الطريقة البكتريولوجية تستخدم لتشخيص ماذا. الطريقة البكتريولوجية للتشخيص المختبري للأمراض المعدية

هذه هي الطريقة الرئيسية المستخدمة في التشخيص المختبري الأمراض المعدية. ملخص منهج البحث البكتريولوجي - زرع المواد المرضية من المرضى وعزل ثقافة نقية من العامل الممرض إلى تحديد لاحقا حسب الخصائص المورفولوجية والثقافية وتلويني، والكيمياء الحيوية والمستضدات.

إن طريقة عزل الثقافات النقية ، التي تجعل من الممكن عزل أنواع معينة من الميكروبات من واحد أو أكثر من مواطنها الطبيعية ، هي أهم طريقة للبحث الميكروبيولوجي. أول من اقترح طريقة لعزل الثقافة النقية كان L. باستور.

توفر طريقة باستور ، التي تعتمد على استخدام وسائل التغذية السائلة ، عزل ثقافة نقية أساسًا من مادة تحتوي على نوع واحد من الميكروبات (على سبيل المثال ، من الدم في تسمم الدم ، إلخ). كان أقل فعالية عندما كان من الضروري عزل أنواع معينة من الكائنات الحية الدقيقة من خليطها. وفي الوقت نفسه ، في الظروف الطبيعية ، والمواد اللازمة ل البحث البكتريولوجي  غالباً ما يحتوي (البلغم ، الصديد ، التربة ، الماء ، إلخ) على خليط من الكائنات الحية الدقيقة المختلفة.

العزلة الناجحة من الخلطات البكتيرية ودراسة معزولة أنواع مختارة  أصبح ممكنا من خلال تحسين طريقة عزل المحاصيل النقية من قبل روبرت كوخ (ر. كوش) ، الذي تقدم بطلب لهذا الغرض في عام 1881 وسائل الإعلام المغذية الكثيفة ،  حيث يمكن أثناء الزراعة توزيع المادة بطريقة تكون فيها الخلايا الميكروبية الفردية معزولة عن بعضها البعض. في ظل الظروف المناسبة (وسط المغذيات ، درجة الحرارة المثلى) ، يؤدي تكاثر الخلايا المعزولة إلى نسل النوع نفسه ، أي ثقافة نقية من هذا النوع من الميكروبات.

خلال فترة معينة (في أغلب الأحيان في يوم واحد) ، في تلك الأماكن من وسط غذائي كثيف توجد عليه خلايا معزولة ، يتم تكوين مجموعات من الجراثيم المضاعفة - ما يسمى مستعمرة، مرئية للعين المجردة. ولا تمثل تراكم الفوضى من البكتيريا، كما يمكن الحكم من حقيقة أن لأنواع عديدة من مستعمرات الجراثيم لديها بنية مميزة، حيث أنه من الممكن تحديد ما يقرب من النباتات من المواد واختيار تلك المستعمرات، التي تخضع لمزيد من الدراسة. Peresev هذه المستعمرات على وسط المغذيات المناسبة ومجموعة مختارة من الثقافة النقية.

إن عزل الثقافات النقية مع تحديدها لاحقاً له أهمية قصوى في تشخيص الأمراض المعدية ، وضمان الاعتراف السريع بها ، والعلاج والوقاية في الوقت المناسب. ليس أقل أهمية في تحديد النباتات الدقيقة في دراسة حالة النظافة الصحية للأجسام الموجودة في البيئة الخارجية (الهواء ، الماء ، التربة ، إلخ) ، وكذلك في أداء البحث العلمي.

في الوقت الحاضر ، هناك العديد من الطرق لعزل الثقافات النقية. يتم استخدام بعضها بطريقة محدودة ، والبعض الآخر يستخدم على نطاق واسع. الطرق الأكثر عالمية هي تلك الموصوفة أدناه لعزل الثقافات البحتة من البكتيريا (طريقة Drigalsky). في حين أن الكائنات الحية الدقيقة الأخرى - اللولبيات ، البروتوزوا - تتطلب استخدام طرق عزل خاصة أو لا يمكن تمييزها على الإطلاق عن وسائط المغذيات الاصطناعية (بعض أنواع البروتوزوا ، والريكتسيا ، والفيروسات).

تنقسم طرق عزل الثقافات النقية من الخلطات الميكروبية عادة إلى مجموعتين رئيسيتين: الطرق القائمة على مبدأ الفصل الميكانيكي للميكروبات في وسط المغذيات وطرق تعتمد على استخدام الخواص البيولوجية للميكروبات. تتضمن المجموعة الأولى طرق عزل الخلايا الفردية: 1) في عمق وسط المغذيات ؛ 2) على سطح الوسط و 3) تحت سيطرة العين. تستخدم المجموعة الثانية خصائص الميكروبات مثل قابليتها للتنقل وعلاقتها بالحرارة والأكسجين وخصائصها المسببة للأمراض.

تقنيات البذر وإعادة الزراعة

بذر  في الممارسة الميكروبيولوجية ، يسمى الإدخال في وسط المغذيات العقيمة لأي مادة اختبار للكشف عن الكائنات الحية الدقيقة.

البذر  هو نقل الكائنات الحية الدقيقة نمت إلى بيئة معقمة. تعد المحاصيل والميكروبات من أكثر التقنيات شيوعًا في الممارسة الميكروبيولوجية.

تتم عمليات الزرع بحيث لا تدخل الكائنات الحية الدقيقة الأجنبية إلى وسط المغذيات من الهواء أو من سطح الأشياء المحيطة. لهذا من الضروري أن نلاحظ بدقة الطرق التالية:

1) يتم إنتاج المحاصيل مباشرة بالقرب من الموقد المضاء ، في شعلة منها الحلقات المعقمة ، الملقط ، المقابس القطنية ، حواف الأنابيب ؛

2) يتم أخذ أنبوب واحد مع ثقافة يتم نقلها إلى اليد اليسرى ، أما الآخر (مع وسط مغذٍ معقم) فيتموضع في وضع مائل بين الإبهام والسبابة ؛

3) تعقد الحلقة في وضع رأسي فوق شعلة الموقد وتكشط الجزء المعدني الأحمر ، ثم تميل أفقياً وتعقم حامل الحلقة ؛

4) إزالة المقابس القطن والاحتفاظ بها مع البنصر والإصبع الصغير في اليد اليمنى. لا يوصى بوضع سدادات على طاولة أو على أي موضوع ؛

5) حرق حواف كل من الأنابيب.

6) عرض مع حلقة إلى ثقافة أنبوب اختبار وpassaged بعناية دون لمس الجدران من الحبرية القبض على السائل أو كمية صغيرة من لوحة على المدى المتوسط ​​الصلبة ونقلها، مع الحرص على عدم لمس الجدران من الأنبوب الثاني مع متوسط ​​obesplozhennoy المغذيات.

7) تتم إزالة حلقة ، يتم تشغيل حواف أنابيب الاختبار والأطراف الداخلية من المقابس. إذا كانت قابس القطن يضيء ، فإنه يغلق الأنبوب ، ويتم إخماد الطرف الخارجي باليد أو الملقط.

8) يتم حرق حلقة مرة أخرى في لهب ، ويرد نقش المقابلة على أنبوب الاختبار: اسم الثقافة وتاريخ البذر.

