب جميع التفاعلات المصلية هو تفاعل المستضد والجسم المضاد. تستخدم التفاعلات المصلية بطريقتين.

1. الكشف عن الغرض التشخيصي للأجسام المضادة في مصل الدم للموضوع. في هذه الحالة ، فإن مصل الدم غير معروف من عنصرين من التفاعل (الجسم المضاد ، المستضد) ، حيث يتم تأسيس التفاعل مع المستضدات المعروفة. تشير النتيجة الإيجابية للتفاعل إلى وجود أجسام مضادة في الدم تتطابق مع المستضد المستخدم ؛ نتيجة سلبية تشير إلى غياب مثل هذا. يتم الحصول على نتائج موثوقة من خلال فحص الأمصال "المقترنة" من دم المريض التي اتخذت في بداية المرض (3-7 اليوم) و 10-12 يوما في وقت لاحق. في هذه الحالة ، من الممكن ملاحظة ديناميكيات نمو الأجسام المضادة. في حالات العدوى الفيروسية ، تكون زيادة رباعية الأجسام المضادة في المصل الثاني فقط ذات أهمية تشخيصية.

مع الأخذ في طريقة إلى مختبرات ممارسة المناعي فحص (ELISA) لم يكن ممكنا لتحديد الأجسام المضادة في دم المرضى الذين ينتمون إلى فئات مختلفة من المناعية (الغلوبولين المناعي ومفتش)، مما أدى إلى زيادة كبيرة في طرق التشخيص المصلي informativeness. في الاستجابة المناعية الأولية عندما يتفاعل الجهاز المناعي مع العوامل المعدية لأول مرة، وقد تم تجميع الأجسام المضادة ذات الصلة في المقام الأول إلى المناعي الفئة M في وقت لاحق فقط، في 8-12 أيام بعد مستضد يدخل الجسم، والبدء في تتراكم في الدم من الأجسام المضادة من الدرجة المناعي G. مع الاستجابة المناعية للعوامل المعدية ، يتم إنتاج الأجسام المضادة A (IgA) التي تلعب دوراً هاماً في الحماية ضد العوامل المعدية في الجلد والأغشية المخاطية.

2. إنشاء عام وأنواع تنتمي إلى ميكروب أو فيروس. في هذه الحالة ، المكوّن المجهول للتفاعل هو المستضد. تتطلب مثل هذه الدراسة تفاعلًا مع الأمصال المناعية المعروفة.

الاختبارات المصلية لا تمتلك حساسية ونوعية 100٪ في تشخيص الأمراض المعدية ، يمكن أن تتفاعل مع الأجسام المضادة الموجهة إلى مستضدات من مسببات الأمراض الأخرى. في هذا الصدد ، من الضروري تقييم نتائج الدراسات المصلية مع الحرص الشديد والنظر في الصورة السريرية للمرض. ويرجع ذلك إلى استخدام مجموعة متنوعة من الاختبارات لتشخيص عدوى واحدة ، وكذلك استخدام طريقة لطخة غربية للتأكيد على نتائج طرق الفحص.

في السنوات الأخيرة ، ارتبط التقدم في مجال البحوث المصلية بتطوير أنظمة اختبار للكشف عن طيف الأجسام المضادة المحددة للعوامل المعدية لمختلف الأمراض المعدية.

