تم العثور على اختبارات منزلية للدم المخفي في البراز لتكون فعالة. منهجية الاختبار

الرقم الكتالوجي: 4091-3L التعبئة: 20 اختباراً / تعبئة

معلومات

في كل عام، شهد العالم أكثر من 600 000 حالة إصابة بسرطان القولون، وهو في المرتبة الثالثة بين الأنواع الأكثر شيوعا من السرطان (1). كما هو الحال مع أي نوع آخر من السرطان ، فإن اكتشاف البؤر في مرحلة مبكرة يزيد بشكل كبير من معدل بقاء المرضى (2). بين الأشخاص الذين تزيد أعمارهم عن 45 عاما ، 10 ٪ لديهم polyps القولون والمستقيم ، منها 1 ٪ يصبح خبيث (3). استنادا إلى حقيقة أن العديد من السلائل أكثر من 0.5 سم يمكن أن ينزف ، اختبار الدم الخفي في البراز يبدو أن طريقة الفحص بسيطة ورخيصة لتشخيص سرطان الأمعاء مقارنة مع تنظير القولون. لسنوات عديدة ، تم استخدام التقنيات الكيميائية على أساس نشاط الهيموجلوبين كاذبة البيروكسيديز ، وكانت أوجه القصور فيها حساسية منخفضة وعدم التحديد (4). تستخدم الطرق المناعية حاليا مع حساسية وخصوصية محسنة للدم البشري ، على الرغم من تعقيدها الفني الكبير مقارنة مع اختبارات أخرى (5). في الآونة الأخيرة ، تم تأكيد وجود صلة مباشرة بين تركيز الهيموجلوبين في البراز وسرطان القولون والمستقيم (6).

الغرض ومبدأ الطريقة

اختبار سري مناعي كمي للكشف عن الدم الخفي في البراز. وتعتمد طريقة التحديد على استخدام مركب محدد من الأجسام المضادة أحادية النسيلة المترافقة بصبغة فأجسام مضادات الهيموغلوبين البشرية والأجسام المضادة أحادية النسيلة للهيموجلوبين البشري المتجمد في منطقة اختبار الكاسيت لتحديده الانتقائي بدرجة عالية من الحساسية والخصوصية. بعد أخذ عينة بمحقن خاص مع محلول إستخلاص ، يتم تطبيق بضع قطرات من مستخلص البراز المحصول على عينة خرطوشة الاختبار بشكل جيد. مع مرور عينة الاختبار من خلال طبقة الممتزات ، يرتبط الجسم المضاد المسمى بالترافق مع الصبغة بهيموجلوبين الإنسان ، مما يشكل مجموعة من الأجسام المضادة للمستضدات. يرتبط هذا المركب في منطقة التفاعل مع الأجسام المضادة للهيموغلوبين مع تشكيل شريط وردي. في غياب الهيموغلوبين ، لا يتم تشكيل الخط. يستمر في التحرك على طول الطبقة الممتزة ، يرتبط الارتباط المتقارب بالكواشف في منطقة التحكم لتشكيل نطاق تحكم يشير إلى تفاعل الاختبار. اعتمادا على تركيز الدم ، تظهر خطوط متفاوتة الشدة في نافذة الاختبار ، مما يجعل من الممكن قياس الهيموغلوبين باستخدام محلل القارئ المناعي السهل القارئ (VEDALAB).

هيكل

اختبار الكاسيت 20

جهاز لجمع العينات (المحقنة مع 2 مل من محلول لاستخراج) 20

تعليمات 1

الاستقرار والتخزين

1. تخزين في درجة حرارة من 4 إلى 30 درجة مئوية في تغليف مصنع مختومة.

2. لا تجميد!

3. الاختبار مستقر حتى تاريخ انتهاء الصلاحية المشار إليه على الملصق.

احتياطات السلامة

هذا الاختبار مخصص فقط للتشخيص. في المختبر  والتطبيق المهني.

عند العمل مع عينات استخدام الملابس الواقية والقفازات القابل للتصرف.

لا تأكل أو تشرب أو تدخن في الغرفة حيث يتم التعامل مع العينات.

عند أخذ العينات واختبارها ، لا تلمس الغشاء المخاطي للعينين والأنف.

لا تستخدم شريط الاختبار إذا كانت العبوة الواقية معطلة.

لا تستخدم أشرطة اختبار منتهية الصلاحية.

محلول الإستخلاص قد يسبب تهيج الجلد والعينين والأغشية المخاطية. إذا كان المحلول يتلامس مع الجلد ، فقم بغسله فوراً بالماء.

التخلص من النفايات

يجب اعتبار جميع العينات معدية. بعد اكتمال إجراء الاختبار ، يجب التخلص من العينات بحذر وفقط بعد التعقيم في الأوتوكلاف أو المعالجة مع 0.5 - 1 ٪ محلول هيبوكلوريت الصوديوم لمدة ساعة واحدة على الأقل.

إعداد الكاشف

جميع الكواشف جاهزة للاستخدام.

عينات الاختبار

استخراج البراز.

أخذ العينات وإعداد العينات

1. اكتب اسم المريض وعمره وعنوانه وتاريخ أخذ العينة على ملصق جهاز أخذ العينات.

.2 اﻓﺘﺢ اﻟﺠﺰء اﻟﻌﻠﻮي ﻣﻦ ﺟﻬﺎز أﺧﺬ اﻟﻌﻴﻨﺎت ﺣﻴﺚ ﻳﻮﺟﺪ اﻟﻤﺠﺲ ﻟﺠﻤﻊ اﻟﻌﻴﻨﺎت.