البذر في وسيلة سائلة  يمكن أن تنتج مع باستور أو ماصة تدريجي. عند استخدام ماصة باستور مع ملاقط محترقة ، يجب كسر نهاية مختومة وحرق ماصة كاملة طفيفة. يتم وضع الأنبوب مع الثقافة في اليد اليسرى ، ويتم وضع ماصة في اليمين بين الإبهام والإصبع الأوسط ، عقد الفتحة العلوية مع السبابة.

سحب سدادة القطن من أنبوب الاختبار ، يتم حرق حواف الأخير. انقل الماصة بعناية إلى أنبوب اختبار وأزل السبابة. ثم أغلق الفتحة العلوية للماصة بإصبع السبابة ، أزلها من أنبوب الاختبار. يتم حرق قابس الفلين وحواف الأنبوب قبل إغلاقه. يتم نقل مواد الاختبار إلى وسيط سائل. بعد التلقيح ، يتم وضع الماصات في محلول مطهر.

البذر في البيئات الكثيفة.  عند البذر على أجار منحرف ، وتطبيق السكتة الدماغية مستقيمة أو متعرج. للقيام بذلك ، يتم إدخال الحلقة مع المادة المراد زراعتها في الأنبوب حتى يتراكم ماء التكثيف في القاع ويتم تطبيق السكتة الدماغية بعناية ، دون تخفيف الأجار. يتم الحصول على البذر المستمر عن طريق نشر اللقاح على كامل سطح الأجار المائل.

على وسط كثيف في طبق بتري ، يتم إنتاج المحاصيل على النحو التالي. يتم ذوبان وسط المغذيات في أنابيب الاختبار في حمام ماء مغلي ، يبرد إلى 48-50 درجة مئوية وسكب بالتساوي مع ارتفاع 3-5 ملم إلى أطباق معقمة. يتم تجفيف المتوسطة المجمدة في حاضنة في أكواب مغلقة لمدة 20-30 دقيقة. يتم وضع الأكواب المفتوحة رأسًا على أرفف ترموستات ، مغطاة بورق معقم. بجانب الأكواب توضع الأغطية. عند التجفيف من سطح وسط المغذيات والسطح الداخلي للأطباق ، يتبخر ماء التكثيف. يتم البذر بواسطة حلقة في شكل ضربات متوازية أو ملعقة زجاجية.

عند تحديد نوع الميكروب وبالنسبة لزراعة اللاهوائيات البذور وخز  في عمود من الأجار أو الجيلاتين. للقيام بذلك ، يتم قلب الأنبوب رأساً على عقب ويخترق إبرة طويلة مستقيمة بمواد البذور العمود المتوسط ​​من الأعلى إلى الأسفل إلى الأسفل. ثم يتم إزالة الإبرة بعناية ويتم إغلاق الأنبوب مع قابس قطني محترق. إذا كانت هناك احتياطات خاصة مطلوبة ضد العدوى ، تزرع المحاصيل في خزانة خاصة لنقل الثقافات النقية. يتم وضع أنابيب البذور وأطباق بتري في ترموستات للزراعة.

لا يمكن أن تتحرك الكائنات الدقيقة والجراثيم ، الموجودة داخل وسط المغذيات أو على سطحها ، ولكن تبقى في المكان الذي كانت فيه في وقت التصلب. تبدأ كل خلية أو بوغ في التكاثر وفي أشكال 2-3 أيام مستعمرة -  عدد كبير من الخلايا من نفس النوع. إذا تم تشكيل المستعمرة من خلية واحدة ، فإنها ستكون ثقافة نقية للكائنات الحية الدقيقة التي نمت منها.

وينظر لأول مرة إلى المستعمرات التي نشأت بالعين المجردة ، ثم مع عدسة مكبرة أو تحت المجهر. تجدر الإشارة إلى أن المستعمرات تختلف في المظهر واللون والهيكل ، إلخ.

طريقة البحث البكتريولوجي. إن عزل العامل المسبب من الدم (الزراعة الكيمائية) هو طريقة مبكرة لتشخيص الأمراض. تظهر بكتيريا الدم في المرضى الذين يعانون من مرض التيفوئيد التيفوئيد في نهاية فترة الحضانة ولا تختفي خلال فترة الحمى بأكملها من المرض وخلال الانتكاسات. نتائج البحوث البكتريولوجية تعتمد إلى حد معين على توقيت أخذ المادة ومقدار الدم الذي يزرع. في وقت سابق تم زرع الدم من بداية المرض ، وزيادة احتمال الكشف عن الممرض. في الأسبوع الأول من التيفود ، يتم أخذ الدم من المريض من الوريد الزندي في كمية 10 مل ، في وقت لاحق وأثناء الانتكاسات - 20 مل.

في اليوم الأول من الدراسة يتم تلقيح الدم بنسبة 1:10 في واحد من وسائل الإعلام السائلة. يجب ملاحظة هذه النسبة بدقة ، حيث أنه مع تقليل تمييع الدم ، قد تموت الميكروبات بسبب عمل مبيد للجراثيم. للبذار هي 10٪ أو حل 20٪ من مرق الكوليك امتد 50-100 مل قارورة، اللحوم الببتون مرق تستكمل مع 1٪ الجلوكوز في الماء المقطر المعقم - بطريقة N. Klodnicki التي تحلل كرات الدم الحمراء، منتجات تحللها بمثابة وسيلة غذائية جيدة لانتشار البكتيريا. يمكنك أيضًا استخدام ماء الصنبور العقيم. يتم الحصول على أفضل النتائج عند زرع المواد على الحصوة. إذا كان من المستحيل لإنتاج الثقافات الدم في المكان، جنبا إلى جنب مع المصل أو تجلط الدم سيتراتي (تم صب 10 مل الدم في أنبوب اختبار مع 2 مل من 5٪ معقمة سيترات الصوديوم) يتم إرسالها إلى المختبر. يتم تجلط الدم في المختبر وزرعه في أحد وسائل الإعلام المدرجة. توضع القارورة في ترموستات عند درجة حرارة 37 درجة مئوية.

اليوم الثاني من الدراسة. بعد 14-24 ساعة من بداية الدراسة ، تزرع المادة في طبق بتري على وسط إندو أو متوسطة مع يوزين وميثيلين أزرق (وسط ليفين). لا ينصح به للبيئة زراعة Ploskireva كما وجدت العصي، التيفوئيد parathyphoid في الدم، هي نوع من السلطة تلزم paratrofami لا تغيير على الفور نوع من المواد الغذائية على metatrofny (أي المواد العضوية الميتة). لذلك ، في هذا المتوسط ​​يحتوي على الأملاح الأحماض الصفراويةالعصي من حمى التيفود تنمو بشكل سيء للغاية أو لا تنمو على الإطلاق. في غياب النمو البكتيري بعد الزراعة الأولى ، يتم إنتاج ما يلي بعد 48 ، 72 ساعة ، وفي اليوم الخامس والعاشر. إذا تعذر تحديد العامل الممرض ، يتم إعطاء إجابة سلبية. في حالة الشك ، فمن المستحسن دوريا - مرة واحدة في 3-4 أيام - لإنتاج المحاصيل حتى اليوم الرابع والعشرين من وقت أخذ المادة. لا تزال الإجابة سلبية في اليوم السابع.

اليوم الثالث من الدراسة. نمت على وسائل الإعلام إندو وليفين، مستعمرات "مشبوهة" (المستعمرات في المتوسط ​​إندو مسببات الأمراض عديم اللون) تم تحديدها، والتي 2-3 مستعمرة subcultured على الميول أجار والبيئة رسل.