جشع  - خاصية قوة الربط لأجسام مضادة معينة للمستضدات المقابلة. خلال الاستجابة المناعية لاختراق جراثيم حفز استنساخ الخلايا اللمفاوية محدد أولا يبدأ في إنتاج الغلوبولين المناعي الأجسام المضادة، بينما في وقت لاحق، ومفتش الأجسام المضادة المحددة. الأجسام المضادة IgG لديهم طماعة منخفضة في البداية ، وهذا هو ، مستضد ضعيف ملزمة. ثم تتطور تدريجيا عملية المناعة (قد يكون أسابيع أو أشهر) يذهب نحو تخليق الخلايا الليمفاوية محددة للغاية (vysokoavidnyh) مفتش الأجسام المضادة ربط أكثر إحكاما للمستضدات المقابلة. واستناداً إلى هذه الأنماط من الاستجابة المناعية للجسم ، تم تطوير أنظمة اختبار لتحديد شدة الأجسام المضادة المحددة لـ IgG في الأمراض المعدية المختلفة. الطمث الشديد لأجسام مضادة محددة لـ IgG يسمح باستبعاد العدوى الأولية الحديثة وبالتالي تحديد الطرق العدوى للمريض بالطرق المصلية. في الممارسة السريرية، وجدت التعريف الأكثر استخداما على نطاق واسع الطمع مفتش الأجسام المضادة في داء المقوسات والفيروس المضخم للخلايا العدوى، والذي يوفر معلومات إضافية مفيدة من حيث التشخيص والنذير للاشتباه في هذه العدوى، وخاصة عند الحوامل أو تخطط للحمل.

طريقة تفاعل البلمرة المتسلسل

تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) هو وسيلة لتشخيص DNA، ويسمح لزيادة عدد نسخة من الجزء الكشف عن الجينوم (DNA) من البكتيريا أو الفيروسات هو مليون مرة باستخدام انزيم البلمرة DNA. يتم تضخيم شريحة الحمض النووي المختبرة لجينوم معين (تضخم) عدة مرات ، مما يسمح بتحديدها. أولا، وهو جزيء DNA من البكتيريا أو الفيروسات عن طريق التسخين وتنقسم الى مجموعتين سلاسل، ثم في وجود الاشعال DNA توليفها (تسلسل النيوكليوتيدات محددة إلى الجينومية محددة) ملزمة لهم امتدادات متكاملة من الحمض النووي، وتوليفها في الشق الثاني من الحمض النووي بعد كل التمهيدي في وجود البلمرة DNA بالحرارة . يتم الحصول على اثنين من جزيئات الحمض النووي. يتم تكرار العملية عدة مرات. لتشخيص ، جزيء واحد من الحمض النووي ، أي بكتيريا واحدة أو جسيمات فيروسية ، يكفي. وردا خطوة إضافية - تركيب الحمض النووي من جزيء RNA باستخدام انزيم عكس الناسخ - سمح لاختبار الفيروسات RNA، على سبيل المثال، والتهاب الكبد الوبائي PCR - عملية من ثلاث خطوات، دورات متكررة من تمسخ، الصلب من الاشعال، توليف الحمض النووي (البلمرة). يتم التعرف على كمية توليفة من الحمض النووي عن طريق المناعية إنزيم أو عن طريق الرحلان الكهربائي.

يمكن لـ PCR استخدام مجموعة متنوعة من المواد البيولوجية - مصل الدم أو بلازما الدم ، والكشط من الإحليل ، وخزعة ، والسائل الجنبي أو السائل الدماغي النخاعي ، إلخ. يستخدم أول PCR لتشخيص الأمراض المعدية مثل التهاب الكبد الفيروسي B، C، D، عدوى الفيروس المضخم للخلايا، والأمراض المعدية، والأمراض المنقولة جنسيا (السيلان، الكلاميديا، الميكوبلازما، والعدوى الميورة) والسل وفيروس نقص المناعة البشرية، الخ

ميزة PCR في تشخيص الأمراض المعدية على طرق البحث الأخرى هي كما يلي:

• يمكن العثور على العامل المسبب للعدوى في أي بيئة بيولوجية في الجسم ، بما في ذلك. والمواد التي تم الحصول عليها عن طريق الخزعة.
• من الممكن تشخيص الأمراض المعدية في المراحل الأولى من المرض ؛
• القدرة على تحديد نتائج الأبحاث (عدد الفيروسات أو البكتيريا الموجودة في المادة قيد البحث) ؛
• حساسية عالية من الطريقة ؛ على سبيل المثال الحساسية PCR للكشف عن HBV DNA في الدم هو 0001 جزء من الغرام / مل (حوالي 4.0 فبراير 10 نسخة / مل)، في حين أن طريقة تهجين الحمض النووي باستخدام مجسات تشعبت - 2.1 غ / مل (حوالي 7 ، 0. 10 5 نسخ / مل).