3. خذ عينة من البراز باستخدام الجزء العلوي لجهاز أخذ العينات ، ثم غمره في 3 أماكن مختلفة من نفس عينة البراز ، وضعه في الجهاز.

.4 ﺿﻊ ﻣﺳﺑﺎر أﺧذ اﻟﻌﯾﻧﺎت اﻟﻣﺣﻣل ﻣﻊ اﻟﻌﯾﻧﺔ ﻣرة أﺧرى ﻓﻲ ﻣﮐﺎﻧﮫ ﻓﻲ ﺟﮭﺎز أﺧذ اﻟﻌﯾﻧﺎت ﺛم أﻏﻟق اﻟﻘﺎﺑس ﺑﺈﺣﮐﺎم.

5. قم بتخزين جهاز أخذ العينات في 2-8 درجة مئوية.

إجراء الاختبار

1. أحضر جميع العينات واختبار الخراطيش إلى درجة حرارة الغرفة.

.2 ﻗم ﺑﺈزاﻟﺔ ﮐﺎﺳﯾت اﻻﺧﺗﺑﺎر ﻣن اﻟﻌﺑوة اﻟواﻗﯾﺔ.

.3 ﻗم ﺑﻔﺻل طرف طرف ﺟﮭﺎز أﺧذ اﻟﻌﯾﻧﺎت ، واﺿﻐط ﻋﻟﯽ 6 ﻗطرات ﮐﺎﻣﻟﺔ ﻣن اﻟﻌﯾﻧﺔ اﻟﻣﺳﺗﺧرﺟﺔ (150 ﻣﯾﮐروﻟﺗر) ﻓﻲ اﻟﻌﯾﻧﺔ اﻟﻣوﺟودة ﻋﻟﯽ ﮐﺎﺳﯾت اﻻﺧﺗﺑﺎر ، ﻣﻣﺎ ﯾﺳﻣﺢ ﺑﻧﻘﻊ اﻟﻣﺎدة اﻟﺳﺎﺑﻘﺔ.

4. تقرأ نتائج الاختبار في نانوغرام / مل على القارئ السهل 10 دقائق بعد تقديم العينة.

ويرد وصف مفصل للعمل على القارئ في التعليمات للجهاز.

خصائص الاختبار

أ) نطاق القياس

يتم التعبير عن النتيجة الكمية للاختبار في نانوغرام من الهيموجلوبين لكل مل من محلول الاستخلاص. يتراوح النطاق الخطي للنتائج من 10 إلى 500 نانوغرام / مل ، ويظهر النطاق في الجدول:

تركيز الهيموجلوبين (نانوغرام / مل)	نتائج القارئ (نانوغرام / مل)
	«الهيموغلوبين< 10 ng/mL»
	النتيجة الكمية
	"Hb = 500 - 5،000 ng / mL"
	"Hb\u003e 5000 ng / mL"

ب) الدقة

أجريت الدراسة على لوحة مكونة من 24 عينة برازية مقدمة من مستشفى برادفورد (المملكة المتحدة) لنظام يوركشاير لمراقبة الجودة الخارجية (YEQAS). تم اختبار هذه العينات التي تحتوي على الهيموغلوبين بتركيز معروف (في البراز mg / g) بواسطة اختبار سريع بصري نوعي واختبار كمي. تشير النتائج إلى وجود علاقة كاملة بين النتائج. بالإضافة إلى ذلك ، ترتبط النتائج الكمية بشكل جيد مع كمية الهيموغلوبين (بيانات YEQAS في البراز mg / g). في جميع الحالات ، تم تحديد العينات بدقة على أنها سالبة (<10 нг/мл), пограничные (10-25 нг/мл) и позитивные (500-5,000 нг/мл).

ج) الحساسية

يتم تحديد تركيزات قريبة من 5 نانوغرام / مل بواسطة الأداة. في هذه الحالة ، تظهر النتيجة "<10 ng/ml». Результаты выше 100 нг/мл рассматриваются как патологические.

د) تأثير الجرعة العالية (تأثير الخطاف)

لم يلاحظ تأثير هوك يصل إلى 2 ملغ / مل بسبب طريقة VEDALAB الحاصلة على براءة اختراع.

د) عبر التفاعل:

أظهر الفحص عدم وجود تفاعلات متصالبة مع الأبقار والخنازير والأرانب والخيول وخضاب الهيموجلوبين.

البريد) استنساخ:

عند اختبار عيينتين تجاريتين بتركيز دم مخفي يبلغ 3.35 و 26.67 نانوغرام / مل في 25 تكرار ، كان معامل التباين في النتائج 8.5٪ و 11.4٪ على التوالي.

ز) أهمية التشخيص

كما هو مذكور أدناه (انظر "حدود الطرق") ، هناك العديد من الأسباب لوجود الدم في البراز ، ويجب على الطبيب تأكيد نتائج هذا الاختبار مع طرق سريرية أخرى ، مثل تنظير القولون.

عند اختبار 54 عينة من البراز ، وجد أن النتائج أقل من 100 نانوغرام / مل ينبغي أن تُفسر على أنها سالبة ، من 100 إلى 200 نانوغرام / slu كخط حدودي وأعلى من 200 نانوغرام / مل كإيجابية. ومع ذلك ، في وجود أعراض أخرى ، من الضروري إجراء فحص إضافي ، حتى إذا كان التركيز المكتشف أقل من 100 نانوغرام / مل.

قيود الطريقة

1. الغرض من الاختبار هو التحديد الكمي لدم الإنسان (الهيموجلوبين) في البراز.