اليوم الرابع من الدراسة. تأخذ في الاعتبار وتسجيل نتائج البذر على البيئة من راسل ، ودراسة الخصائص المورفولوجية من الثقافات المعزولة في لطخة ملطخة من غرام. تحديد التنقل - وجود أو عدم وجود سوطي - في قطرة معلقة أو مهروسة ، مأخوذة من ثقافة مرق 4-6 ساعات. للقيام بذلك ، يتم تلقيح ثقافة آغار (حلقة واحدة) في 1 مل من مرق دافئ قليلاً. ثقافة مختارة passaged (أنابيب 2-3) إلى همسة المتوسطة مع مانيتول، والسكروز وجهة نظر أجار، و 2 الأنابيب مع مرق اللحم الببتون، حيث يتم وضع أنبوب شريط من ورق الترشيح، غارقة مع حلول خاصة لتحديد كبريتيد الهيدروجين والإندول (تكشفت "موتلي سلسلة").

اليوم الخامس من الدراسة. سجل التغييرات على "سلسلة motley" المنشورة. في وجود تشكيل الغاز ، يتم إنشاء تفاعل تراص مع خليط من الأمصال السالمونيلا. في رد فعل ايجابي  يتم تنفيذ تفاعل تراص مع O- و H-sera ويتم إعطاء الجواب النهائي على أساس مجموع كل الصفات.

يتم عزل Myeloculture عن طريق بذر المدقق الذي تم الحصول عليه نخاع العظام  في 3-5 مل من الصفراء البقري معقمة أو في 25-30 مل من 10٪ مرق الكوليك، ووضعها في الحرارة وفي اليوم التالي وسيلة لإنتاج إندو البذر أو ويلسون - بلير. في المستقبل ، فإن مراحل البحث هي نفسها.

عزل البكتيريا من البراز. من 8 إلى 10 أيام من المرض ، في أكثر من الأسبوع الثالث ، في المرضى الذين يعانون من حمى التيفوئيد ، تفرز البكتيريا نظيرة التيفية مع البراز. لدراسة اتخاذ الأجزاء الأخيرة من قوام البراز السائل، ومستحلب في محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر (01:10) وترك لمدة 30 دقيقة قبل تسوية الجسيمات الخشنة. للبذر ، تؤخذ قطرة من المادة من سطح السائل.

في اليوم الأول من الدراسة ، تزرع المادة على وسائط التخصيب - مرق الصفراء ، وسط المغنيسيوم ، Mueller ، Kaufman - وتوضع في ترموستات. في اليوم الثاني من الدراسة مع إثراء البيئة جعل المحاصيل في أكواب مع وسائل الإعلام Ploskireva، إندو وليفين ويلسون - بلير (البزموت كبريتيت أجار). في وقت لاحق ، فإن مراحل الدراسة هي نفسها عند الإفراج عن الزراعة الكيمائية.

أفضل إجراء لعزل البكتيريا من مجموعة التيفوئيد - نظيرة التيفية من البول من الأسبوع الثالث الثاني من المرض. قبل أخذ المادة ، من الضروري غسل الفتحة الخارجية للإحليل بمحلول كلوريد الصوديوم المتساوي التوتر ؛ في النساء فمن الأفضل أن تأخذ البول عن طريق القسطرة. للدراسة تأخذ 20-30 مل من البول. بعد الطرد المركزي ، يتم تطعيم الحبيبة في 2 كوب مع أجار Ploskirev المتوسطة أو البزموت-كبريت. يزرع المادة الطافية على وسط التخصيب (10٪ مرق الصفراء) وتوضع في ترموستات لمدة 24 ساعة ، وبعد ذلك يتم زرعها في 2 كوب من أحد الوسائط الاختيارية. يتم تحديد المستعمرات المعزولة بالطريقة المعتادة.

دراسة محتويات الاثني عشر هي الصفراء. وغالبا ما تستخدم هذه الطريقة في مرحلة إعادة التشكيل. يتم جمع الصفراء أثناء الفحص في أنابيب اختبار معقمة. محتويات الاثني عشر تلقيح في قوارير مع 50 مل من مرق، والباقي من المواد جنبا إلى جنب مع المحاصيل وضعها في حاضنة عند 37 درجة مئوية في اليوم التالي، وجعل 2 كوب بذر مع متوسط ​​التفاضلية الصلبة. يتم تحديد المستعمرات المعزولة من خلال الإجراء الموصوف.

حساسة للغاية واعدة في التشخيص المبكر للالتيفوئيد ونظيرة التيفية هي طريقة المناعي الذي فحص الدم من الأيام الأولى من المرض، البراز من اليوم 10TH، محتويات الاثني عشر يوم 10th من درجة حرارة الجسم العادية. يتم وصف المصل الفلوري النوعي مع بكتريا التيفوئيد التيفية ، والتي يتم تحديدها فيما بعد بواسطة الفحص المجهري الانسيابي. طريقة تسمح لتشخيص المرض 10-12 ساعة من بداية الدراسة.

التشخيص المصلية لأمراض التيفوئيد التيفية. منذ الأسبوع الثاني من المرض ، ظهرت أجسام مضادة محددة في دم المرضى ، والتي يمكن تحديدها باستخدام تفاعل فيدال. في حمى التيفوئيد  و paratyphs تتراكم O- ، ومن ثم H-agglutinins. في بعض الأحيان يتم العثور على مركبات الجلوتاوتين في أثناء المرض ، ولكن هذا الأخير ، على النقيض من الألم ، ليس لها أهمية التشخيص. تقرير في دم المرضى الذين يعانون من الملزن محددة إلى التيفوئيد الممرض ونظيرة التيفية (رد فعل فيدال) قد تساعد في تحديد التشخيص في الفترة الحادة من المرض وخلال فترة النقاهة.

مع ردة فعل داء السالمونيلس فيدال هو طريقة تشخيص مساعدة. يجب أن نتذكر أنه في كثير من الأحيان هناك أشكال من المرض مع استجابة مناعية معبر عنها بشكل معتدل. في كثير من الأحيان ، لوحظ انخفاض مستويات التلكتولين من الغلوتامين ، حتى في غيابها ، في المرضى الذين عولجوا بالمضادات الحيوية.