2. يمكن أن يكون سبب وجود الدم في البراز لعدة أسباب ، بالإضافة إلى سرطان الأمعاء ، مثل البواسير والدم في البول أو تهيج المعدة. نزيف من الجزء العلوي من الجهاز الهضمي (على سبيل المثال ، في حالة قرحة في المعدة أو قرحة الاثني عشر) قد لا يتم الكشف عنها باستمرار بسبب هضم البروتين وصعوبة للأجسام المضادة للتعرف على مستضد الهيموجلوبين بعد التحلل البروتيني.

3. ليس كل نزيف معوي يمكن أن يكون ناجما عن بوليبات سرطانية أو سرطانية.

4. كما هو الحال مع أي إجراء تشخيصي ، يجب على الطبيب تأكيد البيانات التي تم الحصول عليها باستخدام هذا الاختبار باستخدام طرق سريرية أخرى ، مثل حقنة شرجية الباريوم ، sigmoidoscopy أو تنظير القولون.

5. النتائج السلبية لا تستبعد النزيف ، لأنها قد تكون متقطعة.

6. قد لا تنزف الاورام الحميدة القولون والمستقيم في مرحلة مبكرة جدا من المرض. ولهذا السبب ، ولأغراض الموثوقية ، يُوصى بإجراء فحص دوري (مرة في السنة) لفحص الأشخاص الذين تزيد أعمارهم عن 45 عامًا.

7. الغرض من الاختبار هو القراءة فقط على Easy Reader. الاختبار غير مخصص للقراءة البصرية.

8. إذا لم يلاحظ وقت القراءة (10 دقائق) ، قد تحدث نتائج خاطئة.

9. كما لوحظ في طرق التحليل الأخرى ، هناك بعض الاختلاف في نتائج القياس. لذلك ، بالنسبة للبيانات السريرية ، يوصى بإدخال معامل تباين بنسبة +/- 25٪ بالنسبة للنتيجة التي تم الحصول عليها.

أدب

1. D. M. Parkin، E. Laara and C. S. Muir. "تقديرات التكرار العالمي لستة عشر سرطانا رئيسيا في عام 1980." كثافة العمليات. J. السرطان ، المجلد 41: 184-1

2- سيدني وينيفر وبول شيرلوك وديفيد شوتينفيلد ودانيال جي ميلر. "الاتجاهات والموضوعات السريرية: فحص سرطان القولون." الجهاز الهضمي ، المجلد 70: 783-7

3. S. J. Winaver، S. D. Leidner، D. G. Miller، D. Schottenfeld، B. Befler، R. C. Kurtz، P. Sherlock and M. Stearns. وقد ثبت أن هناك اختبار الدم الخفي برازي. ملخصات الورق ، المجلد 72 (رقم 5): A-127/11

4. D. J. Frommer، A. Kapparis and M. K. Brown. "تحسين فحص سرطان القولون والمستقيم عن طريق الكشف المناعي للدم غامض." المجلة الطبية البريطانية ، المجلد 296: 1092-10

5. جيروم ب. سيمون. "غيبلة فحص الدم لسرطان القولون والمستقيم: مراجعة نقدية." الجهاز الهضمي ، المجلد 88: 820-8

Fraser، C.G.، Mathew، C.M.، McKay، K.، Carey، F.A. and Steele، R.J.C. "الكميات الكيميائية immnochemical لفحص سرطان القولون والمستقيم. القناة الهضمية ، المجلد 57: 1256-12

6. فريزر ، سي جي ، ماثيو ، سي.أم. ، مكاي ، ك. ، كاري ، ف. أ. و ستيل ، ر. ج. "الكميات الكيميائية immnochemical لفحص سرطان القولون والمستقيم. القناة الهضمية ، المجلد 57: 1256-12

الأشخاص الذين يعانون من أمراض المعدة والأمعاء ، يمرون بانتظام بتحليل البراز للدم الخفي. يستخدم هذا الاختبار للكشف عن نزيف بدون أعراض من أجزاء مختلفة من الجهاز الهضمي.

لا تعتبر دراسة أجريت في المختبر السريري مضيعة للوقت. من المهم في التشخيص التفريقي لفقر الدم. يدرك الأطباء تمامًا القواعد التي يجب بموجبها تنظيم جمع البراز للدم المخفي للحصول على نتائج موثوقة. يجب أن يكون المرضى بالتأكيد على دراية بها عند إرسالها إلى المختبر.

يتم باستمرار تحسين طرق التشخيص. بالإضافة إلى اختبار البنزيدين الذي تم اختباره على مر السنين (تفاعل غريغرسن) ، ظهر تحليل مناعي كيميائي وأصبح متاحًا. كشف الدم غامض في البراز يوفر مساعدة كبيرة للأطباء في تشخيص المرض ، واختيار العلاج.

ما هو الدم مخفي؟

بادئ ذي بدء ، يجب عليك أن تقرر المصطلحات. إذا كان الدم مرئياً على سطح البراز بعد عمل التغوط ، فإنه لا ينطبق على النزيف الكامن. وهكذا يمكن رؤيته دون أي تحليل. سبب مثل هذه العلامة لدى البالغين هو في معظم الأحيان تمزق الأوردة البواسير ، والشقوق في المستقيم.

إن اختبار الدم الغامض في البراز يعني تحديد غير محسوس بواسطة طبيعة علامة البراز ، عندما يكون وجود الدم غير مرئي ليس فقط للعين ، ولكن أيضًا لا يتم الكشف عنه بواسطة الفحص المجهري.

يمكن أن تظهر تقنيات المختبر وجود نزيف معوي مع فقدان دم أقل من 50 مل. هذا هو سمة من المراحل الحادة من الأمراض التالية:

• مرض القرحة الهضمية.
• الاورام الحميدة المعوية.
• الأورام.
• التهاب القولون التقرحي
• التهاب المعدة والأمعاء التآكلي؛
• رتج المعدة والأمعاء.

الأورام الخبيثة - أحد أسباب ظهور الدم الخفي في كتل البراز

في التشخيص التفريقي ، يجب على الطبيب التفكير في نتيجة إيجابية محتملة:

• مع نزيف من الأنف واللثة.
• الأمراض الالتهابية من اللوزتين والبلعوم ،
• الدوالي من المريء الناجم عن تليف الكبد.
• تقرحات المريء والتهاب المريء التآكلي ؛
• داء كرون
• آفة سنية معوية؛
• الديدان الطفيلية في الطفل.
• أمراض الدم.

يتم تقييم نتائج تحليل البراز الغامض من قبل الطبيب في تركيبة مع دراسات أخرى ومظاهر سريرية. طرق الكشف لها خصائصها الخاصة. في التشخيص يجب أن تأخذ بعين الاعتبار الغرض المقصود.

فحص البراز مع اختبار benzidine

حصلت عينة بنزيدين على الاسم من الكاشف الرئيسي في التفاعل مع البراز على الدم الخفي. وهو أكثر شيوعًا في تعديل غريغرسن (اختبار غريغرسن) ، والذي أضاف بيروكسيد الباريوم وحامض الخليك إلى البنزيدين (الباراديمين ثنائي فينيل بواسطة التركيب الكيميائي) من أجل تفعيل أكبر لمحلول الاختبار.

جوهر رد الفعل: استخدام خاصية الهيموقلوبين من خلايا الدم الحمراء لأكسدة البنزيدين. من خلال هذه الطريقة ، من الممكن الكشف عن ميكروفلويدات الدم (كريات الدم الحمراء) ليس فقط في البراز ، ولكن أيضا في القيء ، عصير المعدة. يتم استخدامه لفحص بقع تشبه الدم في الطب الشرعي. حساسية العينة هي 1: 100 000. تذكر تجارب شيرلوك هولمز (تجدر الإشارة إلى أن كونان دويل كان طبيبا).

نقطة مهمة: يتم الحصول على نتيجة إيجابية ليس فقط عند تعرض الهيموجلوبين ، ولكن أيضًا عندما يتفاعل الميوجلوبين العضلي (في اللحم) مع بعض الفيتامينات والأدوية مع البنزيدين. هذا يتطلب الامتثال مع الفترة التحضيرية ، والقيود الغذائية.

تقنية اختبار البنزيدين

جمع براز في كمية صغيرة طخت على شريحة زجاجية. يتم تطبيق بضع قطرات من الكاشف على ذلك. إذا كان هناك دم ، فإنه يتحول لون أزرق أخضر.

  في البراز السائل ، يتم التفاعل على ورق الترشيح ، والذي يتم من خلاله امتصاص السائل الزائد.

من الذي تم تعيينه لرد الفعل غريغرسن؟

التطبيق الرئيسي هو تشخيص النزيف من المعدة والأمعاء:

• في توضيح طبيعة وأسباب فقر الدم ؛
• أهبة النزفية.
• يشتبه السرطان وسرطان المعدة المعوية.
• الكشف عن قرحة المعدة والاثني عشر.
• يشتبه التهاب القولون التقرحي.

إن بساطة الدراسة تجعل من الممكن استخدامها لفحوصات وقائية للأشخاص الذين تتراوح أعمارهم بين 50 عامًا وأكثر كل عامين. وهو يساعد في الكشف المبكر عن السرطان.

ما هو التدريب المطلوب؟

تتطلب إمكانية التفاعل مع الميوغلوبين عبر التحضير الأولي للمريض 3 أيام قبل أخذ البراز:

• من الضروري استبعاد اللحوم من اللحوم ومنتجات الأسماك والأطباق من الكبد ؛
• في الوقت نفسه لا يمكنك تناول الخضار والفواكه الغنية بالحديد (التفاح والسبانخ والفلفل والفاصوليا البيضاء والبصل الأخضر والكوسة والطماطم والقرنبيط) ؛
• يجب التوقف عن تناول مكملات الحديد ، وفيتامين ج ، والأسبرين ، والصداع المحتوي عليه ، والعقاقير غير الستيرويدية من العمل المضاد للالتهابات (ديكلوفيناك ، نابوفين ، ايبوبروفين) ؛
• هي موانع الأدوية مسهلة و الحقن الشرجية.
• للقضاء على تأثير نزيف اللثة ، لا ينصح بتنظيف أسنانك بالفرشاة.

إذا تم استخدام طرق التشخيص مثل تنظير السيني ، تنظير القولون ، والأشعة السينية من المعدة والأمعاء قبل فترة وجيزة من الفحص ، ثم أخذ البراز لدم غامض ينبغي تأجيل لمدة ثلاثة أيام. يجب على الفتيات والنساء عدم الخضوع لاختبار دم البراز أثناء الحيض. نقص التدريب يؤدي إلى نتائج إيجابية كاذبة.

  في الرضع ، يتم أخذ المواد للدراسة من الحفاضات

تقييم نتائج اختبار البنزيدين

إن فك رموز اختبار الدم الخفي البرازي وتفسير النتائج أمر يخص الطبيب. يتم تقييم رد الفعل فقط من الناحية النوعية ، ويلاحظ نتيجة سلبية في ختام المختبر.