لتفاعل Vidal ، خذ 1-3 مل من الدم من الإصبع أو الوريد الزندي إلى أنبوب معقم. من أجل تسريع تخثر الدم ، يتم وضعه في ترموستات لمدة 30 دقيقة. يتم تدوير الدماء الكروية في ماصة زجاجية وتوضع في الثلاجة حتى يتم إنتاج مصل اللبن المستقر. تستخدم الجلطة للبذر (زراعة الخلايا). يتم تعيين تفاعل تراص مع التشخيص H- و O- التيفوئيد ، A- و B- نظيرة التيفية. يتم تخفيف المصل ، بدءا من عيار 1: 100 إلى 1: 800 ، وفقا للإجراء التالي. 9.9 مل من محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر العقيم ويتم صب 0.1 مل من مصل الاختبار في الأنبوب - يتم الحصول على تخفيف 1: 100. أنابيب الاختبار 4 (عدد مستضدات المستخدمة في رد فعل فيدال) واحد يخدم السيطرة مصل، والاستغناء عن 5 مل من المصل المخفف إلى 1 مل. من ما تبقى من 5 مل من الدم (التخفيف 1: 100) وسكب 1 مل، وأضاف إلى 4 مل من محلول كلوريد الصوديوم 4 مل متساوي التوتر لإعطاء التخفيف من 1: 200. يسكب 200 أيضا إلى 4 أنابيب من 1 مل، والباقي 4 مل من المضافة حديثا 4 مل من محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر للحصول على التخفيف من 1: 4 مل من التخفيف من 1 400. يتم تنفيذ التخفيفات اللاحقة (1: 800 ، 1: 1600) كما هو موضح. في 4 أنابيب ، والتي هي السيطرة على مستضد ، يسكب 1 مل محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر. في جميع أنابيب الاختبار ، باستثناء تلك التي تخدم كمراقبة المصل ، صب في 1-2 قطرات من التشخيصات المقابلة. واهتزت أنابيب ترايبود ووضعها في الحرارة عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة H تراص (krupnohlopchataya) يحدث بعد 2 ساعة، عن تراص (الحبيبات) - إلى حد كبير في وقت لاحق. شدة رد الفعل بعد 24 ساعة تحتفل عيار التشخيص فيدال رد فعل في التخفيف من 1 :. 200 على الأقل في وجود المظاهر السريرية.

لاحظ أن هذا رد فعل قد تكون إيجابية في غيرها من الأمراض - مرض السل، والملاريا، الحمى المالطية، والأورام الخبيثة وبعض الدول (الحمل). يمكن أن يكون رد فعل Vيدال إيجابيا في الأفراد الأصحاء (رد فعل الأسرة) ، في التطعيم والماضي في الماضي (رد الفعل الأمني). لتعزيز خصوصية رد فعل فيدال فيشر اقترح المخفف محلول كلوريد الصوديوم مفرط التوتر في الدم (2.9 و 5.8٪). هذا يؤدي إلى إضعاف أو القضاء على ردود الفعل الجماعية. قيمة الزيادات رد فعل تراص مع الدراسات المتكررة، عندما تضع ديناميات المرض الزيادة في عيار الأضداد. في نظيرة التيفية A رد فعل فيدال يمكن أن تكون سلبية أو عيار الأجسام المضادة المحددة  أقل مجموعة.

في السنوات الأخيرة ، من أجل الاعتراف مجموعة معوية  وتستخدم على نطاق واسع من الأمراض التراص الدموي السلبي (RPGA) مع مستضدات جزئية من البكتيريا التيفية. يتميز RPGA بالحساسية العالية والنوعية ، وهو إيجابي من اليوم الخامس للمرض. الحد الأدنى من التشخيص في المرضى الذين يعانون من التيفوئيد ، نظيرة التيفية ، السالمونيلا والمستضد O هو 1: 200. يتم تعيين رد فعل في ديناميات لتحديد نمو عيار الأجسام المضادة.

طرق التشخيص المختبري  bacteriocarrier في حمى التيفوئيد ونظيرة التيفية. يتم إجراء الفحص البكتريولوجي للبراز والبول والمكونات الاثني عشر وفقا للأساليب المقبولة عموما. يتم الحصول على أفضل النتائج عند استخدام وسائط selenite.

فيما يتعلق بتواتر عزل البكتيريا ، فإنه من المستحيل غالباً زرع العصب الممرض. في الغالبية العظمى من حاملي العصي التيفية ، تم العثور على ميكروبات تحتوي على مستضد Vi ، وبالتالي تظهر الأجسام المضادة Vi في دم الناقلات الحادة والمزمنة (في دم المرضى هم أقل تواترا). العيار التشخيصي للتفاعل هو 1:20 وأعلى. بالتوازي مع تفاعل Vi-agglutination (مع المصل الساخن) ، يتم وضع تفاعل Vidal (مع المصل الأصلي) مع تشخيص H- و O-typhoid. في مصل البكتيريا التيفية ، تحدث الأجسام المضادة H في عيار من 1: 200 إلى 1: 800 في 60-80 ٪ من الحالات. إن وجود مزيج من الأجسام المضادة لـ H و VI له أهمية تشخيصية خاصة في الكشف عن ناقلات قضبان التيفوئيد.

من أساليب البحث الإضافية للكشف عن الناقل من العصي من حمى التيفوئيد ، يتم استخدام اختبار حساسية الجلد مع typhin ، وكذلك RPGA مع مستضد Vi.

وبالتالي ، فإن أحد الشروط المهمة لنجاح مكافحة أمراض التيفوئيد التيفوئيد هو الكشف المبكر والتكامل لمصدر العدوى. في الوقت الحاضر ، تحدث حمى التيفوئيد بشكل متقطع. وفي نفس الوقت ، يكون مسار المرض أقل إطالة ولا يصاحبه نموذجي للأشكال الكلاسيكية للأعراض ، مما يجعل من الصعب التعرف عليه سريريًا.

فيما يتعلق بما سبق ، يصبح الفحص المختبري الشامل مهمًا.

واحدة من الأساليب الأكثر موثوقية للبحث ، والتي تتم في مختبرات المستشفيات والعيادات المتعددة هي البكتريولوجية. هذا تحليل معقد نوعًا ما ، ولكنه مهم جدًا ، حيث يمكن للعلماء أن يقولوا بالضبط أي مسببات المرض تسببت بالضيق.

يجتمع معظم الأفراد البسطاء بمفهوم مثل bak-sow. في الواقع ، إنها مجرد أحد مكونات الطريقة البكتريولوجية.

الطريقة البكتريولوجية  البحث هو أخذ مادة بيولوجية من شخص من أجل دراستها ، وسيتم فحص المادة لوجود بعض البكتيريا فيها. ولهذا الغرض ، سيتم وضع محتويات أنابيب الاختبار التي تم جمعها في وسائط خاصة يتم فيها "زرع" البكتيريا. وبواسطة تلك التي يوجد فيها نمو وتكاثر ، وسيتم تحديد مصدر العدوى.

هذا النوع من الأبحاث شائع في مجال الأمراض المعدية ، عندما يكون من الضروري معرفة العامل المسبب لاختيار العلاج المناسب ، لأن بعض البكتيريا مقاومة حتى لأقوى المضادات الحيوية من مجموعة واسعة من الإجراءات.

بالإضافة إلى ذلك ، يستخدم هذا النوع من الأبحاث في العديد من عمليات التفتيش الصحية والوبائية في مؤسسات تقديم الطعام العامة من أجل منع انتشار المرض.

حتى الآن ، تُستخدم الطريقة البكتريولوجية ، أو كما يسهل قولها ، البقشيش ، وغالباً ما تكون المهمة الرئيسية للمتخصص هي أخذ مادة الشخص قبل أن يبدأ في تنفيذ العلاج المضاد للميكروبات.

علم الأحياء الدقيقة هو واحد من تلك العلوم الدقيقة التي لا تتسامح مع الأخطاء. هذا هو السبب في أنه ليس من السهل أن تصبح عالما ميكروبيولوجيا. الحاجة إلى الاجتهاد والإدراك ، فضلا عن قوة الإرادة ، لأنه في الغالب يستغرق الأمر عدة أشهر للحصول على نفس المادة للحصول على بعض النتائج على الأقل.