كيف يمكن الحكم على نتيجة الاختبار من خلال عدد من الصلبان: من واحد (+) إلى أربعة (++++). في بعض الأحيان بدلاً من (+) يكتبون "آثار أقدام". في أي حال ، هذا يعني إمكانية حدوث نزيف بدون أعراض ، إذا لم يتم انتهاك قواعد تحضير وجمع دم البراز الخفي.

كيفية جمع البراز للتحليل؟

وينبغي الحصول على البراز لاختبار الدم الخفي في يوم الدراسة بشكل طبيعي دون الحقن الشرجية والملينات. سيكون لدى الأشخاص المصابين بالإمساك ، مع وجود التوجيه على أيديهم ، الانتظار للحصول على كرسي.
  تبيع الصيدلية حاويات معقمة خاصة بملعقة وغطاء محكم.

في الأطفال ، يتم جمع البراز من وعاء ، في الرضع - من حفاضات. سيكون من المناسب أيضًا أن يقوم شخص بالغ بتكييف فعل التغوط في وعاء أو وعاء نظيف ، على ورق سلوفان أو ورقة.

لا حاجة إلى غسل خاص قبل الحصاد ؛ إجراءات صحية منتظمة مع الماء الدافئ مناسبة.

  يجب تسليم الحاوية للمختبر قبل الساعة العاشرة صباحا

للبحث كمية كافية من حجم البراز مع ملعقة صغيرة. يجب أن يتم جمع المواد الحيوية تدريجيا من 2-3 مواقع مختلفة ، ويجب أن يتم جمع المواد الخاصة بالدراسة في نفس اليوم الذي يتم فيه إجراء التحليل. من الأفضل عدم تأخير النقل. يسمح التخزين على المدى القصير في الثلاجة في درجة حرارة لا تقل عن +6 درجة.

طريقة المناعة الكيميائية ومزاياها

إن دراسة البراز الخفي للدم باستخدام طريقة مناعية كيميائية لها عدة مزايا على تفاعل غريغرسن:

• حساسية أعلى من ذلك بكثير.
• هو محدد فقط للهيموغلوبين البشري ، لا يستجيب لميوجلوبين اللحم والفيتامينات والمخدرات.
• لا يتطلب تدريبًا غذائيًا خاصًا ؛
• أكثر ملاءمة لتشخيص النزيف من الأمعاء الدقيقة ، لأن الأسلوب يستخدم رد فعل على جزء البروتين من الهيموجلوبين ، ويتم هضمها بنشاط في الجهاز الهضمي العلوي.

يتم تضمين الاختبار في الخوارزمية لفحص المرضى الذين يعانون من سرطان القولون والمستقيم المشتبه بها (المترجمة في القولون والمستقيم). لا تحتوي نتيجة التحليل على معلومات حول المنطقة المحددة لنزيف الجهاز الهضمي وأسباب النزف.

يجب أن لا تعامله على أنه تشخيص جاهز. في حالة وجود نتيجة إيجابية ، يظهر الاختبار أنه من المستحسن إجراء تنظير القولون بالإضافة إلى ذلك لتحديد سبب النزيف. جوهر هذه الطريقة: استخدام الأجسام المضادة للهيموجلوبين البشري يجعل من الممكن اكتشاف وجود المستضدات في المادة قيد الدراسة وإعطاء خاصية كمية.

متى يتم إجراء أبحاث مناعية كيميائية؟

المؤشرات الرئيسية لدراسة أمراض الأمعاء الدقيقة هي الشك:

• للورم
• الاورام الحميدة.
• التهاب القولون التقرحي
• مرض كرون.

يساعد استخدام التقنية في التشخيص المبكر لسرطان القولون والمستقيم (وهو السبب الأكثر شيوعًا لوفيات السرطان لدى السكان) في إجراء فحص للمتابعة في الوقت المناسب وتحسين تشخيص المرض.

وتتيح خوارزمية الفرز الخاصة بالسكان إجراء دراسة مناعية كيميائية على الفور مع إيصال البراز إلى جميع الأشخاص الذين تزيد أعمارهم عن 50 سنة ، ومع ضائقة وراثية من 40 سنة - ثلاثة أضعاف. إذا تم الكشف عن نتيجة إيجابية ، تعيين تنظير القولون.

يعتقد الخبراء أن اتباع هذا البرنامج يمكن أن يقلل من معدل الوفيات من سرطان القولون والمستقيم بنسبة 25 ٪.

تقنية البحث المناعي

تستخدم هذه التقنية مبدأ الاستقطاب المناعي:

• يتم وضع قطرة من مادة الاختبار في بئر من لوحة، والتي قبل المغلفة مع الأجسام المضادة المحددة كاشف وصبغ.
• في وجود مستضد من الهيموغلوبين من كريات الدم الحمراء ، يحدث تفاعل بينهما ؛
• يتكون مجمع ملون ؛
• يمر المركب مع السائل إلى منطقة الاختبار ، بالإضافة إلى أنه يجمع مع الأجسام المضادة.
• يتم تعيين منطقة اختبار تركيز عتبة معينة من الهيموغلوبين، فائض في العينة هو مبين صفت اللون الوردي البنفسجي.

  قد يقوم مساعد المختبر بإجراء عدة اختبارات في وقت واحد.

كيف يتم تفسير النتائج؟

يعطي الاختبار استجابة سلبية كاذبة في غياب الهيموغلوبين الحر في عينة البراز ، فقط خلايا الدم الحمراء السليمة موجودة ، على سبيل المثال ، إذا كان هناك نزيف خارجي من الشق الشرجي.