إن الطريقة البكتريولوجية للبحث في علم الأحياء المجهرية مهمة لأنها تسمح لك بدراسة البكتيريا ، ومراقبتها في بيئة مواتية لها ، وأيضاً لدراسة التفاعل تجاه دواء معين.

بالإضافة إلى ذلك ، بفضل دراسة البكتيريا حتى الآن ، أصبح من الممكن تحديد أي العوامل المسببة يسبب المرض ، وإنقاذ العديد من الأرواح. لهذا السبب تأخذ هذه الطريقة مكانًا مهمًا في علم الأحياء المجهرية.

مجموعة من المواد للتحليل

من أجل الحصول على النتائج الأكثر موثوقية ، يجب أن يلتزم عامل المختبر أو الممرض بجميع الإجراءات الصحية وكذلك تعقيم الأداة بشكل جيد. وفقط بعد ذلك يمكنك أخذ عينات.

في أغلب الأحيان يأخذ الشخص مواد للبحث البكتريولوجي:

1. كال. عادة ما يوصف مثل هذا التحليل إذا كان الشخص لديه كل أعراض العدوى المعوية. من الضروري القيام بذلك ، لأن جميع البكتريا التي تدخل الجسم لها تأثير مدمر ، وليس كل مضاد حيوي يمكن أن يؤثر بشكل إيجابي على جميع أنواع مسببات الأمراض.
2. المخاط من البلعوم الأنفي والحلق. في معظم الأحيان، يتم أخذ اختبارات البلعوم والحنجرة في حالة التهاب الحلق المتكرر، وكذلك فترة طويلة تشدق البارد، لأنه في معظم الحالات، وإذا حدث ذلك، ثم الممرض هو أشد وطأة من الأطباء المتوقع للحصول على نتائج.
3. البلغم من الشعب الهوائية الخاصة بهم. إذا كان الشخص مصابًا بالتهاب رئوي ، فسيتم توجيهه بدقة لإيصال هذا التحليل.
4. البول. البول في المريض للبكتيريا في حالة الاشتباه في العدوى في الجهاز البولي التناسلي.
5. السائل النخاعي. في بعض الأحيان المرضى الذين يأتون إلى المستشفى مع شلل في أطرافه، ولكن لا أعراض أمراض أخرى أنه لا، هذا هو، ونشاط الدماغ على ما يرام، مع الموصلية الأعصاب أيضا. هنا يمكن تغطية السبب في اختراق العدوى في الحبل الشوكي. هو الشاعر ، من أجل معرفة السبب في أقرب وقت ممكن ، فمن الضروري أن تأخذ البذر.
6. محتويات بؤر الالتهاب.
7. محتويات الكيس.

يمكن تعلم المزيد من المعلومات حول تحليل "الزراعة على النباتات" من الفيديو.

إنه بفضل هذه المواد من جسم الإنسان ذلك بحث دقيق  وتحديد المشكلة. صحيح ، على الرغم من الإنجازات العديدة في علم الأحياء الدقيقة ، فإن الثقافة البكتريولوجية لا تتم بسرعة.

توقيت النتائج

على الرغم من حقيقة أن جميع المتخصصين ترغب في الحصول على الاختبارات في أقرب وقت ممكن، وغالبا ما لم يكن لديك الوقت لمجرد الجلوس والانتظار، وهناك بعض الحدود الزمنية وبعد ذلك يمكنك الحصول على نتائج الدراسة.

في علم الأحياء المجهرية ، هناك إطارات زمنية واضحة تبدو كالتالي:

• إذا تم أخذ البراز للتحليل ، يمكن الحصول على النتيجة بعد خمسة أيام. في أسوأ الحالات ، يمكن أن يستغرق الأمر ما يصل إلى أسبوع. لكن بالفعل في اليوم الخامس يمكن للأطباء أن يدوروا حول الممرض.
• إذا تم أخذ التحاليل من البلعوم الأنفي ، فبعد ستة أيام في المتوسط ​​ستكون النتائج جاهزة.
• إذا تم إجراء التحليل ، فسيتعين الانتظار عشرة أيام ، لأن التحليل كبير للغاية ويستغرق وقتًا أطول لإجراء ذلك.
• إذا كان من الضروري توضيح النباتات في الجسم ، فإنه سيتعين الانتظار لمدة أربعة إلى سبعة أيام ، وهذا يتوقف على كيفية ظهور البكتيريا نفسها.
• إذا تم إجراء تحليل للقناة البولي التناسلي ، فإن النتائج الدقيقة ستكون جاهزة في غضون أسبوع ، أي 7 أيام.

في هذه الحالة، إذا ما اتخذت الاختبارات من المريض الذي هو في المستشفى، ويمكن أن طبيبه نرى بالفعل نتائج حول اليوم الرابع أو الخامس، حيث يقع معظم المختبر مباشرة في المستشفى.

ولكن إذا تم إجراء الاختبارات في عيادة البلدية البسيطة ، فأنت بحاجة إلى الاستعداد للتأخير. من أجل الحصول على نتائج في أقرب وقت ممكن ، وأنها موثوقة قدر الإمكان ، سيكون من الأفضل الاتصال بأحد المختبرات في المدينة مباشرة. كل واحد منهم يقدم الخدمات على أساس الرسوم.

مثل أي دراسة أخرى ، تتضمن الطريقة البكتريولوجية عدة مراحل ، كل منها لا يقل أهمية عن السابق.

المرحلة الأولى تشمل:

1. التحضير. من الضروري أخذ مادة الاختبار بشكل صحيح ، وإحضارها إلى المختبر ، ومعالجتها إذا لزم الأمر.
2. تخصيب اليورانيوم. يتم تنفيذ هذا الإجراء فقط إذا كانت كمية البكتيريا في المادة التي تم الحصول عليها غير كافية. غالبا ما يحدث مع الدم. في هذه الحالة ، يتم وضع جزء من الدم في مكان دافئ في درجة حرارة تدفع البكتيريا إلى التكاثر.
3. المجهر. بعد تنفيذ جميع الإجراءات المذكورة أعلاه ، من الضروري فحص المادة تحت المجهر من أجل تحديد الميكروفلورا ، والكمية ، وكذلك الخصائص الأساسية.
4. خلق المستعمرات. بعد اكتشاف ميكروفلورا مختلفة تحت المجهر ، تم فصل كل منها ووضعه في وعاء خاص.

المرحلة الثانية تشمل:

1. دراسة خصائص المستعمرات. يشمل هذا الإجراء دراسة سلوك البكتيريا ، ومدى سرعة تضاعفها ، وكيفية تكيفها ، وما إلى ذلك. في حال تم تشكيل عدة أشخاص آخرين في مستعمرة واحدة ، فمن الضروري دراسة خصائص كل منها.
2. ثقافة نقية. هنا ، يتم وضع كل مستعمرة في حاوية مخصصة لمراقبة ما يحدث بعد ذلك.

المرحلة الثالثة تشمل:

1. قياس مستوى النمو ونقاء الثقافة. واستناداً إلى سرعة حدوث التكاثر ، وكذلك ما إذا كانت هناك ثقافات أخرى قد نشأت عن ذلك ، يمكن تحديد عائلة من البكتيريا. لذلك ، من خلال لون الحل ، يمكن للعلماء أن يقولوا بدقة كيف أن البكتيريا لها تأثيرات مدمرة في الجسم.
2. تحقق من المضادات الحيوية. بعد أن تمكن الخبير من تحديد نوع الثقافة بدقة ، يجب عليه اختبارها لرد فعل لبعض المضادات الحيوية.