يشكل الفقد الفسيولوجي لخلايا الدم الحمراء من البراز حدًا للمستوى الطبيعي للنتيجة -14 نانوغرام / مل. يتم تعيين الحدود التشخيصية اعتمادا على الغرض من الدراسة. على سبيل المثال ، للكشف عن السرطان في مجموعة خطر - يعتبر 50 نانوغرام / مل التركيز الطبيعي للهيموجلوبين الحر.

هل أحتاج إلى إعداد خاص للتحليل؟

بخلاف اختبار البنزيدين ، لا توجد قيود غذائية خاصة مطلوبة. ولكن هناك بعض الخصوصيات:

• يجب أن تقرر مع طبيبك إمكانية لدراسة استخدام الأدوية التي تزيد من خطر النزيف (مشتقات الأسبرين، مضادات للالتهابات)؛
• لا يتم إجراء التحليل في غضون 14 يومًا بعد إجراء دراسات مفيدة على المعدة والأمعاء وتطهير الحقن الشرجية وتنظير القولون وتنظير السيني (يمكن أن يتسبب في تلف الغشاء المخاطي) ؛
• لا ينصح بجمع البراز من وعاء المرحاض ، فمن الأفضل استخدام ورقة ، قماش زيتي ، السيلوفان.
• حاوية قياسية يجب ملؤها 1/3؛
• يجب تقديم التسليم إلى المختبر في غضون 12 ساعة بعد حركة الأمعاء ؛
• يمكنك تخزين العينة في الثلاجة بدرجة حرارة تتراوح من 4 إلى 8 درجات قبل النقل.

  يجب الحصول على البراز دون الحقن الشرجية والملينات.

هل التشخيص السريع المعجل ممكن؟

إن السؤال عن المدة التي يتم فيها إجراء التحليل يجب أن يوجد في المختبر حيث يتم تسليم المواد البحثية. في شبكة الصيدليات ، يمكنك العثور على اختبار محدد "Immunochrome-GEM-Express". هذا هو البديل السريع لتحديد هيموغلوبين مناعي كيميائي.

يمكنك ان تنفق في المنزل. ولكن يجب عليك أولا قراءة التعليمات بعناية وتلبية متطلبات التدريب. للحصول على نتيجة اختبار benzidine يستغرق بضع دقائق. يمكن أن ينتهي الختام للمريض إلى نهاية اليوم. يستغرق الاختبار المناعي الكيميائي من 3 إلى 6 أيام.

يعد إجراء فحص الدم الخفي برازي نقطة مهمة في تشخيص العديد من الأمراض. يجب أن تؤخذ على محمل الجد التحضير والقواعد لاجتياز التحليل. هذا سوف يتجنب التعقيدات الخطيرة في المستقبل.

اختبار مناعي للكشف عن الهيموجلوبين في البراز (الدم الخفي)

موعد

يهدف اختبار "RED غامض الدم" إلى الكشف النوعي السريع للفيتوبرو خطوة واحدة عن الهيموغلوبين (الدم الخفي) في البراز.

معلومات موجزة

يتم استخدام اختبار الدم الخفي البرازي لتحديد أنواع مختلفة من الأمراض في الجهاز الهضمي السفلي ، ويتميز النزيف (السلائل القولون ، وسرطان القولون والمستقيم ، ومرض كرون ، والتهاب القولون التقرحي). عادةً ما تكون الأوعية على سطح ورم القولون والمستقيم أو الأورام الخبيثة هشة ويمكن إتلافها بسهولة عند مرور كتل البراز. في الوقت نفسه يتم إفراز كمية صغيرة من الدم في البراز ، وهذا نادرًا ما يكون ملحوظًا للعين.

يظهر فحص الدم الأحمر الكامن حساسية عالية وخصوصية في الكشف عن النزيف عند مستوى القولون والمستقيم ، في حين أنه غير حساس للنزف الكامن في القناة الهضمية العليا ، حيث يتم هضم جزء البروتين من الهيموجلوبين.

مبدأ الطريقة

ويستند التعريف على مبدأ التحليل immunochromatographic. يتم امتصاص العينة التي تم تحليلها من المواد البيولوجية السائلة عن طريق الجزء الماص من شريط الاختبار. إذا كان الهيموجلوبين موجودًا في عينة ، فإنه يتفاعل مع أجسام مضادة وحيدة النسيلة ضد الهيموغلوبين المسمى بالجزيئات الملونة المطبقة على منطقة البداية ويستمر بالتدفق مع تيار السائل. في المنطقة التحليلية لشريط الاختبار ، يحدث تفاعل مع أضداد وحيدة النسيلة محددة مثبتة على سطح الغشاء لتشكيل مركب مناعي ملون.

في منطقة التحكم بشريط الاختبار ، يتشكل مركب مناعي لون معين بغض النظر عن وجود الهيموغلوبين في المادة البيولوجية التي تم اختبارها.

في حالة وجود الهيموغلوبين في العينة المراد تحليلها ، يتم تشكيل خطين متوازيين على شريط الاختبار (أحمر تحليلي ، يشار إليه بالحرف T ، والتحكم باللون الأخضر ، المشار إليه بالحرف C) ، مما يدل على نتيجة إيجابية للتحليل. في حالة عدم وجود الهيموجلوبين في العينة التي تم تحليلها ، يتم تشكيل خط تحكم أخضر (C) على شريط الاختبار ، مما يشير إلى نتيجة سلبية للتحليل.