إن طريقة البحث البكتريولوجية عملية معقدة نوعًا ما تتطلب التركيز والصبر. لهذا السبب لا يريد جميع الناس الذين يتلقون التعليم الطبي أن يصبحوا علماء أحياء مجهرية.

وجدت خطأ؟ حدده واضغط Ctrl + Enterلإعلامنا.

تتكون الطريقة البكتريولوجية في عزل الثقافة النقية للممرض (مجموعة سكانية تحتوي على بكتيريا من نفس النوع) وتحديد هذا الممرض هو الطريقة الرئيسية البحث البكتريولوجي

ويطلق على دراسة خصائص الكائنات الحية الدقيقة في المختبر الجرثومي بهدف إنشاء عضوية في مجموعة منهجية معينة (الأنواع ، جنس) تحديد هويتهم.

بشكل عام ، الطريقة البكتريولوجية للتحقيق هي دراسة بكتريولوجية متعددة المراحل ، تستمر من 18 إلى 24 ساعة.

الطريقة البكتريولوجية - كيف تنفق؟

مع طريقة البكتريولوجية ، يتم وضع المحاصيل اللاهوائية في anaerostat. من البالون ، يتم إزالة الهواء واستبداله بمزيج غاز لا يحتوي على أكسجين.

أساس الطريقة البكتريولوجية هو عزل الثقافة النقية للممرض ، الذي يحدث في المرحلة الأولى من الدراسة. لعزل الثقافة النقية من الممرض ، ويتم زرع المادة. يتم زرع ، كقاعدة عامة ، على وسائل المغذيات الكثيفة ، والتي يتم اختيارها على أساس خصائص الممرض المحتملين.

طريقة الجرثومية التي تستخدمها وسيلة ممكنة، التي تنمو فقط على أنواع معينة من البكتيريا - متوسطة انتخابي أو وسائل الإعلام تهدف إلى تمييزها عن العوامل المسببة للأمراض الجرثومية أو غيرها من مختلف التفاضلية المتوسطة التشخيص.

على سبيل المثال ، مع التشخيص البكتريولوجي الالتهابات المعوية  - بيئة إندو ، لتخصيص قضيب الدفتيريا استخدام وسائل الإعلام tellurite ، وما إلى ذلك عند اختيار الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض مشروطة  مع الطريقة البكتريولوجية ، يتم زرع المواد المأخوذة على وسائط المغذيات العالمية. مثال على مثل هذه البيئة يمكن أن يكون بمثابة أجار الدم.

تتم جميع التلاعبات المرتبطة بعزل الثقافات البكتيرية على شعلة الموقد.

طريقة البكتريولوجي المواد البذر لإنتاج المواد الغذائية المتوسطة إما الزجاج أو ملعقة معدنية أو حلقة البكتيرية وذلك لتمكين البكتيريا في المواد لتبديد على سطح المتوسط ​​المغذيات. نتيجة لهذا التبديد ، تدخل كل خلية بكتيرية منطقتها الخاصة من الوسيلة.

عند العزل من مادة مرضية ، غالباً ما تستخدم الثقافة النقية للممرض ، الملوث جوهريًا بالميكروفلوراً الغريبة ، الطريقة البيولوجية لعزل الثقافة النقية. يفعلون ذلك بالطريقة التالية: فهم يصيبون حيوانات معملية حساسة للممرض باستخدام مادة الاختبار. مثال آخر على الطريقة البيولوجية هو أنه عندما يتم فحص المريض من أجل البلغم المحتوي على المكورات الرئوية ، يتم حقن المادة داخل البريتون في الفئران البيضاء. من دمائهم في 4-6 ساعات يحصلون على ثقافة نقية من المكورات الرئوية.

في هذه الحالة، وإذا افترضنا نتيجة لطريقة البحث البكتريولوجي في المحتوى المادي للكمية صغيرة من وكيل وزرع البذور تنتج المتوسطة السائل إلى تراكمه، ما يسمى المتوسطة تخصيب اليورانيوم الذي هو الأمثل لالكائنات الحية الدقيقة. علاوة على ذلك ، يتم تنفيذ ذلك عن طريق استبدال وسط سائل مغذي على وسائط كثيفة تنتشر في أطباق بتري. يتم وضع البذور المتوسطة مع الممرض في ترموستات ، عادة عند درجة حرارة معينة ، وهو أمر مهم للطريقة البكتريولوجية.

في المرحلة الثانية من طريقة التحري البكتريولوجية ، تم إجراء دراسة على مستعمرات البكتيريا التي تنمو على وسط مغذٍ كثيف والتي تنشأ من خلية بكتيرية واحدة. (المستعمرة ثقافة نقية للممرض). إنتاج مجهرية و الفحص العياني  المستعمرات في الضوء المنعكس والناقل: بالعين المجردة ، تحت تكبير صغير للمجهر ، باستخدام عدسة مكبرة.

ضع علامة على الخصائص الثقافية للمستعمرات: شكلها وحجمها ولونها وطبيعة الحواف والأسطح والبنية والاتساق. المقبل ، لإعداد مسحات ، استخدم جزء من كل من المستعمرات المخططة. تم تلطيخ البقع الغامضة والمجهرية وتحديد التينكترال (المواقف للون) والخصائص المورفولوجية للثقافة المختارة والتحقق من نقائها في وقت واحد.

الجزء المتبقي من مستعمرة subcultured في أنابيب مع الأمثل لهذا النوع من المتوسطة، مثل الميل أجار، لغرض تراكم في ثقافة نقية لأكثر اكتمالا دراستها. يتم نقل الأنابيب لمدة 18-24 ساعة في منظم الحرارة. في المرحلة الثانية ، بالإضافة إلى الدراسات المذكورة ، غالباً ما يتم حساب عدد المستعمرات المزروعة.

هذا أمر ذو أهمية خاصة في الأمراض التي تسببها الكائنات الحية الدقيقة الانتهازية. في هذه الأمراض الدور القيادي للقاضي أي الممرض لا يجوز إلا على محتواه في المواد المرضية بكميات كافية وغلبة العوامل المسببة للأمراض على النباتات الأخرى.

من أجل إجراء مثل هذا التحقيق اتخذت التخفيفات المسلسل مستعدة لاختبار المواد، منها الكؤوس مع المغذيات المنتجات البذر المتوسط، حساب عدد من المستعمرات، مضروبا في التخفيف منها تحديد محتوى الكائنات الحية الدقيقة في هذه المادة.

تحديد الثقافة النقية المعزولة للممرض والعزم على هذه الثقافة من الحساسية للمضادات الحيوية وأدوية العلاج الكيميائي الأخرى هي المرحلة الثالثة من الطريقة البكتريولوجية. يتم إجراء تحديد للثقافة البكتيرية المعزولة عن طريق الخصائص tintorial ، المورفولوجية ، البيوكيميائية ، الثقافية ، toxigenic ، مستضدات.

بادئ ذي بدء ، تأخذ اللطخة من ثقافة نمت على أجار المنحدر ، وفحص مورفولوجيا البكتيريا والتحقق من نقاء ثقافة البكتيريا التي نمت. ثم ، يتم زرع ثقافة نقية معزولة من البكتيريا لوسائل الإعلام من غيس. من المستحسن زرع وغيرها من وسائل الإعلام لتحديد الخصائص البيوكيميائية.