هيكل

تشتمل مجموعة واحدة من الاختبارات "RED hidden blood" على:

• شرائط اختبار immunochromatographic "RED الدم الخفي" في أشرطة بلاستيكية بيضاء - 5 ، 10 أو 20 جهاز كمبيوتر شخصى.
• أنابيب مع غطاء بالقطارة وقضيب لأخذ عينات البراز المحتوية على العازلة لحل العينة - 5 ، 10 أو 20 جهاز كمبيوتر شخصى ، على التوالي ؛
• التسميات القائمة على الغراء لأنابيب وضع العلامات من قبل المستخدم - 5 ، 10 أو 20 جهاز كمبيوتر شخصى ، على الترتيب ؛
• تعليمات لاستخدام اختبار "RED الدم الخفي" - 1 جهاز كمبيوتر.

يتم تغليف أشرطة شريط الاختبار في علب فراغ احباط الألومنيوم الفردية التي تحتوي على أكياس من هلام السيليكا.

يتم وضع مجموعة اختبار "الدم الأحمر المخفي" في صندوق من الورق المقوى.

المعدات والمواد الضرورية غير المدرجة في الطقم

• حاويات لجمع عينات البراز ؛
• قفازات مطاطية أو بلاستيكية يمكن التخلص منها ؛
• الساعة أو الموقت.

الخصائص التحليلية

• حساسية اختبار "الدم الأحمر المخفي" هي\u003e 99 ٪.
• خصوصية اختبار "RED الدم الخفي" هي\u003e 99 ٪.
• وقت التحليل 10 دقائق.

إن فحوص الدم الحمراء الكامنة هي خاصة بالهيموجلوبين البشري ولا يتفاعل مع الهيموجلوبين الغذائي والميوغلوبين من أصل حيواني.

تم تصميم كل اختبار "الدم الأحمر المخفي" لتحديد واحد من وجود الهيموغلوبين (الدم الخفي) في البراز البشري.

احتياطات السلامة

إن اختبار "الدم الأحمر المخفي" يقصد به فقط التشخيص في المختبر.

جميع مكونات اختبار "الدم الأحمر المخفي" في التركيزات المستخدمة غير سامة.

لا تستخدم الاختبارات "الدم الأحمر المخفي" بعد تاريخ انتهاء الصلاحية.

عند تنفيذ القرار يجب ارتداء قفازات مطاطية أو بلاستيكية يمكن التخلص منها ، لأن ينبغي اعتبار عينات من المواد البيولوجية التي تم دراستها معدية على الأرجح.

يجب وضع الاختبارات والمخلفات المستخدمة للمواد البيولوجية في حاوية خاصة للنفايات الصحية.

عينات تم تحليلها

المواد البيولوجية المحصودة حديثًا (البراز) ، والتي لا تحتوي على مواد حافظة.

يجب جمع عينات البراز في وعاء نظيف.

يمكن تخزين عينات البراز في درجة حرارة من 2-4 درجة مئوية لمدة لا تزيد عن يومين قبل التحديد ، ويمكن تخزين وقت تخزين أطول (حتى عام واحد) عند درجة حرارة -20 درجة مئوية وأدناه.

قبل التحليل ، يجب إذابة عينات البراز تمامًا وتحويلها إلى درجة حرارة الغرفة.

تجميد وتذويب العينات المتكررة أمر غير مقبول.

تحضير العينة

1. قم بإزالة غطاء القطارة من الأنبوب واتخذ كمية صغيرة من العينة ليتم تحليلها باستخدام قضيب على الغطاء. للقيام بذلك ، أدخل القضيب في العينة 3 مرات ، وجمع ما يقرب من 100 ملغ من البراز (الشكل 1-1). إذا كانت العينة سائلة ، ماصة 100 ميكرولتر.

.2 أدﺧﻞ اﻟﻘﻀﻴﺐ ﻣﻊ اﻟﻌﻴﻨﺔ ﻓﻲ اﻷﻧﺒﻮب ﻣﻊ اﻟﻤﺨﺰن اﻟﻤﺆﻗﺖ ﻟﺘﺬوﻳﺐ اﻟﻌﻴﻨﺔ وﺗﺜﺒﻴﺖ ﻏﻄﺎء اﻟﻘﻄﻌﺔ ﺑﺈﺣﻜﺎم (ﺷﻜﻞ 1-2).

3. هز الأنبوب عدة مرات لتسهيل حل العينة (الشكل 2-1).

تحليل

يجب إحضار عينات البراز التي تم تحليلها واختبارات "الدم الكامن الأحمر" إلى درجة حرارة الغرفة (15-25 درجة مئوية) قبل التحليل.

4. هز الأنبوب مع الحل عينة (الشكل 2-1). قطع أو قطع رأس القبعة بالقطارة.

5. على الفور قبل التحليل ، وفتح العبوة من اختبار "RED الدم الخفي" ، وتمزيقه على طول الفتحة. أخرج شريط اختبار الشريط وضعه على سطح أفقي مسطح.

6. يجب إدخال 4 قطرات (حوالي 100 ميكرولتر) من العينة السائلة في النافذة المستديرة للخرطوشة ، المشار إليها بالحرف S ، متجنبة دخول الجزيئات الصلبة للعينة مع السائل (الشكل 2-2). لكل عينة أو عنصر تحكم ، يجب استخدام أنبوب منفصل مع المخزن المؤقت لحل العينة واختبار منفصل "الدم الكامن الأحمر".

7. بعد 10 دقائق ، تقييم بصري نتيجة للتفاعل.

تفسير النتائج

يشير الكشف في نافذة الاختبار في شريط واحد من خط التحكم الأخضر (C) إلى نتيجة سلبية للتحليل ، أي يشير إلى عدم وجود الهيموغلوبين في العينة التي يجري تحليلها (الشكل 3-1).