خصائص الأنزيمية أو البيوكيميائية التي تسببها الانزيمات البكتيرية التي تشارك في انهيار البروتينات، الكربوهيدرات، مما تسبب في الحد من أكسدة من مختلف ركائز.

وعلاوة على ذلك ، فإن كل نوع من الأنواع البكتيرية ينتج مجموعة ثابتة من الإنزيمات. في معظم الأحيان في دراسة خصائص antigenic ، يتم استخدام تفاعل تراص على الزجاج.

بواسطة تحييد السموم ، يتم تحديد الترياق في الجسم الحي أو في المختبر بواسطة تشكيل السموم من الميكروبات. في بعض الحالات ، يتم دراسة عوامل أخرى من الفوعة. يمكن للدراسات المذكورة أعلاه ، والتي تتم في المختبر البكتريولوجي ، تحديد جنس أو نوع الممرض.

بما في ذلك للكشف عن مصدر العدوى ، من أجل تحديد سلسلة الوباء من المرض ، إجراء تحديد intraspecific من البكتيريا. يكمن جوهر التحديد البينغيري للبكتيريا في تعريف نوع اللفظ أو العاث ، ودراسة الخصائص المختلفة للبكتيريا المستضدية المعزولة. تسمى عملية تحديد نوع الملصق "كتابة فج". يتم تنفيذ Fagotyping مع حمى التيفوئيد ، عدوى العنقوديات ، نظيرة نظيرة B.

في وعاء مع وسط غذائي ، يزرع مع ملعقة معزولة بالثقافة النقية ، يتم تطبيق العشرات التشخيصية المختلفة بشكل تدريجي. في حال كانت الثقافة حساسة لهذه الظاهرة ، نتيجة البحث البكتريولوجي ، هناك ما يسمى بالمستعمرات السالبة (لويحات) التي تشبه تشكيلات مستديرة لمواقع البكتيريا المدمرة. يمكن أن تكون ثقافة المُمْرِض حساسة للعديد من أوومعة واحدة.

نظرا لانتشار واسعة من أشكال المقاومة للعقاقير من البكتيريا، لتعيين العلاج الكيميائي العقلاني هو ضروري لتحديد antibiotikogrammy - المقاومة أو الحساسية للأدوية العلاج الكيميائي معزولة ثقافة نقية من مسببات المرض. بالنسبة إلى المضادات الحيوية ، استخدم إما طريقة الأقراص الورقية ، أو الطريقة الأكثر دقًا ، ولكنها مرهقة للتخفيفات المتسلسلة.

تعتمد طريقة الأقراص الورقية على الكشف عن منطقة تثبيط تكاثر البكتيريا حول الأقراص المشربة بالمضادات الحيوية. في حالة طريقة التخفيف المتسلسل ، يتم تخفيف التحضير الكيميائي ، مضاد حيوي مع وسيط مغذ سائل ، في أنابيب الاختبار ، وبعد ذلك يزرع عدد مماثل من البكتيريا في أنابيب الاختبار. بسبب غياب أو وجود نمو بكتيري ، يتم تسجيل النتائج. وكنتيجة للطريقة الجرثومية للتحري لتحديد هوية السلالات ، يمكن للمضاد الحيوي الذي يتم الحصول عليه أن يخدم أغراض وبائية.

يمكن إجراء دراسات متكررة في الكشف عن البكتيريا العصبية لأنه من الممكن عدم الكشف عن العامل الممرض في جزء واحد من المادة.

في الوقت الحاضر ، في العالم الحديث ، هناك طرق متسارعة لتحديد الأنواع و جنس البكتيريا. لذلك ، في روسيا ، يتم استخدام نظام من أوراق المؤشرات - بنك الاستثمار القومي ، والذي يسمح 6-12 ساعة وبدون استخدام عدد كبير من وسائل الإعلام لعزل ثقافة البكتيرية النقية. أيضا على نطاق واسع طريقة immunofluorescent للتشخيص السريع للأمراض المعدية (انظر الدراسات المصلية).

إن تطبيق الطريقة البكتريولوجية يجعل من الممكن عزل العامل الممرض في الثقافة النقية من المادة التي يتم الحصول عليها من المريض والتعرف عليها على أساس دراسة مجمع الخصائص. معظم البكتيريا قادرة على الزراعة على العديد من المواد المغذية الصناعية (باستثناء الكلاميديا ​​والريكتسيا) ، وبالتالي فإن الطريقة البكتريولوجية مهمة في تشخيص العديد من الأمراض المعدية.

في حالة الحصول على نتيجة إيجابية ، فإن الطريقة البكتريولوجية تجعل من الممكن تحديد حساسية الممرض المعزول للأدوية المضادة للميكروبات. ومع ذلك ، فإن فعالية هذه الدراسة تعتمد على العديد من المعالم ، على وجه الخصوص شروط جمع المواد  وله نقل  في المختبر.

K المتطلبات الأساسية، المطلوبة لاختيار ونقل المواد للبحث البكتريولوجي ، وتشمل:

• أخذ المادة قبل العلاج المضاد
• الامتثال لشروط العقم في جمع المواد ؛
• الصلابة الفنية لجمع المواد ؛
• كمية كافية من المواد ؛
• الحفاظ على نمط درجة حرارة التخزين ونقل المواد ؛
• الحد إلى فترة زمنية قصيرة بين جمع المواد والبذر على وسائط المغذيات الكثيفة.

يجب أن يتم نقل المواد إلى المختبر في أقرب وقت ممكن ، ولكن ليس أكثر من 1-2 ساعة بعد أخذها. يجب أن تكون العينات المادية في نظام درجة حرارة معين ؛ على وجه الخصوص ، يتم تخزين المواد العادية العقيمة (الدم ، السائل النخاعي) وتسليمها إلى المختبر عند 37 درجة مئوية. يتم تخزين المواد غير المعقمة (البول ، فصل مجرى الهواء ، الخ) في درجة حرارة الغرفة لا تزيد عن 1-2 ساعة أو ما لا يزيد عن 24 ساعة عند 4 درجة مئوية (ظروف الثلاجة المنزلية). إذا لم يكن من الممكن تسليم العينات إلى المختبر ضمن إطار زمني محدد ، فمن المستحسن استخدام وسائط النقل المصممة للحفاظ على سلامة مسببات الأمراض في ظل ظروف الحفظ.

الدم للبحوثيجب أن تؤخذ من المريض أثناء ارتفاع درجة حرارة الجسم ، في بداية الحمى. يُنصح بالتحقيق في 3-4 عينات دم مأخوذة في فترة 4-6 ساعات ، والتي يمكن تبريرها من وجهة نظر تقلل من خطر حدوث "جرثومة" عابرة في تجرثم الدم وزيادة القدرة على تأكيد الدور المسبب للعيان المعزول عن الدم microflora المسببة للأمراض مشروطةإذا وجدت هذه البكتيريا في عدة عينات من الدم الوريدي. تزرع عينة من الدم في كمية 10 مل في البالغين و 5 مل في الأطفال على الأقل في قنينتين مع المتوسطة للكائنات الدقيقة الهوائية واللاهوائية في نسبة 1:10. من المستحسن أن يكون فحص واحد من الدم الشرياني.