ويشير الكشف في نافذة اختبار الكاسيت لخطين ملونين متوازيين (C و T) إلى نتيجة إيجابية للتحليل ، أي: يشير إلى وجود الهيموجلوبين في عينة الاختبار (الشكل 3-2). قد تختلف شدة الخط الأحمر التحليلي (T) في نافذة الاختبار في الكاسيت حسب تركيز الهيموجلوبين في العينة.

في الحالات التي لا تتشكل فيها خطوط ملونة في نافذة اختبار كاسيت أو يتم تشكيل خط تحليلي أحمر (T) فقط ، يتم إبطال نتيجة التحليل (الشكل 3-3). في نفس الوقت ، يجب تكرار التحليل باستخدام اختبار دم أحمر آخر.

قد يؤدي وجود كمية زائدة من عينات البراز إلى ظهور خطوط غامقة داكنة اللون في نافذة اختبار الكاسيت التي لا تحتوي على قيمة تشخيصية. في هذه الحالة ، قم بإضافة كمية كبيرة من المذيب إلى العينة وقم بتكرار الاختبار باستخدام اختبار دم أحمر آخر.

قد تظهر عينات البراز المأخوذة من مرضى نزيف البواسير ، والإمساك ، وكذلك أثناء الحيض نتائج إيجابية كاذبة.

النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام اختبار الدم الأحمر الكامن هي نتائج أولية. لتأكيدها ، من الضروري إجراء دراسات إضافية على عينات البراز باستخدام طرق بديلة.

شروط التخزين والتشغيل

يجب تخزين اختبارات "الدم الأحمر المخفي" عند درجة حرارة من 2 إلى 25 درجة مئوية في العبوة الأصلية في مكان جاف طوال فترة الصلاحية. تجميد الاختبارات "الدم الأحمر المخفي" غير مسموح به.

تاريخ انتهاء اختبارات "RED hidden blood" - 24 شهرًا. من تاريخ الصنع.

بعد فتح العبوة ، يجب استخدام اختبارات "الدم الخفي الأحمر" لمدة ساعتين عند تخزينها في مكان جاف في درجة حرارة الغرفة.

للحصول على نتائج موثوقة ، يلزم الالتزام الصارم بالتعليمات الخاصة باستخدام اختبار "الدم الكامن الأحمر".

اختبار عدة immunochromatographic تحديد مرحلة واحدة من الدم الخفي في البراز.

قد لا تسبب أمراض الجهاز الهضمي ، مثل سرطان القولون ، والقرحة ، والاورام الحميدة ، والتهاب القولون ، والتهاب الرتج والتشنج المستقيمي ، أي أعراض واضحة في المراحل الأولى من التطور. اكتشافها خلال هذه الفترة أمر صعب.
يمكن أن تكون طريقة التشخيص البسيطة والموثوقة في هذه الحالة هي الكشف عن الدم الخفي في البراز (FOB).

المقادير:

• قرص فردي يتم تعبئته في عبوة فراغ رقائق الألومنيوم الفردية مع مجفف ،
• ماصة مع حاوية عينة ،
• كاشف لتخفيف العينة البراز.

حساسية: 50 نانوغرام / مل أو 6 ميكروغرام في 1 غرام من البراز.
وقت التحليل: 5 دقائق.
تم تصميم قرص واحد لتعريف واحد.

تاريخ الانتهاء: 24 شهرا.

تعليمات مختصر للتطبيق

تحليل

1. قبل البدء في التحديد ، ينبغي أن تبقى جميع العينات التي تم تحليلها من المصل (البلازما) أو الدم الكامل في درجة حرارة الغرفة (+18 - 25 درجة مئوية) لمدة لا تقل عن 20 دقيقة.

2. افتح زجاجة الكاشف لتخفيف العينة.

3. خذ عينة من البراز مع عصا أخذ العينات ، ضعها في قنينة ، أغلق الغطاء واهتز لخلط العينة والعازلة.

.4 اﻓﺗﺢ ﺗﻐﻟﯾف اﻟﻟوﺣﻲ وأزل اﻟﻟوﺣﯾﺔ ووﺿﻌﮭﺎ ﻋﻟﯽ ﺳطﺢ ﻧظﯾف ﻣﻊ وﺟود ﻣﮐﺎن اﺧﺗﺑﺎر.

5. أضف 5 قطرات (~ 120 ميكرولتر) إلى النافذة المستديرة للجهاز اللوحي ، المسمى S (Sample).

6. بعد 5 دقائق (ولكن في موعد لا يتجاوز 10 دقائق) ، تقييم بصري نتيجة للتفاعل.

تفسير نتائج التحليل

تحديد في منطقة الاختبار من قرص 2 أشرطة متوازية من اللون الوردي على مستوى وضع العلامات   تي  و C  يشير إلى نتيجة إيجابية للتحليل.

تحديد الهوية في منطقة الاختبار للقرص من الخط الأول من اللون الأحمر عند مستوى الوسم C  يشير إلى نتيجة سلبية للتحليل.

في حالة وجود خط أحمر عند مستوى الاختبار C  في عداد المفقودين أو يتم الكشف عن خط أحمر واحد على مستوى وضع العلامات تي  نتيجة التحليل غير صالحة ويجب تحديدها باستخدام جهاز لوحي آخر.

شروط التخزين والتشغيل

يجب أن يتم تخزين الطرد في عبوات الشركة المصنعة عند درجة حرارة +2-30 o درجة مئوية في مكان جاف خلال فترة الصلاحية بأكملها. تجميد مكونات المجموعة غير مسموح به.

مدة الصلاحية 24 شهرا.

للحصول على نتائج موثوقة ، الامتثال الصارم لتعليمات الاستخدام.