مع الأخذ السائل الدماغي الشوكي يتم تنفيذ (CSF) من قبل الطبيب مع ثقب في حجم كمية من 1-2 مل في أنبوب عقيمة جافة. يتم تسليم العينة على الفور إلى المختبر ، حيث يتم البدء في التحقيق على الفور. إذا لم يكن ذلك ممكنًا ، يتم تخزين المادة عند 37 درجة مئوية لعدة ساعات. يزيد بشكل كبير من عدد نتائج ايجابية  الدراسة البكتيرية ، بقطرة 1-2 من CSF في أنبوب يحتوي على وسط شبه سائل مع الجلوكوز ، وفي طبق بتري بآجر "الدم". لنقل المواد يتم استخدام صناديق متساوية أو منصات تدفئة أو ترمس أو أي عبوة أخرى حيث يتم الحفاظ على درجة الحرارة عند حوالي 37 درجة مئوية.

برازللاختيار البكتريولوجي يتم اختياره باستخدام ملاعق خشبية معقمة بحجم 3-5 جم في وعاء معقم بغطاء محكم. يجب أن يبدأ التحقيق في المواد التي اتخذت في موعد لا يتجاوز 2 ساعة. إذا كان من المستحيل للشروع في دراسة خلال هذا الوقت، لا بد من تحديد كمية صغيرة من المواد التي يتم وضعها في وسيلة النقل المناسبة. في اختيار البراز يجب أن نسعى جاهدين لتوجيه الشوائب المرضية دراسة (المخاط، والقيح، والجزيئات الأخرى ظهارة.)، إن وجدت، وتجنب الاتصال مع المواد النجاسة الدم لديه خصائص مضادة للجراثيم.

لاتخاذ المواد ، ويمكن استخدام حفائظ المستقيم (مع طرف القطن). يجب ترطيب الحشا بمحلول متساوي التوتر معقم لكلوريد الصوديوم أو وسيط نقل (ولكن ليس هلام هلامي). يتم حقنه في المستقيم على عمق 5-6 سم ، وتحويل المسحة ، وإزالتها بعناية ، والتحكم في المظهر على حشوة اللطخة البراز. يتم وضع السدادة في أنبوب اختبار جاف إذا تم فحص المادة لمدة ساعتين ، وإلا يتم نقلها.

بوليتم جمع (جزء متوسط ​​من البول الإفراج بحرية) في كمية 3-5 مل في أطباق معقمة بعد مرحاض دقيق للأعضاء التناسلية الخارجية. من المفضل أن تختار أجزاء الصباح  البول.

النكدجمع خلال السبر الاثني عشر في غرفة العلاج بشكل منفصل للأجزاء A و B و C في ثلاثة أنابيب اختبار معقمة ، مع مراعاة قواعد العقيم.

ماء غسيل المعدة  جمع في علب معقمة في كمية من 20-50 مل. وينبغي أن يوضع في الاعتبار أن غسل المعدة في هذه الحالات نفذت فقط غير مبال (عدم امتلاك تأثير جراثيم أو جراثيم على الكائنات الحية الدقيقة) حلول - أفضل الماء المغلي (بدون إضافة الصودا، برمنجنات البوتاسيوم، الخ).

نخامة. يتم جمع نخامة الصباح ، والتي يتم إصدارها أثناء نوبة من السعال ، في جرة معقمة. قبل السعال ، ينظف المريض أسنانه ويشطف فمه بالماء المغلي لإزالة حطام الطعام ميكانيكيا ، الظهارة المنجلية والميكروفلورا تجويف الفم.

مياه الشرب الشعب الهوائية. مع تنظير القصبات ، ضخ ما لا يزيد عن 5 مل من محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر ومن ثم شفطه في أنبوب معقمة.

فصل البلعوم ، تجويف الفم والأنف. المواد من تجويف الفم اتخذت الصيام أو 2 ساعة بعد تناول قطعة من القطن المعقم مسحة ملعقة أو مع الآفات المخاطية ومداخل القنوات في الغدد اللعابية، سطح اللسان قرحة. في وجود فيلم ، يتم إزالة هذا الأخير مع ملاقط معقمة. يتم أخذ المواد من تجويف الأنف باستخدام قطعة قطن معقمة جافة ، والتي يتم حقنها داخل تجويف الأنف. يتم أخذ المادة من البلعوم الأنفي باستخدام قطعة قطن معقمة منتفخة يتم حقنها برفق من خلال فتحة الأنف في البلعوم الأنفي. إذا بدأ السعال ، لا يتم إزالة السدادة حتى ينتهي السعال. لإجراء فحص الدفتيريا ، يتم فحص كل من الفيلم والمخاط من الأنف والبلعوم عن طريق أخذ المواد بسدادات قطنية مختلفة.

اختبار المواد تلقيح على مستنبت الصلبة، وذلك باستخدام تقنية خاصة لنمو المستعمرات الفردية من الكائنات الحية الدقيقة التي يتم فحصهم أيضا على عزل ثقافة نقية من العوامل المسببة للأمراض.

بعض الأنواع من البكتيريا المعزولة باستخدام الانتخابية (الاقتراع) من المتوسطة التي تمنع نمو الميكروبات الخارجية أو تحتوي على المواد التي تحفز نمو بعض مسببات الأمراض.

الكائنات الحية الدقيقة المعزولة على وسائل الإعلام المغذيات محدد، أي تحديد نوع أو نوع انتمائهم. في الآونة الأخيرة ، لتحديد في ممارسة استخدام نظم microtest الصحية ، والتي هي لوحات مع مجموعة من البيئات التشخيصية التفاضلية ، مما يزيد من سرعة الدراسة. كما تستخدم نظم Microtest لتحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للأدوية المضادة للميكروبات من خلال طريقة تمييع مضاد حيوي في وسيط مغذ سائل.

عند تقييم نتائج دراسة بكتيرية ، يجب على الطبيب أن يأخذ ذلك في الاعتبار النتيجة السلبية لا يعني دائمًا غياب عامل ويمكن أن يرتبط باستخدام عوامل مضادة للميكروبات ، نشاط دموي عالي microcidal ، أخطاء فنية. من الممكن اكتشاف الميكروب الممرض في المادة من مريض خارج الاتصال بالصورة السريرية في حالة نقل بكتيري سليم أو عابر.

عزل من الدم مع مراعاة جميع قواعد الكائنات الدقيقة المسببة للأمراض المعقم مشروط (المكورات العنقودية البشروية ، عصية القولون) واعتبار حتى الفطور الرمامة بوصفها مظهرا من مظاهر تجرثم الدم، وخاصة إذا تم العثور على هذه الميكروبات في مادة العينة أكثر من واحد أو في ركائز مختلفة (الدم والبول)، منذ الحد من مناعية الكائن الحي، هذه وغيرها من "غير المسببة للأمراض" الكائنات الحية الدقيقة قد يسبب العمليات المعدية، عدد والإنتان.

ويمثل تعقيد معين من قبل تفسير نتائج الدراسة البكتريولوجية لوسائل الإعلام غير المعقمة، أي دليل على الدور المسبب للمرض من الكائنات الحية الدقيقة الانتهازية. في هذه الحالة، والنظر في مثل هذه العوامل المعقدة كنوع من المحاصيل المخصصة، وعدد من الخلايا الميكروبية في هذا النوع من المواد، على إعادة تخصيص لهذا المرض، وجود الأحادية أو جمعية الكائنات الحية الدقيقة.

Yushchuk ND، Vengerov Yu.Ya.